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Zellproliferationskit I (MTT)

• Synonym(e): mtt
• UNSPSC-Code: 12352200

Eigenschaften

• Form: liquid
• Qualitätsniveau: 100
• Verwendung: sufficient for ≤2,500 tests
• Verpackung: pkg of 1 kit
• Hersteller/Markenname: Roche
• Lagerbedingungen: protect from light
• Methode(n): tissue culture: suitable
• λmax: 550-600 nm
• Anwendung(en): cell analysis; detection
• Nachweisverfahren: colorimetric
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das Cell Proliferation Kit I (MTT) ist ein kolorimetrischer Assay zur nicht-radioaktiven Quantifizierung zellulärer Proliferation, Viabilität und Zytotoxität. Das Probenmaterial beinhaltet entweder adhärente oder suspendierte Zellen, die in einer 96-Well-Mikrotiterplatte kultiviert wurden.

Kolorimetrische Assays analysieren die Zahl der lebensfähigen Zellen mittels Spaltung der dem Kulturmedium zugegebenen Tetrazoliumsalze. Bei dieser Methode ist eine Waschung oder Ernte der Zellen nicht erforderlich und der gesamte Assay – von der Mikrokultur bis hin zur Datenanalyse mit dem ELISA-Lesegerät – wird auf derselben Mikrotiterplatte durchgeführt.
MTT war das erste Tetrazoliumsalz, das beschrieben wurde. Es wird durch Enzyme des endoplasmatischen Retikulums zu Formazan gespalten. Diese Bioreduktion vollzieht sich nur in lebensfähigen Zellen und steht in Zusammenhang mit der NAD(P)H-Produktion durch Glycolyse. Daher korreliert die Menge des gebildeten Formazanfarbstoffs direkt mit der Zahl der metabolisch aktiven Zellen in der Kultur.

Kolorimetrischer (MTT-basierter) Assay für die nicht-radioaktive Quantifizierung zellulärer Proliferation, Viabilität und Zytotoxizität.

Anwendung

Das Cell Proliferation Kit I (MTT) dient zur nicht-radioaktiven spektralphotometrischen Quantifizierung der Zellproliferation und der Viabilität in Zellpopulationen mithilfe von 96-Well-Mikrotiterplatten. Es kann für folgende Anwendungen eingesetzt werden:

• Messung der Zellproliferation als Reaktion auf Wachstumsfaktoren, Cytokine, Mitogene und Nährstoffe
• Analyse zytotoxischer und zytostatischer Verbindungen wie Krebsmedikamente und andere pharmazeutische Wirkstoffe
• Beurteilung wachstumshemmender Antikörper und physiologischer Mediatoren
• Testen der Biokompatibilität verschiedener Zellträger, die bei der Knochengewebszüchtung für das Knochenzellwachstum eingesetzt werden

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Sicher und einfach: Keine radioaktiven Isotope, Waschschritte oder zusätzlichen Reagenzien.
• Präzise: Die erzielte Extinktion korreliert stark mit der Zellzahl.
• Empfindlich: Nachweis geringer Zellzahlen.
• Schnell: Hoher Probendurchsatz durch Anwendung eines Multiwell-ELISA-Lesegeräts.

Der Assay basiert auf der Spaltung des MTT-Tetrazoliumsalzes in Anwesenheit einer Elektron-Kupplungsreagenz. Das wasserunlösliche Formazansalz muss in einem weiteren Schritt gelöst werden. In einer 96-Well-Gewebekulturplatte gezüchtete Zellen werden mit der MTT-Lösung für ca. 4 Stunden inkubiert. Nach dieser Inkubationszeit wird ein wasserunlöslicher Formazanfarbstoff gebildet. Nach der Solubilisierung wird der Formazanfarbstoff mit einem Multiwell-Spektralphotometer (ELISA-Lesegerät) gescannt und quantitativ bestimmt. Die gemessene Extinktion korreliert direkt mit der Anzahl lebensfähiger Zellen.
Zellproliferations- und Zellviabilitätsassays spielen bei Routineanwendungen in der Zellbiologie eine wichtige Rolle. Tetrazoliumsalze (z. B. MTT, XTT, WST-1) sind für diese Art von Analyse besonders nützlich. Tetrazoliumsalze werden durch das Succinat-Tetrazolium-Reduktasesystem (EC 1.3.99.1), das zur mitochondrialen Atmungskette gehört und nur in metabolisch intakten Zellen aktiv ist, zu Formazan gespalten (siehe unten).

Verpackung

1 Kit mit 2 Komponenten.

Angaben zur Herstellung

Lagerbedingungen (Arbeitslösung): 2 bis 8 °C
Nach dem Auftauen können die MTT-Markierungsreagenzien für bis zu 4 Wochen lichtgeschützt bei 2 bis 8 °C aufbewahrt werden. Es wird empfohlen, die Reagenzien daraufhin durch eine Membran mit einer Porengröße von 0,2 μm zu filtern.

Sonstige Hinweise

Gewinner des CiteAb Award 2024 in der Kategorie „Supplier Succeeding in Parkinson′s Research“ (Erfolgreiche Anbieter in der Parkinson-Forschung)

Nur Kit-Komponenten

• MTT Labeling Reagent
• Solubilization Solution

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash