Centrum referencyjne buforów

• Zakresy pH wybranych buforów biologicznych (25 °C, 0.1 M)
• Tris lub Trizma^® Buffer Preparation - pH vs. Temperatura
• Przygotowanie buforu fosforanowego - 0.2 M roztwór
• Kwas cytrynowy - Na₂HPO₄ Przygotowanie buforu, pH 2.6-7.6
• Kwas cytrynowy - preparat buforowy cytrynianu sodu, pH 3.0-6.2
• Preparat buforowy octan sodu - kwas octowy, pH 3,7-5.6
• Na₂HPO₄₂PO₄ Przygotowanie buforu, pH 5.8-8.0 w 25 °C
• Imidazole (glyoxaline) - HCl Buffer Preparation, pH 6.2-7.8 w 25 °C
• Węglan sodu - preparat buforowy wodorowęglanu sodu, pH 9.2-10.8
• Wzory i równania na przygotowanie buforu

Wybór odpowiedniego buforu biologicznego

Wybierz bufor w oparciu o wymagania dotyczące pH, a także pKa, czyli miarę siły kwasu, która uwzględnia pH, stężenie i temperaturę. Należy również wziąć pod uwagę wymagania regulacyjne lub dotyczące czystości dla konkretnego zastosowania. Poniższe tabele mogą pomóc w przygotowaniu wielu popularnych roztworów buforowych według pH i pKa. 

Oprócz poniższych tabel, opracowaliśmy kilka kalkulatorów receptur buforów, aby pomóc w przygotowaniu buforów.

TBE i TAE do elektroforezy żelowej mają nieco bardziej skomplikowane receptury.

Co to są klasy buforów?

Klasa buforu wskazuje jakość i poziomy zanieczyszczeń odpowiednie do różnych zastosowań. Oferujemy sześć klas buforów wskazanych do ogólnych zastosowań laboratoryjnych, końcowej formulacji farmaceutycznej i produkcji oraz zastosowań pośrednich, które mogą wymagać testowania metali śladowych lub materiałów o określonej czystości.

Użyteczne zakresy pH wybranych buforów biologicznych (25 °C, 0,1 M)

Bufory	Użyteczny zakres pH	pKa (w 20 °C)	pKa (w 25 °C)	pKa (w 37 °C)	Reagent Grade	BioPerformance Certified Grade
MES	5.5-6.7	6.16	6.10	5.97	M8250	M2933
Bis-Tris	5.8-7.2	n/a	6.50	6.36	B9754	B4429
ADA	6.0-7.2	6.65	6.59	6.46	A9883	n/a
ACES	6.1-7.5	6.88	6.78	6.54	A9758	A3594
PIPES	6.1-7.5	6.80	6.76	6.66	P6757	P1851
MOPSO	6.2-7.6	n/a	6.90	6.75	M8389	n/a
Bis-Tris Propane	6.3-9.5	n/a	6.8, 9.0	n/a	B6755	.B4679
BES	6.4-7.8	7.17	7.09	6.90	B9879	B4554
MOPS	6.5-7.9	7.28	7.20	7.02	M1254	M3183
TES	6.8-8.2	7.50	7.40	7.16	T1375	T5691
HEPES	6.8-8.2	7.55	7.48	7.31	H3375	H4034
DIPSO	7.0-8.2	n/a	7.60	7.35	n/a	n/a
MOBS	6.9-8.3	n/a	7.60	n/a	M3295	n/a
TAPSO	7.0-8.2	n/a	7.60	7.39	T9269	n/a
Tris lub Trizma®	7.0-9.0	8.20	8.06	7.72	T1503	T6066
HEPPSO	7.1-8.5	n/a	7.80	6.66	n/a	n/a
POPSO	7.2-8.5	n/a	7.80	7.63	P3405	n/a
TEA	7.3-8.3	n/a	7.80	n/a	n/a	n/a
EPPS	7.3-8.7	n/a	8.00	n/a	E9502	E0276
Tricine	7.4-8.8	8.16	8.05	7.80	T0377	T5816
Gly-Gly	7.5-8.9	n/a	8.20	n/a	G1002	G3915
Bicine	7.6-9.0	8.35	8.26	8.04	B3876	n/a
HEPBS	7.6-9.0	n/a	8.30	n/a	H6903	n/a
TAPS	7.7-9.1	8.49	8.40	8.18	T5130	T5316
AMPD	7.8-9,7	n/a	8.80	n/a	A9754	n/a
TABS	8.2-9.6	n/a	8.90	n/a	n/a	n/a
AMPSO	8.3-9.7	n/a	9.00	9.10	A6659	n/a
CHES	8.6-10.0	9.55	9.49	9.36	C2885	n/a
CAPSO	8.9-10.3	n/a	9.60	9.43	C2278	n/a
AMP	9.0-10.5	n/a	9.70	n/a	n/a	n/a
CAPS	9.7-11.1	10.56	10.40	10.02	C2632	n/a
CABS	10.0-11.4	n/a	10.70	n/a	C5580	n/a

