CELLPRO-RO

Zellproliferationsreagenz

suitable for protein quantification, suitable for cell analysis, detection, solution

• Synonym(e): Zellproliferationsreagenz, wst-1
• UNSPSC-Code: 12352200
• NACRES: NA.21

Eigenschaften

• Form: solution
• Qualitätsniveau: 100
• Verwendung: sufficient for ≤2,500 tests (11644807001); sufficient for ≤800 tests (05015944001)
• Verpackung: bottle of 25 mL (11644807001); bottle of 8 mL (05015944001)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Lagerbedingungen: protect from light
• Methode(n): protein quantification: suitable
• Optimaler pH-Wert: 8.0(for physiological conditions our product is buffered pH 7.3)
• λmax: 440-480 nm
• Anwendung(en): cell analysis; detection
• Nachweisverfahren: colorimetric
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Inhalt
Gebrauchsfertige Lösung mit WST-1 und einem Elektronenkopplungsreagenz.

Kolorimetrischer Assay (WST-1-basiert) für die nicht radioaktive Quantifizierung der Zellproliferation, Zellviabilität und Zytotoxizität.

Zellproliferation erfordert die Replikation genomischer DNA. Die Überwachung der DNA-Synthese ist daher ein indirekter Parameter der Zellproliferation und eignet sich gleichzeitig zur Untersuchung der Regulierung der DNA-Synthese. [³H]-Thymidin wird traditionell zur Markierung der DNA replizierender (zyklierender) Zellen. Um die Nachteile, die mit der Verwendung von [³H]-thymidin einhergehen, zu umgehen, wurden nicht radioaktive Alternativen auf Basis von 5-Brom-2′-Deoxyuridin (BrdU) entwickelt. Die Anwendung der Chemilumineszenztechnologie bietet eine erhöhte Sensitivität und einen breiten Messbereich.

Anwendung

Das Zellproliferationsreagenz WST-1 dient zur nicht radioaktiven spektralphotometrischen Quantifizierung der Zellproliferation und der Viabilität in Zellpopulationen im 96-Well-Plattenformat. Die Zellproliferation wird in Antwort auf Wachstumsfaktoren, Cytokine, Mitogene und Nährstoffe gemessen.

• Analyse zytotoxischer und zytostatischer Verbindungen wie Krebsmedikamente und andere pharmazeutische Wirkstoffe
• Beurteilung wachstumshemmender Antikörper und physiologischer Mediatoren

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Praktisch: Gebrauchsfertiges Reagenz.
• Sicher und einfach: Keine radioaktiven Isotope, Waschschritte oder zusätzliche Reagenzien.
• Präzise: Die erzielte Extinktion korreliert stark mit der Zellzahl.
• Empfindlich: Nachweis geringer Zellzahlen.
• Schnell: Hoher Probendurchsatz durch Anwendung eines Multiwell-ELISA-Lesegeräts.

Prinzip

Das stabile Tetrazoliumsalz WST-1 wird durch einen komplexen zellulären Mechanismus, der vorwiegend auf der Zelloberfläche stattfindet, in ein lösliches Formazan gespalten. Diese Bioreduktion hängt größtenteils von der glycolytischen Produktion von NAD(P)H in lebensfähigen Zellen ab. Die gebildete Formazanfarbstoffmenge korreliert daher direkt mit der Anzahl der metabolisch aktiven Zellen in der Kultur.
In einer 96-Well-Gewebekulturplatte gezüchtete Zellen werden mit dem WST-1-Reagenz 0,5 - 4 Stunden inkubiert. Nach dieser Inkubationszeit wird der gebildete Formazanfarbstoff mit einem Multiwell-Spektralphotometer (ELISA-Lesegerät) gescannt und quantitativ bestimmt. Die gemessene Extinktion korreliert direkt mit der Anzahl lebensfähiger Zellen.
Zellproliferations- und Zellviabilitätsassays spielen bei Routineanwendungen in der Zellbiologie eine wichtige Rolle. Tetrazoliumsalze (z.B. MTT, XTT, WST-1) sind für diese Art von Analyse besonders nützlich. Tetrazoliumsalze werden durch das Succinat-Tetrazolium-Reduktasesystem (EC 1.3.99.1), das zur mitochondrialen Atmungskette gehört und nur in metabolisch intakten Zellen aktiv ist, zu Formazan gespalten.

Angaben zur Herstellung

Arbeitskonzentration: Um die besten Ergebnisse zu erzielen, geben Sie 10 μl/Well Zellproliferationsreagenz WST-1 zu den Zellen, die bereits in 100 μl/Well kultiviert werden (1:10 Endverdünnung).
Bei Verwendung des 100 μl/Well Zellkulturvolumens reicht ein Fläschchen zur Durchführung von 2500 Tests (25 Mikrowellplatten).
Hinweis: Wenn die Zellen in 200 μl/Well kultiviert werden, geben Sie 20 μl/Well Zellproliferationsreagenz WST-1 hinzu.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): 2 bis 8 °C
Hinweis: Wenn beim Auftauen Präzipitate oder Trübung beobachtet werden, wärmen Sie die Lösung 2 bis 10 Minuten auf 37 °C auf und schwenken Sie die Flasche, um die Präzipitate aufzulösen. Eine Zentrifugation wird nicht empfohlen, da sie die Arbeitskonzentration reduzieren würde. Nach dem Auflösen kann das WST-1-Reagenz ohne Einschränkungen verwendet werden. Hinweise zur Lagerung:
Nach dem Auftauen bei 2 bis 8 °C vor Licht geschützt bis zu vier Wochen aufbewahren. Beachten Sie jedoch bitte, dass die Lösung viskos werden kann. Erwärmen Sie die Lösung in diesem Fall wie oben beschrieben 2 bis 10 Minuten auf 37 °C.

Langzeitlagerung
Für die langfristige Lagerung können Aliquote von WST-1 in Kunststoffröhrchen bei -15 bis -25 °C bis zum Verfallsdatum aufbewahrt werden.

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: nwg
• Flammpunkt (°F): No data available
• Flammpunkt (°C): No data available