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KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix

2 × ( contains 2 mM MgCl₂ at 1×)

• 别名: PCR, 热启动PCR
• UNSPSC代码: 41106300
• NACRES: NA.55

属性

• 用途: sufficient for 100 reactions; sufficient for 500 reactions
• 质量水平: 100
• 保质期: ≤12 mo.
• 特点: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; dNTPs included; hotstart
• 包装: pkg of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5701); pkg of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5702)
• 制造商/商品名称: Roche
• 浓度: 2 × ( contains 2 mM MgCl₂ at 1×)
• 技术: PCR: suitable
• 输入: crude DNA
• 储存温度: −20°C

说明

一般描述

第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型（富含GC和AT的扩增子）扩增不一致的问题。KAPA2G Robust HotStart^® ReadyMix^™ 具有更高的持续合成能力和特异活性，可实现稳健的PCR性能，灵敏度高，增强对常见抑制剂耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的PCR应用和高难样品，无需使用多种酶和方案进行优化。

应用

KAPA2G Robust HotStart^® ReadyMix^™ 用于：

• 扩增富含 GC-或 AT-的模板
• 扩增含有常见聚合酶链反应（PCR）抑制剂的模板（抑制剂如盐、尿素、SDS或乙醇）
• 粗制样本 PCR（粗制样本如口腔拭子，培养的哺乳动物细胞、酵母细胞或细菌细胞）
• 菌落 PCR
• DNA 提取和扩增
• 突变筛查
• 甲基化特异性PCR（MSP）扩增
• 基因分型-PCR
• 基于PCR测序

生化/生理作用

用 KAPA2G Robust HotStart^® DNA 聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA 聚合酶产生的 DNA 片段具有相同特性，可用于限制性内切酶消化，克隆和测序等常规下游分析及应用。与野生型Taq一样，KAPA2G Robust HotStar 具有5'→3'聚合酶和5'→3'核酸外切酶活性，不具有3'→5'核酸外切酶（校对）活性。KAPA2G Robust HotStart 的保真度与野生型Taq相似。错误率约为每插入1.7 x 105个核苷酸产生1个错误。KAPA2G Robust HotStart产生的PCR产物带3'-dA尾，可以克隆到TA克隆载体。

特点和优势

高效扩增高GC和AT含量的靶标

• 在广泛的高GC和AT含量模板中表现稳健
• 提高 PCR 成功率

提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性

• 从粗制样品高效扩增
• 单位酶的产率和灵敏度更高

菌落 PCR 中无与伦比的性能

• 直接来自 大肠杆菌 和酵母细胞的 PCR产率更高，一致性更好

临时速记：

• KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶，专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
• 纯化的基因组 DNA 和粗制样品（例如菌落 PCR）均可用作模板。
• 每个循环使用 15 s/kb 的扩展时间，对于困难的扩增子或模板，增加到 30-60 s/kb。
• (1X) KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 含有 2 mM MgCl ₂ 。
• 带染料KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix包括两种惰性追踪染料，可直接上样到琼脂糖凝胶上。
• KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 是单方案 PCR 的理想选择，即使用单反应设置和循环方案扩增 25-65%GC ，至 1 kb 不等的片段。
• 反应产物为 3′-dA-尾，可克隆至 TA 克隆载体。

质量

每批KAPA2G耐用热启动DNA聚合酶均被证实含有< 2%的污染蛋白（安捷伦蛋白质230分析）。KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR试剂盒经过严格的质量控制测试，不含污染性的外切和内切核酸酶活性，符合关于DNA污染水平的严格要求。

制备说明

使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下，以供短期使用（最长1个月）。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间（最长3天）预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意，储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。

其他说明

仅供研究使用。不用于诊断操作。

法律信息

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

仅试剂盒组分

• KAPA2G Robust HotStart^® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction
• MgCl₂ 2mM at 1X
• dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X

安全信息

• 象形图: GHS07,GHS08
• 警示用语：: Warning
• 危险声明: H302,H371
• 预防措施声明: P260 - P264 - P270 - P301 + P312 + P330 - P308 + P311 - P501
• 危险分类: Acute Tox. 4 Oral - STOT SE 2
• 储存分类代码: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 闪点(°F): does not flash
• 闪点(°C): does not flash