D7440

Mix per PCR quantitativa JumpStart^™ Taq ReadyMix^™

For probe-based real-time PCR

• Sinonimo/i: hot start DNA polymerase, hot start PCR, hot start master mix, qPCR, real time quantitative PCR
• NACRES: NA.55
• UNSPSC Code: 41106300

Proprietà

• Quality Segment: 200
• form: liquid
• usage: sufficient for 100 reactions, sufficient for 20 reactions, sufficient for 400 reactions
• feature: dNTPs included, hotstart
• concentration: 2.5 units/reaction (50 μL reaction volume)
• technique(s): RT-qPCR: suitable, qPCR: suitable, whole genome amplification: suitable
• color: colorless
• input: purified DNA
• application(s): agriculture
• compatibility: Bio-Rad MyiQ ( ), Bio-Rad iCycler iQ, Bio-Rad iQ 5, for use with ABI 5700, for use with ABI 7000, for use with ABI 7300, for use with ABI 7500 Fast, for use with ABI 7500, for use with ABI 7700, for use with ABI 7900 Fast, for use with ABI 7900 HT, for use with ABI 7900, for use with ABI StepOne, for use with ABI StepOnePlus, for use with ABI ViiA 7, for use with Bio-Rad CFX384, for use with Bio-Rad CFX96, for use with Bio-Rad MJ Chromo4, for use with Bio-Rad MJ Opticon 2, for use with Bio-Rad MJ Opticon Cepheid SmartCycler, for use with Bio-Rad MJ Opticon, for use with Bio-Rad MiniOpticon, for use with Eppendorf^® Mastercycler ep realplex2 s, for use with Eppendorf^® Mastercycler ep realplex, for use with Illumina Eco qPCR, for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene 3000, for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene 6000, for use with Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, for use with Roche LightCycler 480, for use with Strategene Mx3000P, for use with Strategene Mx3005P, for use with Strategene Mx4000
• detection method: probe-based
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Descrizione

General description

JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ è una miscela master 2X pronta all′uso che contiene Taq DNA polimerasi JumpStart^™ , dNTP puri al 99%, tampone di reazione e anticorpo Taq JumpStart^™ . Unisce i vantaggi in termini di prestazioni dell′anticorpo JumpStart^™ Taq per PCR Hot Start e la praticità di una miscela di reazione di facile impiego. Poiché non contiene coloranti è la soluzione ideale per implementare metodi PCR quantitativi ad alta resa che fanno ricorso a sonde fluorescenti. La Taq DNA polimerasi è un enzima hot-start inattivato da anticorpo. Non appena la temperatura di reazione raggiunge i 70 °C il complesso DNA polimerasi-anticorpo si dissocia e l′attività della Taq DNA polimerasi viene ripristinata. Questo complesso anticorpo-enzima consente una preparazione semplice e pratica con un minore rischio di contaminazione rispetto alle tecniche hot start manuali.

Application

La JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ per la PCR quantitativa è stata usata:

• per l'amplificazione dell'RNA del virus HIV-1 mediante reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR) dopo trascrizione inversa a DNA utilizzando delle sonde;
• in un saggio di RT-qPCR in 2 passaggi per quantificare l'RNA dopo trascrizione inversa in uno studio per monitorare l'attività della liquirizia nella differenziazione e nella funzionalità di cellule T-reg;
• come componente della miscela di reazione per l'identificazione e l'amplificazione del DNA di Salmonella sp. e del plasmide pUC 19 come controllo interno dell'amplificazione (IAC);
• come componente della miscela di reazione per l'identificazione del DNA di Clostridium difficile mediante reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR)
• per la PCR quantitativa real-time dell'mRNA di ß-arrestina-1 (ARRB1) e β-arrestina-2 (ARRB2) dopo trascrizione inversa

Biochem/physiol Actions

La miscela ReadyMix include DNA polimerasi Taq JumpStart, desossinucleotidi puri al 99% e un tampone concentrato 2x, ottimizzato per la reazione. Per preparare una reazione, 25 μL di ReadyMix vengono aggiunti a primer, templato, chimica di rilevamento e acqua per un volume di reazione totale di 50 μL. La preparazione può essere eseguita a temperatura ambiente poiché l'anticorpo JumpStart Taq rende inattiva la Taq DNA polimerasi. Durante la prima fase di denaturazione, l′anticorpo si dissocia dall′enzima e l′attività della polimerasi viene completamente ripristinata. Non sono richieste preparazioni particolari o modifiche al protocollo.

Features and Benefits

• Massima praticità: le miscele ReadyMix contengono tutti i componenti necessari per la qPCR; è sufficiente aggiungere la chimica di rilevamento in fluorescenza, i primer e lo stampo.
• Maggiore specificità & incremento della resa del target: la JumpStart^™ Taq impedisce l′amplificazione aspecifica e aumenta la resa del target
• Massima flessibilità: adatta per l'uso con diverse tipologie di chimiche di rilevamento, comprese quelle con sonde molecolari e con coloranti che legano il DNA a doppio filamento come SYBR^™ Green I.
• Progettata per l′uso con ciclatori termici real-time su piastra/provetta o strumenti capillari

Packaging

Il colorante di riferimento Sigma per PCR quantitativa è incluso separatamente alla ReadyMix ed è utilizzabile per la normalizzazione dei dati della reazione. Questo colorante ha massima eccitazione a 586 nm e massima emissione a 605 nm. Per la misurazione del colorante di riferimento per la PCR quantitativa possono essere utilizzate le impostazioni dello strumento per il colorante di riferimento ROX. Viene fornita anche una provetta di MgCl₂ 25 mM per una facile ottimizzazione della reazione qPCR.

Il volume di reazione predefinito è di 50 μL

20RXN confezione da 1 X 500 μL
100RXN confezione da 1 X 2.5 mL
400RXN confezione 1 X 10 mL

Other Notes

La miscela per PCR quantitativa JumpStart Taq ReadyMix combina i vantaggi di un enzima hot start con una miscela pronta all′uso per una PCR quantitativa (qPCR) ad alto rendimento. È formulata senza una chimica di rilevamento, il che la rende adatta per l'uso con una varietà di formati, comprese sonde a doppia marcatura, molecular beacons, o a coloranti che legano il DNA a doppio filamento come il SYBR Green I.

Un′unità incorpora 10 nmol di dNTP totali in DNA precipitabile in acido in 30 minuti a 74 °C.

Legal Information

SYBR is a trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries

Una licenza per eseguire un processo di nucleasi 5′ a scopo di ricerca si ottiene con l′acquisto di (i) un kit 5′ Nuclease Core autorizzato più la sonda concessa in licenza (ii) un kit 5′ Nuclease Core con licenza oppure (iii) diritti di licenza da Applied Biosystems.

Questo prodotto è un kit 5′ Nuclease Core autorizzato L′utilizzo di questo prodotto è coperto dai brevetti USA indicati di seguito e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA: brevetto No. 5,210,015 and 5,487,972. L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell'acquirente. L'acquisto separato di una sonda con licenza conferirebbe i diritti ai sensi dei brevetti statunitensi e alle corrispondenti rivendicazioni di brevetto al di fuori degli Stati Uniti: 5,538,848, 5,723,591, 5,876,930, 6,030,787, 6,258,569, 5,804,375 (solo rivendicazioni 1-12) e rivendicazioni al di fuori degli Stati Uniti corrispondenti al brevetto USA n. 6.214.979. Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede alcun diritto a qualsiasi altra rivendicazione di brevetto e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti dietro pagamento o altro corrispettivo commerciale. Prodotto destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici brevettati da Roche richiedono una licenza separata di Roche. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze possono essere ottenute contattando il Direttore Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf SE

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

I componenti del kit sono disponibili anche separatamente

• P2893

  JumpStart^™ Taq ReadyMix^™, Complete optimized reagent for hot-start PCR at 2X concentration 2 X

  SDS
• M8787

  25 mM MgCl₂ 1.5 μL

  SDS
• R4526

  Reference Dye for Quantitative PCR, 100 ×, solution 100 X

  SDS

Informazioni sulla sicurezza

• pictograms: GHS07,GHS09
• signalword: Warning
• hcodes: H315,H317,H319,H410
• pcodes: P261 - P264 - P273 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 3