质粒纯化简介
DNA、RNA和蛋白等大分子的提取常用于分子生物学研究。核酸提取和纯化已经不再是一个复杂、密集劳动力的过程。现在的核酸纯化技术可提供较高的样品输出量、纯度和生物分子可扩展性，并具有最小的交叉污染。也常使用转为中高通量实验室所设计的自动化系统。
制备用于质粒纯化的核酸
核酸制备一开始需要收集样本（细菌，动物组织和细胞，或植物组织）。无论使用哪一种DNA制备方法，都需要以恰当的方式收集和处理样本，才能得到高质量核酸。如工作流程所示（图1），从样本收集到核酸纯化可能包含样本收集，运输，存档，储存，核酸纯化这一系列过程。
图 1.包含样本收集、运输、存档和DNA纯化的工作流程。
核酸提取
DNA提取包含了 细胞膜裂解，去除组蛋白，RNA和脂质和纯化。各种不同的提取和纯化方法见表1。
质粒DNA
质粒是一种小型的环状双链DNA，在分子生物学可用于遗传信息的操作和解码。因为操作简单，它们已经成为了克隆和生物技术中的重要组成部分。
质粒DNA纯化有多种方法。我们致力于为您带来更加绿色的替代产品，这些产品遵守一项或多项绿色化学12项原则。相比标准DNA提取方法使用苯酚和氯仿，GenElute产品是更安全的化学产品。
GenElute™制备小提试剂盒是一种从大肠杆菌培养物中提取质粒DNA的简单、快速、高效的方法。试剂盒结合了硅基膜技术和方便的离心管，能从每毫升过夜培养液中回收到最多20 mg高拷贝质粒DNA。以下是GenElute™制备小提试剂盒质粒DNA提取和纯化主要步骤（图2）。
- 离心收获细菌细胞，使用改良碱性SDS法裂解，高盐条件下DNA被二氧化硅吸收。
- 然后通过简单的清洗步骤去除污染物。
- 用Tris-EDTA缓冲液洗脱DNA。回收到的质粒DNA主要是超螺旋形式。
- DNA可用于限制性内切酶消化，克隆，PCR，转化，转录，传统和自动化测序。
部分质粒DNA纯化试剂盒见表2。不同质粒DNA纯化方法详细说明（PDF）。.
图 2.从质粒制备和提取核酸工作流程。PCR DNA纯化：货号NA1020和PCR9604
参考文献
1.
Tan SC, Yiap BC. 2009. DNA, RNA, and Protein Extraction: The Past and The Present. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 20091-10. https://doi.org/10.1155/2009/574398
2.
Buckingham L, Flaws ML. 2007. Flaws, Molecular Diagnostics: Fundamentals, Methods, & Clinical Applications. Philadelphia, USA: F.A. Davis Company.
3.
Weaver R. 2002. Molecular Biology . 2nd edition. San Francisco: McGraw Hill.
登录以继续。
如要继续阅读，请登录或创建帐户。
暂无帐户？