HTS114M
ChemiSCREEN Preparat błony ludzkiego receptora PAC1-long
Human PAC1 long isoform / PACAP GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
Ludzki ADCYAP1R1 cDNA kodujący długą izoformę PAC1
PACAP (peptyd aktywujący przysadkową cyklazę adenylanową) jest peptydem, który występuje w 2 formach, 27 lub 38 aminokwasów, i jest związany z wazoaktywnym peptydem jelitowym (VIP). Trzy pokrewne GPCR klasy B, PAC1, VPAC1 i VPAC2, wiążą się z PACAP; jednak VPAC1 i VPAC2 mają znacznie wyższe powinowactwo do VIP niż PAC1 (Vaudry i in., 2000). Kilka wariantów splicingu PAC1 skutkuje białkami, które różnią się na N-końcu i trzeciej pętli wewnątrzkomórkowej; warianty te różnią się powinowactwem do PACAP i zdolnością do aktywacji Gq i Gs. Wysoką ekspresję PAC1 obserwuje się w OUN i rdzeniu nadnerczy. Badania na myszach PAC1-null wskazują, że PAC1 odgrywa ważną rolę w regulacji rytmów okołodobowych, migracji neutrofili i napięcia naczyń płucnych (Hannibal i in., 2001; Martinez i in., 2005; Otto i in., 2004). Preparaty błonowe PAC1-long firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów interakcji PAC1-long z PACAP27. Preparaty błonowe wykazują Kd 2,7 nM dla[125I]-PACAP27. Przy 5 µg/dołek preparatu membranowego PAC1-long i 0,75 nM[125]-PACAP27 uzyskano ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła.
Zastosowanie
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.
Działania biochem./fizjol.
GPCR Class: B
Protein Target: PAC1 long isoform / PACAP
Target Sub-Family: VIP/PACAP
Jakość
Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of PAC1-long membrane prep:
SPECIFICATIONS:
1 unit = 5 µg membrane preparation
Bmax: 52.0 pmol/mg
Kd: 2.7 nM
| 10 µg/well | 5 µg/well | |
|---|---|---|
| Signal:Background | 22.9 | 29 |
| Specific Binding (cpm) | 63650 | 62987 |
SPECIFICATIONS:
1 unit = 5 µg membrane preparation
Bmax: 52.0 pmol/mg
Kd: 2.7 nM
Charakterystyka techniczna
Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona. Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C Radioligand:[125I] PACAP27 (Perkin Elmer # NEX294) Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowanym 125IPACAP27 przy 0,75 nM.
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona. Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C Radioligand:[125I] PACAP27 (Perkin Elmer # NEX294) Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowanym 125IPACAP27 przy 0,75 nM.
Postać fizyczna
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów. Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do wskazanego stężenia w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
D Vaudry et al.
Pharmacological reviews, 52(2), 269-324 (2000-06-02)
Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) is a 38-amino acid peptide that was first isolated from ovine hypothalamic extracts on the basis of its ability to stimulate cAMP formation in anterior pituitary cells. PACAP belongs to the vasoactive intestinal polypeptide (VIP)-glucagon-growth
Carmen Martínez et al.
Journal of leukocyte biology, 77(5), 729-738 (2005-01-22)
Infections caused by Gram-negative bacteria constitute one of the major causes of septic shock, which results from the inability of the immune system to limit bacterial spread during the ongoing infection. In the last decade, it has been demonstrated that
Christiane Otto et al.
Circulation, 110(20), 3245-3251 (2004-11-03)
Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP), acting via 3 different G protein-coupled receptors, has been implicated in the regulation of several homeostatic systems in the body, including cardiopulmonary control. To define the physiologic role of the PACAP-preferring type I receptor, PAC1
J Hannibal et al.
The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience, 21(13), 4883-4890 (2001-06-27)
The circadian clock located in the suprachiasmatic nucleus (SCN) organizes autonomic and behavioral rhythms into a near 24 hr time that is adjusted daily to the solar cycle via a direct projection from the retina, the retinohypothalamic tract (RHT). This
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej