TAQN-RO

Taq-DNA-Polymerase, dNTPack

suitable for PCR, optimum pH ~9.0 (20 °C), dNTPs included

• Synonym(e): DNA-Amplifikation, PCR, Polymerase, Primer-Extension
• EC-Nummer: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Thermus aquaticus BM)
• Qualitätsniveau: 100
• Rekombinant: expressed in E. coli
• Beschreibung: 5 U/βl; Number of Reactions:; If 1.25 U are used per 50 μL reaction, Taq DNA Polymerase, dNTPack is designed for approximately sufficient for number of reactions, mentioned in the usage.
• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 2,000 reactions (04728904001); sufficient for 4,000 reactions (04728858001); sufficient for 400 reactions (04728874001); sufficient for 80 reactions (04728866001); sufficient for 800 reactions (04728882001)
• Mol-Gew.: 95 kDa
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart: no
• Verpackung: pkg of 1,000 U (04728882001 [4 x 250 U]); pkg of 2,500 U (04728904001 [10 x 250 U]); pkg of 5,000 U (04728858001 [20 x 250 U]); pkg of 100 U (04728866001); pkg of 500 U (04728874001 [2 x 250 U])
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 0.025 units/reaction
• Parameter: 72 °C optimum reaction temp.
• Methode(n): PCR: suitable
• Farbe: colorless
• Aufnahme: purified DNA
• Optimaler pH-Wert: ~9.0 (20 °C)
• Löslichkeit: water: soluble
• Eignung: suitable for PCR and automated sequencing reactions
• UniProt-Hinterlegungsnummer: (P19821 · DPO1_THEAQ)
• Anwendung(en): genomic analysis; life science and biopharma
• Fremdaktivität: endonucleases, none detected; exonuclease, none detected; nicking activitities, none detected
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Inhalt
Taq-DNA-Polymerase, 5 U/μl
PCR-Puffer, 10x konzentriert, mit MgCl₂
PCR-Nukleotid-Mix

Für optimalen Anwendungskomfort steht der gebrauchsfertige doppelt konzentrierte PCR-Master zur Verfügung.

Jeder dNTPack enthält 10 mM additivfreie Natriumsalz-Nukleotide in einer gebrauchsfertigen Mischung.

Taq-DNA-Polymerase ist eine hochprozessive 5′→3′-DNA-Polymerase ohne 3′→5′-Exonuklease-Aktivität. Sie besteht aus einer einzelnen Polypeptidkette mit einem Molekulargewicht von etwa 95 kDa.
Taq-DNA-Polymerase wurde ursprünglich aus dem thermophilen Eubakterium Thermus aquaticus BM isoliert, einem Stamm, dem die Taq-I-Restriktionsendonuklease fehlt. Dieses Enzympräparat aus E.coli ist nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren frei von unspezifischen Endo- oder Exonukleasen.

Anwendung

Erzielen Sie äußerst konstante Ergebnisse durch eine einfache, routinemäßige PCR mit der Taq-DNA-Polymerase von Roche Applied Science, die nach strengen Reinheits- und Qualitätsstandards hergestellt wird. In der Taq-DNA-Polymerase, dNTPack, ist unser Standardpräparat (5 U/μl) der rekombinanten Taq-DNA-Polymerase mit unserem anwendungsfreundlichen, gebrauchsfertigen PCR-Nukleotid-Mix kombiniert. In jeder anderen Hinsicht ist dieses Präparat identisch mit unserem Standardpräparat und kann für folgende Anwendungen eingesetzt werden:

• PCR
• RT-PCR
• Andere Primer-Extensionsreaktionen wie Sequenzierung und Markierung

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse: Hohe Konsistenz zwischen den Chargen.
• Es ist nicht erforderlich, jede Charge zu testen: Taq-DNA-Polymerase wird strengen Tests unterzogen.
• PCR-Verschleppungen werden vermieden: Der Einbau von dUTP in Kombination mit Uracil-DNA-Glycosylase verhindert eine PCR-Kreuzkontamination.

Verpackung

1 Kit mit 3 Komponenten

Qualität

Jede Charge wird mittels PCR unter Verwendung von λDNA getestet. Jede Charge wird auch gemäß den aktuellen Qualitätskontrollverfahren auf das Fehlen von Exo- und Endonukleasen sowie auf Nicking-Aktivitäten getestet.

Einheitendefinition

Eine Einheit Taq-DNA-Polymerase ist definiert als die Enzymmenge, die innerhalb von 30 Minuten bei +75 °C unter den unter „Assay“′ angegebenen Assay-Bedingungen 10 nmol der gesamten Desoxyribonukleosidtriphosphate in Säure-fällbare DNA einbaut.

Assay: Inkubationspuffer:
67 mM Tris/HCl; pH 8,3/25 °C, 5 mM MgCl₂, 10 mM Mercaptoethanol, 0,2 % Polydocanol, 0,2 mg/ml Gelatine, je 0,2 mM dATP, dGTP, dTTP und 0,1 mM dCTP.

Inkubationsverfahren:
M13mp9ss, M13-Primer (17mer) und 1 μCi (α^-32P) dCTP werden mit geeigneten Verdünnungen von Taq-DNA-Polymerase in 50 μl Inkubationspuffer bei +65 °C für 60 Minuten inkubiert. Die Menge der eingebauten dNTPs wird durch Trichloressigsäureausfällung bestimmt.

Volumenaktivität: 5 U/μl

Lagerung und Haltbarkeit

Geöffnete Behälter müssen wieder sorgfältig verschlossen und
aufrecht abgestellt werden, um ein Auslaufen des Inhalts zu vermeiden

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Routine-Assays haben mittelgroße Amplikons und einen GC-Gehalt von 50 %. Taq-DNA-Polymerase hat keine Heißstart- oder Korrekturlesefunktion. Sie ist bei +75 °C und einem pH-Wert von 9 optimal aktiv.

Fehlende Restriktionsendonuklease:
Dem ursprünglich aus T. aquaticus BM isolierten Enzym fehlt die Taq-I-Restriktionsendonuklease-Aktivität.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt US-Patentansprüchen und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Nur Kit-Komponenten

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• PCR Nucleotide Mix

Sicherheitshinweise

• H-Sätze: H412
• P-Sätze: P273 - P501
• Gefahreneinstufungen: Aquatic Chronic 3
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash