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使用法
sufficient for 500 reactions
sufficient for 5000 reactions
品質水準
特徴
dNTPs included: no
hotstart
メーカー/製品名
Roche
包装
pkg of 500 x 20 μL reactions (04673484001)
pkg of 5000 x 20 μL reactions (04673492001)
テクニック
RT-qPCR: suitable
qPCR: suitable
入力
purified DNA
検出方法
probe-based
関連するカテゴリー
詳細
FastStart™ SYBR® Green Masterは、LightCycler®装置以外のリアルタイムPCRシステムでの定量的ポリメラーゼ連鎖反応(qPCR)および逆転写(RT)-qPCR用の、ROXを含まないすぐに使用できるホットスタート反応混合液です。このマスター混合液を使用すれば、DNAの検出および分析のための反応液の調製が簡単になります。リアルタイムPCR装置、適切なPCR用プライマーおよび加水分解プローブと組み合わせてFastStart™ TaqMan® Probe Masterを使用することにより、特定のDNA配列の非常に高感度な検出および定量化が可能です。
SYBR® Green Iは、二本鎖DNA特異的色素です。各段階のDNA合成で、反応混合液に含まれるSYBR® Green I色素は、増幅されたPCR産物に結合します。蛍光によりアンプリコンを検出することができます。
ホットスタート産物では、特異性、感度、およびPCR収率が著しく改善されることが証明されています。FastStart™ Taq DNAポリメラーゼの一部のアミノ酸残基には熱不安定性のブロック基があり、室温ではこれが改変酵素を不活化します。したがって、プライマーが非特異的に結合できる間は、伸長が生じません。FastStart™ Taq DNAポリメラーゼは、高温(すなわち、+95℃におけるプレインキュベーション段階)でブロック基を除去することにより活性化されます。
FastStart™ SYBR® Green Masterは、GCまたはAT含量が多いDNA配列を含む、あらゆるDNAまたはcDNA標的配列の増幅および検出に使用することができます。しかし、現在使用中の検出プロトコルを、使用する特定のリアルタイムPCR機器に適合させたり、標的ごとに特定のPCRプライマーを設計したりすることが必要になります。
このマスター混合液とメルクのTranscriptor First Strand cDNA合成キットを組み合わせることで、2段階qRT-PCRで優れた結果を得てください。
アプリケーション
- アデノ随伴ウイルス(AAV)力価測定のための定量的ポリメラーゼ連鎖反応(qPCR)
- グリセロアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ(GAPDH)と比較した各Col6a1~3遺伝子の発現レベルの測定のためのqPCR
- Gタンパク質共役エストロゲン受容体1(GPER)mRNAの定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(qRT-PCR)
- 遺伝子発現研究のためのqRT-PCR
LightCycler®装置以外のあらゆるリアルタイムqPCR装置でFastStart™ SYBR® Green Masterをご使用ください。
特徴および利点
- PCRの感度と特異性を改善します:
- qPCRの結果の過剰評価を回避します:
- 広範囲にわたるDNAまたはcDNA標的の増幅と検出を行えます:
- LightCycler®機器以外のあらゆるリアルタイムPCR機器を使用することができます:
- qPCRの準備にかかる時間と労力を削減します:
- キャリーオーバー汚染によって生じる偽陽性の発生を防止します:
構成
品質
その他情報
原理上、FastStart SYBR Green Masterは、GC-リッチまたはAT-リッチな標的を含めて、あらゆるDNAまたはcDNA標的の増幅および検出に使用することが可能です。しかし、標的ごとに、以下の操作が必要になります:
- 現在使用中の検出プロトコルを、使用する特定のリアルタイムPCR機器に適合させ、
- 標的のための特定のPCRプライマーを設計します。
一般的な推奨事項につきましては、ご使用中のリアルタイムPCR機器の操作者マニュアルをご参照ください。
2種類の形態が利用可能です
マスター混合液は2種類の形態、すなわちROX基準色素を含むものと含まないものを利用できます。
キャリーオーバー汚染を防止します
このマスター混合液にはdUTPが含まれており、これがPCR産物に組み込まれることで、キャリーオーバー汚染によって生じる擬陽性の防止に役立ちます。次のPCRを行う際に、ウラシル-DNAグリコシラーゼを加えて、ウラシルを含むキャリーオーバー汚染物質 (前回のPCRに由来する増幅産物) を分解させることができます。
qRT-PCR
このマスター混合液と弊社の2段階qRT-PCR用Transcriptor First Strand cDNA合成キットを組み合わせます。このキットを用いることで、すべてのリアルタイムPCR機器で良好な結果と作業効率が得られます。
法的情報
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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資料
Watch these videos to learn how real time or quantitative PCR (qPCR) works and the benefits of both the SYBR Green-based and probe-based methods of qPCR assay.
PCRマスターミックスは、多数のPCR反応チューブに分割できるPCR試薬またはRT-PCR試薬の混合物です。通常は、DNAポリメラーゼ、dNTP、MgCl2、バッファーが含まれます。独自のマスターミックスを調製するか、市販のものを選択できます。
PCR master mix simplifies PCR/RT-PCR with components like DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, and buffer, available commercially or DIY.
The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields.
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ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は核酸分子増幅技術の1つであり、RT-PCR、ホットスタートPCR、エンドポイントPCRを含む多くのアプリケーションで広く使用されています。
Polymerase chain reaction (PCR) is a technique for amplifying nucleic acid molecules and is commonly used in many applications, including RT-PCR, hot start PCR, end point PCR and more.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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