P6635

Phosphorylase b aus Kaninchenmuskel

lyophilized powder, ≥20 units/mg protein, 2× crystallization

• Synonym(e): α-Glucanphosphorylase, 1,4-α-D-Glucan:orthophosphat-α-D-glucosyltransferase, Glykogenphosphorylase
• CAS-Nummer: 9012-69-5
• EC-Nummer: 2.4.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-737-0
• MDL-Nummer: MFCD00131905
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.77

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit muscle
• Qualitätsniveau: 300
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥20 units/mg protein
• Mol-Gew.: 97,200 Da by calculation
• Aufgereinigt durch: 2× crystallization
• Lagerbedingungen: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place)
• Methode(n): mass spectrometry (MS): suitable
• Verunreinigungen: ~0.01 μmol/mg protein 5′-AMP (This low level will not interfere with phosphorylase and phosphorylase kinase assays.)
• UniProt-Hinterlegungsnummer: A0A5F9CLZ9; A0A5F9CRR0; A0A5F9D1C4; A0A5F9DLL9
• Fremdaktivität: phosphoglucomutase ≤1.0%; phosphorylase a ≤10%; phosphorylase kinase ≤0.5%; phosphorylase phosphatase, debrancher enzyme, AMPase and ATPase ≤0.1%
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Forschungsbereich: Zellsignalisierung

Glykogenphosphorylase (PG), ein spezielles komplexes allosterisches Enzym, weist eine evolutionär konservierte Gensequenz auf. GP umfasst eine Familie aus drei Isozymen wie Muskel-GP (mGP), Leber-GP (lGP) und Hirn-GP (bGP) beim Menschen.

Anwendung

Phosphorylase b aus Kaninchenmuskel wird wie folgt verwendet:

• beim Kalibrieren von Sepharose C1-6B-Säulen beim Untersuchen der Molekülmasse von Methylamindehydrogenase-Untereinheiten
• in Ionenmobilitäts-Massenspektrometrie-Untersuchungen von Phosphorylase b-Ionen, die durch das Überladen von Reagenzien im ladungsreduzierenden Puffer erzeugt wurden
• zum Herstellen von p³²-markierter Phosphorylase a mit Phosporylasekinase und [³²P]ATP
• im Phosphorylase-Phosphatase-Assay
• im Enzymassay als Positivkontrolle zum Sicherstellen, dass das Reaktionssystem für die Aktivitätsbestimmung angewandt wurde

Biochem./physiol. Wirkung

Phosphorylase b ist eine nicht aktive Form und kommt in der ruhenden Muskulatur vor. Die Phosphorylase-b-Kinase-Aktivität nimmt signifikant zu, wenn das Mg²⁺:ATP-Verhältnis 1 übersteigt. Es wird davon ausgegangen, dass der Abbau von ATP während der Muskelkontraktion in vivo die Umwandlung von Phosphorylase b auslöst. Phosphorylase b wird von Inosinmonophosphat aktiviert. Das Glykogenphosphorylase(PG)-Enzym spielt eine wesentliche Rolle im ersten Schritt der Glykogenolyse. Im Anfangsstadium der Glykogenolyse trennt Glykogenphosphorylase (GP) die α-1,4-Glykosidbindungen und setzt das Glucose-1-phosphat (G1P)-Molekül frei. Beim Inkubieren mit einer geeigneten Konzentration von Glucose-1-phosphat ohne Zugabe von Primer kann Phosphorylase b aus Kaninchenmuskel proteingebundene Alpha-1,4-glucosyl-Ketten bilden.

Verpackung

Packungsgröße basiert auf dem Proteingehalt.

Einheitendefinition

Eine Einheit bildet bei einem pH-Wert von 6,8 und einer Temperatur von 30 °C in Gegenwart von 5′-AMP aus Glykogen und Orthophosphat 1,0 μMol α-D-Glucose-1-phosphat; dies wird gemessen in einem System, das Phosphoglucomutase, NADP und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase enthält. (Eine μmolare Einheit entspricht ca. 45 Cori-Einheiten.)

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver mit Lactose, 5′-AMP und Mg(OAc)₂ (10 μMol pro 100 mg Protein)

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)