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D7440

Sigma-Aldrich

Mix per PCR quantitativa JumpStart™ Taq ReadyMix™

For probe-based real-time PCR

Sinonimo/i:

hot start DNA polymerase, hot start PCR, hot start master mix, qPCR, real time quantitative PCR

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About This Item

Codice UNSPSC:
41106300
NACRES:
NA.55

Forma fisica

liquid

impiego

sufficient for 100 reactions
 sufficient for 20 reactions
 sufficient for 400 reactions

Caratteristiche

Multiplex PCR
dNTPs included
hotstart

Concentrazione

2.5 units/reaction (50 μL reaction volume)

tecniche

qPCR: suitable

Colore

colorless

input

purified DNA

applicazioni

agriculture

Compatibilità

Bio-Rad MyiQ ( )
 Bio-Rad iCycler iQ
 Bio-Rad iQ 5
for use with ABI 5700
for use with ABI 7000
for use with ABI 7300
for use with ABI 7500 Fast
for use with ABI 7500
for use with ABI 7700
for use with ABI 7900 Fast
for use with ABI 7900 HT
for use with ABI 7900
for use with ABI StepOne
for use with ABI StepOnePlus
for use with ABI ViiA 7
for use with Bio-Rad CFX384
for use with Bio-Rad CFX96
for use with Bio-Rad MJ Chromo4
for use with Bio-Rad MJ Opticon 2
for use with Bio-Rad MJ Opticon Cepheid SmartCycler
for use with Bio-Rad MJ Opticon
for use with Bio-Rad MiniOpticon
for use with Eppendorf® Mastercycler ep realplex2 s
for use with Eppendorf® Mastercycler ep realplex
for use with Illumina Eco qPCR
for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene 3000
for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene 6000
for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene Q
for use with Roche LightCycler 480
for use with Strategene Mx3000P
for use with Strategene Mx3005P
for use with Strategene Mx4000

Metodo di rivelazione

probe-based

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Descrizione generale

JumpStart™ Taq ReadyMix™ è una miscela master 2X pronta all′uso che contiene Taq DNA polimerasi JumpStart™ , dNTP puri al 99%, tampone di reazione e anticorpo Taq JumpStart™ . Unisce i vantaggi in termini di prestazioni dell′anticorpo JumpStart™ Taq per PCR Hot Start e la praticità di una miscela di reazione di facile impiego. Poiché non contiene coloranti è la soluzione ideale per implementare metodi PCR quantitativi ad alta resa che fanno ricorso a sonde fluorescenti. La Taq DNA polimerasi è un enzima hot-start inattivato da anticorpo. Non appena la temperatura di reazione raggiunge i 70 °C il complesso DNA polimerasi-anticorpo si dissocia e l′attività della Taq DNA polimerasi viene ripristinata. Questo complesso anticorpo-enzima consente una preparazione semplice e pratica con un minore rischio di contaminazione rispetto alle tecniche hot start manuali.

Applicazioni

La JumpStart™ Taq ReadyMix™ per la PCR quantitativa è stata usata:

  • per l'amplificazione dell'RNA del virus HIV-1 mediante reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR) dopo trascrizione inversa a DNA utilizzando delle sonde;
  • in un saggio di RT-qPCR in 2 passaggi per quantificare l'RNA dopo trascrizione inversa in uno studio per monitorare l'attività della liquirizia nella differenziazione e nella funzionalità di cellule T-reg;
  • come componente della miscela di reazione per l'identificazione e l'amplificazione del DNA di Salmonella sp. e del plasmide pUC 19 come controllo interno dell'amplificazione (IAC);
  • come componente della miscela di reazione per l'identificazione del DNA di Clostridium difficile mediante reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR)
  • per la PCR quantitativa real-time dell'mRNA di ß-arrestina-1 (ARRB1) e β-arrestina-2 (ARRB2) dopo trascrizione inversa

Caratteristiche e vantaggi

  • Massima praticità: le miscele ReadyMix contengono tutti i componenti necessari per la qPCR; è sufficiente aggiungere la chimica di rilevamento in fluorescenza, i primer e lo stampo.
  • Maggiore specificità & incremento della resa del target: la JumpStart™ Taq impedisce l′amplificazione aspecifica e aumenta la resa del target
  • Massima flessibilità: adatta per l'uso con diverse tipologie di chimiche di rilevamento, comprese quelle con sonde molecolari e con coloranti che legano il DNA a doppio filamento come SYBR® Green I.
  • Progettata per l′uso con ciclatori termici real-time su piastra/provetta o strumenti capillari

Confezionamento

Il colorante di riferimento Sigma per PCR quantitativa è incluso separatamente alla ReadyMix ed è utilizzabile per la normalizzazione dei dati della reazione. Questo colorante ha massima eccitazione a 586 nm e massima emissione a 605 nm. Per la misurazione del colorante di riferimento per la PCR quantitativa possono essere utilizzate le impostazioni dello strumento per il colorante di riferimento ROX. Viene fornita anche una provetta di MgCl2 25 mM per una facile ottimizzazione della reazione qPCR.

Il volume di reazione predefinito è di 50 μL

20RXN confezione da 1 X 500 μL
100RXN confezione da 1 X 2.5 mL
400RXN confezione 1 X 10 mL

Altre note

La miscela per PCR quantitativa JumpStart Taq ReadyMix combina i vantaggi di un enzima hot start con una miscela pronta all′uso per una PCR quantitativa (qPCR) ad alto rendimento. È formulata senza una chimica di rilevamento, il che la rende adatta per l'uso con una varietà di formati, comprese sonde a doppia marcatura, molecular beacons, o a coloranti che legano il DNA a doppio filamento come il SYBR Green I.

Principio

La miscela ReadyMix include DNA polimerasi Taq JumpStart, desossinucleotidi puri al 99% e un tampone concentrato 2x, ottimizzato per la reazione. Per preparare una reazione, 25 μL di ReadyMix vengono aggiunti a primer, templato, chimica di rilevamento e acqua per un volume di reazione totale di 50 μL. La preparazione può essere eseguita a temperatura ambiente poiché l'anticorpo JumpStart Taq rende inattiva la Taq DNA polimerasi. Durante la prima fase di denaturazione, l′anticorpo si dissocia dall′enzima e l′attività della polimerasi viene completamente ripristinata. Non sono richieste preparazioni particolari o modifiche al protocollo.

Definizione di unità

Un′unità incorpora 10 nmol di dNTP totali in DNA precipitabile in acido in 30 minuti a 74 °C.

Note legali

Una licenza per eseguire un processo di nucleasi 5′ a scopo di ricerca si ottiene con l′acquisto di (i) un kit 5′ Nuclease Core autorizzato più la sonda concessa in licenza (ii) un kit 5′ Nuclease Core con licenza oppure (iii) diritti di licenza da Applied Biosystems.

Questo prodotto è un kit 5′ Nuclease Core autorizzato L′utilizzo di questo prodotto è coperto dai brevetti USA indicati di seguito e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA: brevetto No. 5,210,015 and 5,487,972. L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell'acquirente. L'acquisto separato di una sonda con licenza conferirebbe i diritti ai sensi dei brevetti statunitensi e alle corrispondenti rivendicazioni di brevetto al di fuori degli Stati Uniti: 5,538,848, 5,723,591, 5,876,930, 6,030,787, 6,258,569, 5,804,375 (solo rivendicazioni 1-12) e rivendicazioni al di fuori degli Stati Uniti corrispondenti al brevetto USA n. 6.214.979. Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede alcun diritto a qualsiasi altra rivendicazione di brevetto e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti dietro pagamento o altro corrispettivo commerciale. Prodotto destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici brevettati da Roche richiedono una licenza separata di Roche. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze possono essere ottenute contattando il Direttore Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.
Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG
JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
SYBR is a registered trademark of Life Technologies

I componenti del kit sono disponibili anche separatamente

N° Catalogo
Descrizione
SDS
  • P2893JumpStart™ Taq ReadyMix™, Complete optimized reagent for hot-start PCR at 2X concentration 2 XSDS
  • M878725 mM MgCl2 1.5 μLSDS
  • R4526Reference Dye for Quantitative PCR, 100 ×, solution 100 XSDS

Pittogrammi

Exclamation markEnvironment
GHS07,GHS09

Avvertenze

Warning

Indicazioni di pericolo

H315,H317,H319,H410

Classi di pericolo

Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1

Codice della classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

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