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一般說明
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+乙酰组蛋白H3(Lys4)套装包含乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体、阴性对照抗体（正常兔IgG）、qPCR引物（用于扩增人GAPDH的166bp区）。乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体和阴性对照的规格与ChIP反应次数成比例，可用于功能性验证乙酰组蛋白H3(Lys4)相关染色质的免疫沉淀。
ChIPAb+乙酰组蛋白H3(Lys4)套装包含乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体、阴性对照抗体（正常兔IgG）、qPCR引物（用于扩增人GAPDH的166bp区）。乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体和阴性对照的规格与ChIP反应次数成比例，可用于功能性验证乙酰组蛋白H3(Lys4)相关染色质的免疫沉淀。
组蛋白H3是参与真核细胞染色质结构的五种主要组蛋白之一。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴，其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。组蛋白的翻译后修饰程度较高，其中组蛋白H3是5种组蛋白中修饰最广泛的。单独的“组蛋白H3”表述是特意模糊的，没有表明序列变异和修饰状态。在新兴的表观遗传学领域，组蛋白H3是一种重要的蛋白质，它的序列变异和不同的修饰状态在基因的动态及长期调控中发挥着作用。
特異性
由于序列相似性，预计具有广泛的交叉反应性。
识别Lys4位点乙酰化的组蛋白H3。
免疫原
KLH标记的合成肽，含有序列…RTAcKQ…，其中AcK对应人组蛋白H3的乙酰化赖氨酸4。
表位：乙酰化Lys4
應用
染色质免疫沉淀：
采用4 µL正常兔IgG或4 µL抗乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP® A试剂盒（货号17-610），对HeLa细胞来源、超声处理的染色质（每次IP需1 X 106细胞当量）进行染色质免疫沉淀。
以质控引物为GAPDH启动子阳性位点，β-珠蛋白引物为阴性位点，经qPCR反应验证乙酰组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段成功免疫沉淀。 （请参见图）。
数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input)，ChIP样本如图所示。
实验详细信息请参阅EZ-Magna ChIP A（货号17-408）或EZ-ChIP（货号17-371）试剂盒方案。
蛋白质印迹分析：
代表性批次数据。
电泳分离重组组蛋白H3（货号14-411，泳道1）、丁酸钠处理（泳道2）和未处理（泳道3）的HeLa细胞酸提取物（货号17-305），转移至硝酸纤维素膜，用抗组蛋白H3(Lys4)抗体（1:1,000稀释）检测。
用HRP标记的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统对蛋白显色。（见图）。
组蛋白-肽特异性试验：代表性批次数据。
将1:1,000 – 1:5,000稀释的抗乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体与具有下列修饰的组蛋白H3肽标记的微珠混合物共同孵育：
1.未修饰，含Lys4、9、14和18
2.乙酰-赖氨酸4
3.乙酰-赖氨酸9
4.乙酰-赖氨酸14
5.乙酰-赖氨酸18
6.乙酰-赖氨酸23
7.乙酰-赖氨酸27
过滤去除未结合抗体。将肽-抗体复合物与生物素标记的抗兔二抗共同孵育，再与藻红蛋白-链霉亲和素偶联物孵育。在Luminex 100仪器上读取荧光。
以平均荧光强度(MFI)绘图（见图）。
采用4 µL正常兔IgG或4 µL抗乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP® A试剂盒（货号17-610），对HeLa细胞来源、超声处理的染色质（每次IP需1 X 106细胞当量）进行染色质免疫沉淀。
以质控引物为GAPDH启动子阳性位点，β-珠蛋白引物为阴性位点，经qPCR反应验证乙酰组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段成功免疫沉淀。 （请参见图）。
数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input)，ChIP样本如图所示。
实验详细信息请参阅EZ-Magna ChIP A（货号17-408）或EZ-ChIP（货号17-371）试剂盒方案。
蛋白质印迹分析：
代表性批次数据。
电泳分离重组组蛋白H3（货号14-411，泳道1）、丁酸钠处理（泳道2）和未处理（泳道3）的HeLa细胞酸提取物（货号17-305），转移至硝酸纤维素膜，用抗组蛋白H3(Lys4)抗体（1:1,000稀释）检测。
用HRP标记的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统对蛋白显色。（见图）。
组蛋白-肽特异性试验：代表性批次数据。
将1:1,000 – 1:5,000稀释的抗乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体与具有下列修饰的组蛋白H3肽标记的微珠混合物共同孵育：
1.未修饰，含Lys4、9、14和18
2.乙酰-赖氨酸4
3.乙酰-赖氨酸9
4.乙酰-赖氨酸14
5.乙酰-赖氨酸18
6.乙酰-赖氨酸23
7.乙酰-赖氨酸27
过滤去除未结合抗体。将肽-抗体复合物与生物素标记的抗兔二抗共同孵育，再与藻红蛋白-链霉亲和素偶联物孵育。在Luminex 100仪器上读取荧光。
以平均荧光强度(MFI)绘图（见图）。
研究子类别
组蛋白
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
该ChIPAb+乙酰组蛋白H3(Lys4)-ChIP验证抗体&引物套装为方便提供了抗体&PCR特异性对照引物。
包裝
每组25次测定。推荐用于：每次染色质免疫沉淀约4 μL抗体（取决于生物学背景）。
成分
抗乙酰组蛋白H3(Lys4)抗体（兔多克隆
正常兔IgG
对照引物
正常兔IgG
对照引物
品質
染色质免疫沉淀：
采用4 µL正常兔IgG或4 µL抗乙酰组蛋白H3(Lys4)和Magna ChIP® A试剂盒（目录号17-610），对HeLa细胞来源、超声处理的染色质（每IP需1 X 106细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用对照引物通过qPCR验证了乙酰组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna ChIPA（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。
采用4 µL正常兔IgG或4 µL抗乙酰组蛋白H3(Lys4)和Magna ChIP® A试剂盒（目录号17-610），对HeLa细胞来源、超声处理的染色质（每IP需1 X 106细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用对照引物通过qPCR验证了乙酰组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna ChIPA（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。
標靶描述
~17 kDa
外觀
亲和纯化
抗-乙酰基组蛋白H3(Lys4)抗体（兔多克隆）。1瓶，100 µL免疫亲和纯化的兔多克隆抗体，储液含0.05%叠氮化钠，30%甘油。储存于 -20°C。
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 µg兔IgG，溶于125 µL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。储存在-20 °C。
对照引物。1瓶，75 μL，人GAPDH特异性引物各5 μM。在-20°C下储存。
对于：TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 µg兔IgG，溶于125 µL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。储存在-20 °C。
对照引物。1瓶，75 μL，人GAPDH特异性引物各5 μM。在-20°C下储存。
对于：TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA
儲存和穩定性
自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。处理建议：第一次融化后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中，并储存于-20°C。避免反复冻融，其可能会破坏IgG并影响产品性能。注意：冷藏室温度变化至低于-20°C时可能导致含甘油的溶液在储存过程中冻结。
分析報告
对照
包括阴性对照抗体和人GAPDH特定引物。
包括阴性对照抗体和人GAPDH特定引物。
法律資訊
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
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