Tris lub Trizma^® Tabela przygotowania buforu - pH w zależności od temperatury

pH w temperaturze
5 °C	25 °C	37 °C
7.76	7.20	6.91
7.89	7.30	7.02
7.97	7.40	7.12
8.07	7.50	7.22
8.18	7.60	7.30
8.26	7.70	7.40
8.37	7.80	7.52
8.48	7.90	7.62
8.58	8.00	7.71
8.68	8.10	7.80
8.78	8.20	7.91
8.88	8.30	8.01
8.98	8.40	8.10
9.09	8.50	8.22
9.18	8.60	8.31
9.28	8.70	8.42
9.36	8.80	8.51
9.47	8.90	8.62
9.56	9.00	8.70

g/L dla 0.05 M roztworu
Trizma® HCL	Trizma® Base
7.02	0.67
6.85	0.80
6.61	0.97
6.35	1.18
6.06	1.39
5.72	1.66
5.32	1.97
4.88	2.30
4.44	2.65
4.02	2.97
3.54	3.34
3.07	3.70
2.64	4.03
2.21	4.36
1.83	4.65
1.50	4.90
1.23	5.13
0.96	5.32
0.76	5.47

Tabela przygotowania buforu fosforanowego - roztwór 0,2 M  

Fosforan potasu jednozasadowy bezwodny g/L	Fosforan sodu Dibasic Heptahydrate g/L	23 °C pH
22.4	3.49	5.7
22.08	4.29	5.8
21.60	5.37	5.9
21.05	6.60	6.0
20.40	8.05	6.1
19.56	9.93	6.2
18.60	12.07	6.3
17.64	14.22	6.4
16.44	16.90	6.5
15.00	20.12	6.6
13.56	23.34	6.7
12.24	26.29	6.8

Fosforan potasu jednozasadowy bezwodny g/L	Fosforan sodu Dibasic Heptahydrate g/L	23 °C pH
10.80	29.51	6.9
9.36	32.73	7.0
7.92	35.95	7.1
6.72	38.63	7.2
5.52	41.31	7.3
4.56	43.46	7.4
3.84	45.07	7.5
3.12	46.68	7.6
2.52	48.55	7.7
2.04	49.09	7.8
1.68	49.89	7.9
1.27	50.81	8.0

Kwas cytrynowy - Na₂HPO₄ Preparat buforowy, pH 2,6-7.6¹

Kwas cytrynowy jednowodny, C₆H₈O₇ - H₂O, MW 210.14; 0,1 M zawiera 21,01 g/L. Na₂HPO₄, MW 141.98; 0.2 M zawiera 28.40 g/L, lub Na₂HPO₄ - 2H₂O, MW 178.05; 0,2 M zawiera 35,61 g/l.

x mL 0,1 M kwasu cytrynowego i y mL 0,2 M-Na₂HPO₄ zmieszane

pH	x mL 0.1 M-kwasu cytrynowego	y mL 0.2-Na2HPO4
2.6	89.10	10.90
2.8	84.15	15.85
3.0	79.45	20.55
3.2	75.30	24.70
3.4	71.50	28.50
3.6	67.80	32.20
3.8	64.50	35.50
4.0	61.45	38.55
4.2	58.60	41.40
4.4	55.90	44.10
4.6	53.25	46.75
4.8	50.70	49.30
5.0	48.50	51.50
5.2	46.40	53.60
5.4	44.25	55.75
5.6	42.00	58.00
5.8	39.55	60.45
6.0	36.85	63.15
6.2	33.90	66.10
6.4	30.75	69.25
6.6	27.25	72.75
6.8	22.75	77.25
7.0	17.65	82.35
7.2	13.05	86.95
7.4	9.15	90.85
7.6	6.35	93.65

Kwas cytrynowy - preparat buforowy cytrynianu sodu, pH 3,0-6.2¹

Kwas cytrynowy jednowodny, C₆H₈O₇ - H₂O, MW 210.14; 0,1 M zawiera 21,01 g/L. Dwuwodny cytrynian trisodu, C₆H₅O₇Na₃ - 2H₂O, MW 294.12; 0,1 M zawiera 29,41 g/L.

x mL 0,1 M kwasu cytrynowego i y mL 0,1 M cytrynianu trisodowego zmieszane

pH	x mL 0.1 M-kwas cytrynowy	y mL 0.1 M-cytrynian trisodowy
3.0	82.0	18.0
3.2	77.5	22.5
3.4	73.0	27.0
3.6	68.5	31.5
3.8	63.5	36.5
4.0	59.0	41.0
4.2	54.0	46.0
4.4	49.5	50.5
4.6	44.5	55.5
4.8	40.0	60.0
5.0	35.0	65.0
5.2	30.5	69.5
5.4	25.5	74.5
5.6	21.0	79.0
5.8	16.0	84.0
6.0	11.5	88.5
6.2	8.0	92.0

Preparat buforowy octan sodu - kwas octowy, pH 3,7-5.6¹

Octan sodu trójwodny, CH₃COONa - 3H₂O, MW 136.09; 0,2 M zawiera 27,22 g/L.

x mL 0,2 M-NaOAc i y mL 0,2 M-HOAc zmieszane

.

pH, 18 °C	x mL 0.2 M-NaOAc	y mL 0.2 M-HOAc
3.7	10.0	90.0
3.8	12.0	88.0
4.0	18.0	82.0
4.2	26.5	73.5
4.4	37.0	63.0
4.6	49.0	51.0
4.8	59.0	41.0
5.0	70.0	30.0
5.2	79.0	21.0
5.4	86.0	14.0
5.6	91.0	9.0

Na₂HPO₄ - NaH₂PO₄ PRZYGOTOWANIE Bufor, pH 5.8-8,0 w 25 °C¹

Na₂HPO₄ - 2H₂O, MW 178,05; 0,2 M zawiera 35,61 g/L. Na₂HPO₄ - 12H₂O, MW 358.22; 0.2 M zawiera 71.64 g/L. NaH₂PO₄ - H₂O, MW 138.01; 0.2 M zawiera 27.6 g/L. NaH₂PO₄ - 2H₂O, MW 156,03; 0,2 M zawiera 31,21 g/L.

x mL 0.2 M-Na₂HPO₄, y mL 0.2 M-NaH₂PO₄; rozcieńczono do 100 mL za pomocą H₂O

pH, 25 °C	x mL 0.2 M-Na2HPO4	y mL 0.2 M-NaH2PO4
5.8	4.0	46.0
6.0	6.15	43.85
6.2	9.25	40.75
6.4	13.25	36.75
6.6	18.75	31.25
6.8	24.5	25.5
7.0	30.5	19.5
7.2	36.0	14.0
7.4	40.5	9.5
7.6	43.5	6.5
7.8	45.75	4.25
8.0	47.35	2.65

Imidazol (glioksalina) - PRZYGOTOWANIE buforu HCl, pH 6,2-7.8 w 25 °C¹

Imidazol, C₃H₄N₂, MW 68.08

25 mL 0,2 M-imidazolu (13,62 g/L), x mL 0,2 M-HCl, rozcieńczono do 100 mL H₂O

.

pH, 25 °C	x mL 0.2 M-HCl
6.2	21.45
6.4	19.9
6.6	17.75
6.8	15.2
7.0	12.15
7.2	9.3
7.4	6.8
7.6	4.65
7.8	3.0

Przygotowanie buforu węglan sodu - wodorowęglan sodu, pH 9,2-10.8¹

Na₂CO₃ - 10H₂O, MW 286,2; 0,1 M zawiera 28,62 g/L. NaHCO₃, MW 84,0; 0,1 M zawiera 8,40 g/L.

x mL 0.1 M-Na₂CO₃ i y mL 0.1 M-Na₂HCO₃ zmieszane

20 °C	37 °C
x mL 0.1 M-Na2CO3	y mL 0.1 M-Na2HCO3
9.2	8.8	10	90
9.4	9.1	20	80
9.5	9.4	30	70
9.8	9.5	40	60
9.9	9.7	50	50
10.1	9.9	60	40
10.3	10.1	70	30
10.5	10.3	80	20
10.8	10.6	90	10

Wzory i równania na przygotowanie buforu

Procent wagowy (w/v)

(% pożądanego buforu / 100) × końcowa objętość buforu (mL) = g potrzebnego materiału wyjściowego.

Roztwory molowe

żądana molarność × masa wzoru × końcowa objętość roztworu (L) = potrzebne gramy

Równanie Hendersona-Hasselbacha

Odniesienie

1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..