03270289001

Zestaw parafinowy RNA o wysokiej czystości

kit of for up to 100 isolations

• Kod UNSPSC: 41105500
• NACRES: NA.55

Właściwości

• Poziom jakości: 100
• producent / nazwa handlowa: Roche
• opakowanie: kit of for up to 100 isolations

Opis

Opis ogólny

Niska do średniej przepustowość izolacji RNA z próbek FFPE.

Zastosowanie

Zestaw High Pure RNA Paraffin Kit izoluje całkowity RNA z zatopionych w parafinie, świeżo zamrożonych tkanek. Jakość uzyskanego RNA jest odpowiednia do względnej kwantyfikacji mRNA za pomocą RT-PCR, szczególnie w systemie Lightcycler^® Carousel-Based System. Dodatkowe zastosowania obejmują:

• RT-PCR
• RT-PCR z wyświetlaniem różnicowym
• Synteza cDNA
• Przedłużanie primerów

Cechy i korzyści

Zestaw High Pure RNA Paraffin Kit izoluje całkowity RNA z utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie tkanek, jak również ze świeżo zamrożonych próbek tkankowych do bezpośredniego użycia w RT-PCR.

• Izolacja RNA odpowiedniego do RT-PCR z archiwizowanych tkanek parafinowych (do 15 lat).
• Uzyskaj skoncentrowany produkt , który jest gotowy do użycia (nie wymaga wytrącania RNA).
• Szybkie przygotowanie całkowitego RNA z wycinków tkanek w około 2 godziny (po całonocnym trawieniu).
• Uzyskanie wysoce czystego RNA do wykorzystania w procedurach kwantyfikacji względnego mRNA (np. w systemie Lightcycler^® ).
• Wyeliminowanie stosowania niebezpiecznych związków organicznych, takich jak chlorek cezu, fenol, chloroform i bromek etydyny.

Komponenty

• Tissue Lysis Buffer
• Proteinase K, PCR-grade
• Binding Buffer
• Wash Buffer I
• Wash Buffer II
• DNase I
• DNase Incubation Buffer
• Elution Buffer
• High Pure Filter Tubes
• Collection Tubes

Jakość

Formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections are homogenized by overnight Proteinase K digestion and purified as described. RNA yield is determined by measuring the optical density at 260 nm. The RNA eluate is used in one-step RT-PCR with specific primers for the ß2M-gene. In the following LightCycler^® PCR, using the LightCycler^® RNA Amplification Kit SYBR Green I and specific primers for ß2M, the expected amplification signal is obtained at a cp-value less then 24. Absence of contaminating genomic DNA is examined by a LightCycler^® PCR without a reverse transcriptase step; no amplification product is obtained.

Uwaga dotycząca przygotowania

Próbki tkanek są rozbijane i homogenizowane podczas całonocnej inkubacji z proteinazą K (próbki parafinowe) lub przy użyciu odpowiedniego homogenizatora tkankowego (tkanki świeżo mrożone). Kwasy nukleinowe wiążą się w obecności soli chaotropowej specyficznie z powierzchnią włókien szklanych wstępnie zapakowanych w rurce filtracyjnej High Pure Purification (1). Reakcja wiązania zachodzi w ciągu kilku sekund z powodu zakłócenia zorganizowanej struktury cząsteczek wody i interakcji z kwasami nukleinowymi. Proces wiązania jest specyficzny dla kwasów nukleinowych, ale warunki wiązania są zoptymalizowane dla RNA. Związany RNA jest oczyszczany w serii krótkich etapów mycia i wirowania w celu usunięcia składników komórkowych. Po elucji z kolumny, pozostałości DNA są trawione przez inkubację eluatu z DNazą I. Drugi etap inkubacji z proteinazą K poprawia czystość RNA. Wreszcie, elucja o niskiej zawartości soli uwalnia RNA z włókniny z włókna szklanego.

Komentarz do analizy

Kwasy nukleinowe wiążą się z powierzchnią szklanej włókniny w obecności soli chaotropowej (guanidyny HCl). Pozwala to rurce filtracyjnej High Pure na specyficzne unieruchomienie kwasów nukleinowych (zarówno DNA, jak i RNA), podczas gdy są one wolne od zanieczyszczeń. W przypadku izolacji RNA warunki wiązania można zoptymalizować, aby zapewnić unieruchomienie całego RNA.

Pojemność: Probówki High Pure Spin Filter Tubes mieszczą do 800 μL objętości próbki.

Materiał próbki:

• 5 - 10 μm skrawki utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie tkanek (np. okrężnica, pierś, wątroba, nerki, śledziona ssaków, w tym próbki z badań na ludziach).
• 20-30 mg świeżo zamrożonej tkanki stałej.
• Skrawki tkanek 3 × 5 μm ze świeżo zamrożonych tkanek.

Inne uwagi

Zestawy wysokiej czystości i adsorpcji krzemionki

Oczyszczony RNA jest wolny od DNA, nukleaz i wszystkich składników komórkowych i próbek, które zakłócają RT-PCR. Zazwyczaj fragmenty RNA wyizolowane z tkanki utrwalonej formaliną mają długość od 150 do 1500 zasad. Większość RNA ma długość 250 zasad.

Wyłącznie do badań naukowych. Nie do użytku w procedurach diagnostycznych.

Informacje prawne

LightCycler is a registered trademark of Roche

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Piktogramy: GHS05,GHS07,GHS08
• Hasło ostrzegawcze: Danger
• Zwroty wskazujące rodzaj zagrożenia: H302 + H312 + H332 - H314 - H317 - H334 - H335 - H412
• Zwroty wskazujące środki ostrożności: P260 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310 - P342 + P311
• Klasyfikacja zagrożeń: Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1C - Skin Sens. 1 - STOT SE 3
• Organy docelowe: Respiratory system
• Zagrożenia dodatkowe: EUH032 - EUH071
• Kod klasy składowania: 13 - Non Combustible Solids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2
• Temperatura zapłonu (°F): does not flash
• Temperatura zapłonu (°C): does not flash