Protocollo per l’adesione delle cellule su poli-L-lisina

Adesione delle cellule a una superficie utilizzando la poli-lisina

La poli-L-lisina è un fattore di adesione aspecifico per le cellule e si usa per favorire l’adesione di queste ultimi a substrati solidi perché potenzia le interazioni elettrostatiche tra gli ioni carichi negativamente sulla membrana cellulare e la superficie di coltura. Dopo adsorbimento sulla superficie di coltura, la poli-lisina aumenta il numero di siti di legame carichi positivamente. Il protocollo seguente è adatto ai prodotti P4707*, P4832*, P7280, P6407, P7405, P9155, P6282 e P5899. 

Le condizioni ottimali andranno stabilite per ogni linea cellulare e per ogni applicazione.

1. Aggiungere 50 mL di acqua sterile per colture tissutali a 5 mg di poli-lisina.
2. Con tecnica asettica, rivestire la superficie della coltura con 1,0 mL/25 cm² (soltanto). Far ruotare delicatamente la piastra per rivestire uniformemente la superficie.
3. Dopo 5 minuti, rimuovere la soluzione aspirandola e risciacquare bene la superficie con acqua sterile per colture tissutali.
4. Lasciar asciugare per almeno 2 ore prima di aggiungere il terreno e le cellule.

*NOTA: il passaggio 1 non è richiesto se si usano le soluzioni di poli-lisina (P4707 e P4832).