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ウラシル-DNAグリコシラーゼ

recombinant from E. coli K 12

• 別名: PCR, UDG
• UNSPSCコード: 41106300

特性

• リコンビナント: expressed in E. coli
• 品質水準: 100
• 形状: solution
• 包装: pkg of 100 U
• メーカー／製品名: Roche
• 濃度: 1000 U/mL
• テクニック: PCR: suitable; mutagenesis: suitable
• 色: colorless
• pH: 7.9-8.1 (68 °F)
• 溶解性: water: miscible
• 適合性: suitable for molecular biology
• アプリケーション: life science and biopharma
• その他の活性: RNases 10 units, none detected; endonuclease 20 units, none detected
• 保管温度: −20°C

詳細

詳細

ウラシルDNAグリコシラーゼ（UNG）には、原核生物と真核生物にみられる同じ名前の酵素の非常に活性の高い組換え体が含まれています。これは、1本鎖または2本鎖DNAのウラシル-グリコシド結合を加水分解し、ウラシルを切除する結果、DNAにアルカリ感受性の無塩基部位が生じます。これら無塩基部位は、エンドヌクレアーゼ、加熱またはアルカリ処理により加水分解されます。DNAの調製方法に応じて、ウラシルDNAグリコシラーゼを用いて、一般的、部位特異的または鎖特異的なU-DNA切断を達成できます。

特異性

• ウラシルDNAグリコシラーゼは、一本鎖および二本鎖DNAのU-DNA部位でウラシル-グリコシド結合を加水分解し、ウラシルを切除し、DNAにアルカリ感受性の脱塩基部位をもたらします。
• 本酵素は、二本鎖DNA上よりも一本鎖DNA上で活性があります。
• また、活性は小さなU-DNAオリゴヌクレオチドおよびdUMPでも認められました（Duncan、未発表所見）。
• ウラシルDNAグリコシラーゼは、RNAおよび天然のウラシルフリーDNAに対して不活性です。

熱失活： 95°Cで10分間
ウラシルDNAグリコシラーゼは、95°Cで30分間のインキュベーション後、部分的に活性（<10%）が維持されています。

アプリケーション

ウラシルDNAグリコシラーゼを用いて、デオキシウリジル酸残基が組み込まれている任意の部位でDNAを切断できます。U-DNAは、PCRのようなin vitroの方法で調製できます。U-DNAの調製方法に応じて、ウラシルDNAグリコシラーゼを用いて、一般的、部位特異的または鎖特異的切断を達成できます。したがって、ウラシルDNAグリコシラーゼは以下のことに役立ちます：

• PCRでのキャリーオーバー汚染を防止することに
• 部位特異的変異誘発処理の効率を高めることに
• オリゴヌクレオチドプローブを標識することに

品質

増幅反応の前に、テンプレートを含む約10⁵dUを加えることにより、キャリーオーバー防止活性がアッセイされます。UNG処理後、増幅産物は検出できませんでした。本酵素は汚染要因のエキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼを含まず、RNaseが存在しないことを検査されます。

単位の定義

1単位は、+37°C、60分間で1 μgの精製一本鎖ウラシルを含むDNA（バクテリオファージM13、E.coli CJ 236 dut-ung-で増殖）を完全に分解するのに必要なウラシルDNAグリコシラーゼの量として定義されます 。
1 Lindahl単位は、1分間に+37°Cで1 μmolウラシルを放出するのに必要な酵素の量として定義されます。弊社の単位の定義に基づけば、1 Lindahl単位は520,000 Uに相当します。

容量活性：1 U/μl

物理的形状

本酵素は、保存用緩衝液中の1 U/μl溶液として提供されます。

保管および安定性

凍結OK（DNA合成後）

その他情報

ライフサイエンス研究専用です。診断にはご使用になれません。

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): No data available
• 引火点(℃): No data available