MAB3570

Przeciwciało przeciw miozynie, łańcuch ciężki mięśni gładkich, SM1 i SM2, klon N1/5

clone N1/5 (SM-M5), Chemicon^®, from mouse

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: N1/5 (SM-M5), monoclonal
• Application: ICC, IHC, IP, WB
• Citations: 4

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: N1/5 (SM-M5), monoclonal
• species reactivity: rabbit, bovine, pig, human
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable (paraffin), immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1
• NCBI accession no.: NM_152994.2
• UniProt accession no.: Q6ZMI0
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... MYH11(4629)

Opis

Application

Western blot (patrz uwagi do aplikacji poniżej). Sugerowany bufor blokujący to TBS-Tween z 2% BSA. Sugerowany bufor rozcieńczający to TBS-Tween z 0,05% azydkiem sodu. Preferowany procent żelu wynosi 5% (patrz uwagi do stosowania).

Immunohistochemia na zamrożonych i zatopionych w parafinie skrawkach tkanek. Sugerowane utrwalanie zamrożonych skrawków tkanek to utrwalanie acetonem przez 6 minut w temperaturze pokojowej. W przypadku utrwalonych w formalinie skrawków tkanek zatopionych w parafinie: mikrofale w 0,01 M buforze cytrynianowym (pH 6,0) przez 8-10 minut (należy pamiętać, że wszystkie mikrofale różnią się i może być konieczne dostosowanie), a następnie trawienie enzymatyczne (0,01% pronaza przez 10 minut). Sugerowanym środkiem blokującym jest płodowa surowica bydlęca. Przeciwciało zostało również z powodzeniem zastosowane na utrwalonej tkance metylo-karnoy.

Immunocytochemia

Immunoprecypitacja. Sugerowany bufor do ekstrakcji to 20 mM Tris-HCl, pH 7,4, 150 mM NaCl, 1% Triton X-100, 0,1% SDS, 0,5% kwas dezoksycholowy-NaCl i 0,5 mM PMSF. Końcowa objętość reakcji wynosi 1 ml, a sugerowanym czynnikiem wychwytującym jest sprzężona z agarozą anty-mysia IgG.

Optymalne rozcieńczenia robocze muszą zostać określone przez użytkownika końcowego.

NOTY APLIKACYJNE DLA MAB3570

WESTERN BLOT

Aby uzyskać dobrą rozdzielczość izoform łańcucha ciężkiego miozyny o różnej masie cząsteczkowej (200 - 2004 kDa), należy postępować zgodnie z następującą procedurą: 1). Bufor ekstrakcyjny pirofosforanu do przygotowania próbki (patrz poniżej); przeprowadzić SDS-PAGE w 5% żelu. Ważne: aby uzyskać lepszą rozdzielczość pasm MHC, należy użyć buforu elektroforetycznego o pH 8,2 (tj. o 0,1 mniej niż standardowy) i przygotować żel rozdzielczy (5%) o pH 9,0 (nie 8,8 jak zwykle). Należy również pomóc w dokładnym odtłuszczeniu mieszaniny żelu rozdzielającego (H2O, akrylamid, EDTA, pH 9,0, przed (!) dodaniem SDS, TEMED i APS). Przeprowadzić SDS-PAGE dłużej niż po spłynięciu frontu barwnika (użyć markerów 200 kDa MW i pozwolić, aby pasmo 200 kDa przebiegało co najmniej do połowy żelu 8X8 (użycie żelu o dużym rozmiarze (nie mini-żelu!) poprawi jakość rozdzielczości pasma MHC).

Bufor do ekstrakcji pirofosforanowej: (40 mM Na4P2O7x10H2O, 1 mM MgCl2, 1 mM EGTA (dodać KOH w celu rozpuszczenia EGTA), PMSF, pH 9,5). Aby wyekstrahować akto-miozynę z tkanek/komórek, wytrząsaj zmieloną tkankę lub komórki w zimnym buforze ekstrakcyjnym przez 1 godzinę w łaźni lodowej (0oC), odwiruj @10,000g przez 10 minut w +2-8 oC, weź supernatant i wymieszaj go 1:1 ze standardowym buforem do próbek Laemmli, zagotuj, przeprowadź SDS-PAGE w 5% żelu (patrz wyżej).

Wykrywaj miozynę za pomocą tego przeciwciała przeciw miozynie, łańcuch ciężki mięśni gładkich, SM1 i SM2, klon N1/5 zatwierdzony do stosowania w IP, WB, IC, IH(P).

Physical form

Format: Oczyszczony

Analysis Note

Kontrola
KONTROLA POZYTYWNA:

Mięśnie gładkie (np. błona środkowa tętnicy). Kontrola negatywna: dowolna tkanka niemięśniowa (np. błona środkowa tętnicy).

Other Notes

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Co się dzieje?: WGK 2