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ホームApplicationsタンパク質生物学ELISA（酵素結合免疫吸着測定法）

ELISA（酵素結合免疫吸着測定法）

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直接アッセイのプロセスを示す図。「Ag」とラベル付けされた一次抗体複合体が「E」とラベル付けされた酵素に結合し、それが基質と相互作用する様子を示している。
免疫学における間接アッセイのプロセスを示す図。基質、一次抗体と二次抗体、抗原（Ag）などのさまざまなコンポーネント間の相互作用を示している。
ELISA検出－サンドイッチ法

ELISAは、通常マルチウェルプレートを用いて行われる分子生物学的アッセイで、ペプチド、タンパク質および抗体などのさまざまな分子の検出および定量に広く用いられます。このようなアッセイでは、目的の分子をpg/mLのレベルで検出でき、基礎研究および疾病研究の両方のアプリケーションにおいて必要不可欠となっています。

ELISAアッセイ：抗原抗体反応

ELISAの基本的な構成は、プレートに固定した目的分子、酵素標識した抗体、検出用基質です。ELISAから得られるデータの品質を決定する重要な要素は、抗原抗体反応の親和性および特異性です。抗原抗体反応は、pH、温度およびイオン強度など、多くの要素の影響を受けます。

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ELISAの検出法

直接法を用いたELISAでは、アッセイプレート表面に直接結合させた抗原、またはキャプチャ抗体によって間接的に結合した抗原と、酵素標識した抗原特異的一次抗体、そして検出用基質が必要です。

より広く用いられている間接法では、非標識の一次抗体と、一次抗体を特異的に検出する標識二次抗体の2つの抗体を使用します。間接法では、標識した酵素が二次抗体上にしか存在しないため、抗原と一次抗体との免疫反応性が高まるという利点があります。

直接法および間接法に加えて、サンドイッチ法では、マイクロプレート表面に結合させた抗原キャプチャ抗体と、上記間接法と同様、一次抗体と酵素標識二次抗体を使用します。 

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