D5025

脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

Type IV, lyophilized powder, ≥2,000 Kunitz units/mg protein

• 别名: DNase I, 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶
• CAS号: 9003-98-9
• EC 号: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• EC號碼: 232-667-0
• MDL號碼: MFCD00130918
• 分類程式碼代碼: 12352204
• NACRES: NA.54

属性

• 生物源: bovine pancreas
• 種類: Type IV
• 形狀: lyophilized powder
• 比活性: ≥2,000 Kunitz units/mg protein
• 分子量: ~31 kDa
• 純化經由: chromatography
• 成份: Protein, ≥80%
• 技術: DNA purification: suitable
• 溶解度: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear, colorless
• 適合性: suitable for molecular biology
• 應用: diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• 異物活動: Chymotrypsin ≤0.5%; Protease ≤0.05%; RNase ≤0.02%
• 運輸包裝: wet ice
• 儲存溫度: −20°C

说明

應用

DNAse I可用于切开DNA，作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自sigma的该酶已用于处理大鼠的脑组织。该研究表明星形胶质细胞的轴突生长不受少突胶质细胞抑制。在另一项研究中，大肠杆菌的解冻固定样本被来自Sigma的DNAseI以及其他酶进行消化。消化是在进行通透化处理和核酸染色前完成的。

来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于研究枯草芽孢杆菌中核酸酶的二维酶谱分析。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I还用于研究小沟和大沟结合药物和嵌入剂对小沟结合蛋白RecA和脱氧核糖核酸酶I的DNA结合的影响。

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化／生理作用

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg²⁺存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn²⁺存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca²⁺可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠（SDS）和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

單位定義

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A₂₆₀。

外觀

含氯化钙的冻干粉

準備報告

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 °C维持活性最长达五小时，并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液（pH 5.0）和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析報告

蛋白由双缩脲法测定。

安全信息

• 象形圖: GHS08
• 訊號詞: Danger
• 危險聲明: H334
• 防範說明: P261 - P284 - P501
• 危險分類: Resp. Sens. 1
• 儲存類別代碼: 11 - Combustible Solids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 3
• 閃點（°F）: Not applicable
• 閃點（°C）: Not applicable