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安全性情報

DUO92014

Sigma-Aldrich

Duolink ®in situ検出試薬グリーン

別名:

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

UNSPSCコード:
12352200
NACRES:
NA.32

製品種目

Duolink®

品質水準

200

テクニック

proximity ligation assay: suitable

蛍光検出

λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)

適合性

suitable for fluorescence

輸送温度

dry ice

保管温度

−20°C

詳細

Duolink® In Situ検出試薬グリーンには、結合したPLA®プローブの増幅および検出を行うために必要なDuolink In situ試薬のすべてが含まれています。検出プローブには、Cy®2または FITCと同じフィルターを使用して視覚化できるフルオロフォア（lex = 495 nm 、lem = 527 nm）が含まれています。Duolink In situ試薬を用いて実施する実験で、固定細胞および組織サンプル中のタンパク質相互作用、タンパク質相互作用、タンパク質発現レベル、翻訳後修飾を単一分子レベルで検出し視覚化できます。

特異性

緑色の蛍光検出試薬の多くは、FITCフィルターとともに使用されます。

アプリケーション

Duolink®近接ライゲーションアッセイ（PLA®）により、固定化された細胞や組織サンプルにおけるタンパク質相互作用、翻訳後修飾、1種類のタンパク質の発現レベルを検出することができます。
Duolink® In Situ検出試薬は、下記の近接ライゲーションアッセイに使用されています：
  • 凍結ラット脳切片からのバソプレシンおよび性腺刺激ホルモン放出ホルモン（GnRH）
  • ヒト胎児由来腎臓293細胞（HEK）
  • 下垂体組織

特徴および利点

  • 過剰発現や遺伝子操作は不要
  • 高い特異性（より少ない偽陽性）
  • ローリングサークル型の増幅による単一分子の感度
  • 相対的な定量が可能
  • 特別な機器は不要
  • FRETよりも迅速で簡単
  • co-IPと比較して精度が向上
  • 論文などにそのまま使用できる結果

構成

  • 5ｘライゲーション－PLAプローブおよびライゲーションに必要なすべての成分（リガーゼを除く）にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド
  • 1xリガーゼ（1単位/μL）
  • 1xポリメラーゼ（10単位/μL）
  • 5x増幅グリーンーローリングサークル増幅（RCA）に必要なすべての成分（ポリメラーゼを除く）を含みますまた、RCA産物とハイブリダイズするフルオロフォラで標識したオリゴヌクレオチドプローブも含みます。
詳細についてはデータシートをご覧ください。

検出キットに含まれないもの：

一次抗体、PLAプローブ、洗浄バッファー、封入剤

調製ノート

完全なDuolink® PLA in situ実験を行うには、2つのターゲットエピトープを認識する2つの一次抗体が必要です（PLA、IHC、ICCまたはIFで検証済み）。必要なその他の試薬には、異なる種由来のPLAプローブ1対(一方がPLUS、もう一方がMINUS)、検出試薬、洗浄緩衝液、マウンティング培地などがあります。一次抗体は、Duolink® PLAプローブとして同じ種に由来するものでなければならないことに注意してください。解析は、標準的な免疫蛍光検査機器を用いて行います。

保管および安定性

成分を－20℃で保存してください。酵素は常に低温（－20℃）に保つ必要があり、冷凍庫から取り出すときには凍結ブロックを使用してください。

その他情報

本製品はDuolink® In Situ蛍光プロトコルに従って使用してください。簡易取扱説明書一式を用意しています。

Duolink®を用いた実験、応用例、トラブルシューティングの方法などの情報は、Duolink® PLAリソースセンターのサイトをご覧ください。

完全なDuolink® PLA in situ実験を行うには、2つのターゲットエピトープを認識する2つの一次抗体が必要です（PLA、IHC、ICCまたはIFで検証済み）。必要なその他の試薬には、異なる種由来のPLAプローブ1対(一方がPLUS、もう一方がMINUS)、検出試薬、洗浄緩衝液、マウンティング培地などがあります。一次抗体は、Duolink® PLAプローブとして同じ種に由来するものでなければならないことに注意してください。解析は、標準的な免疫蛍光検査機器を用いて行います。

Duolink®プロジェクトを推進するため、カスタムサービスプログラムで詳細をご覧になり、メルクにお申し付けください。

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法的情報

Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

ピクトグラム

Health hazard
GHS08

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

H334

注意書き

P261 - P284 - P501

危険有害性の分類

Resp. Sens. 1

保管分類コード

10 - Combustible liquids

適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

毒物及び劇物取締法

キットコンポーネントの情報を参照してください

PRTR

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消防法

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労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

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労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

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カルタヘナ法

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Jan Code

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試験成績書（COA）

製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。

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Protein Phosphatase 1c Associated with the Cardiac Sodium Calcium Exchanger1 Regulates its Activity by Dephosphorylating Serine 68 Phosphorylated Phospholemman.
Hafver T L, et al.
The Journal of Biological Chemistry, M115-M115 (2015)
Xiaofan Li et al.
PLoS pathogens, 13(3), e1006249-e1006249 (2017-03-02)
Trials to reintroduce chloroquine into regions of Africa where P. falciparum has regained susceptibility to chloroquine are underway. However, there are long-standing concerns about whether chloroquine increases lytic-replication of Epstein-Barr virus (EBV), thereby contributing to the development of endemic Burkitt
Xiaofan Li et al.
Journal of virology, 93(17) (2019-06-14)
Herpesviruses are ubiquitous, and infection by some, like Epstein-Barr virus (EBV), is nearly universal. To persist, EBV must periodically switch from a latent to a replicative/lytic phase. This productive phase is responsible for most herpesvirus-associated diseases. EBV encodes a latency-to-lytic
Travis Rush et al.
Neurobiology of disease, 134, 104668-104668 (2019-11-08)
The microtubule-associated protein Tau is strongly implicated in Alzheimer's disease (AD) and aggregates into neurofibrillary tangles in AD. Genetic reduction of Tau is protective in several animal models of AD and cell culture models of amyloid-β (Aβ) toxicity, making it
M Aubele et al.
British journal of cancer, 103(5), 663-667 (2010-08-12)
Protein tyrosine kinase 6 (PTK6; breast tumour kinase) is overexpressed in up to 86% of the invasive breast cancers, and its association with the oncoprotein human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) was shown in vitro by co-precipitation. Furthermore, expression
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資料

Duolink® PLA蛍光検出プロトコル

細胞および組織中のタンパク質の免疫蛍光検出プロトコル

How to Optimize the Duolink® Proximity Ligation Assay

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Duolink™近接ライゲーションアッセイを最適化する方法

Duolink™アッセイプロトコルの準備・セットアップ・実施にあたり考慮すべき事項

Duolink® PLA Troubleshooting Guide

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

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プロトコル

Duolink® In Situ Short Instructions - Fluorescence

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

Duolink® PLA Fluorescence Protocol

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

Duolink™ In Situ 簡易プロトコル – 蛍光顕微鏡観察用

このページでは、蛍光顕微鏡観察のためのDuolink™ In Situの簡易プロトコルを紹介しています。

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近接ライゲーションアッセイを用いたタンパク質間相互作用、翻訳後修飾、低発現タンパク質の検出、定量および可視化などの応用例

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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