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DIG-Oligonukleotid-Tailing-Kit, 2. Generation

sufficient for 25 reactions (100 pmol oligonucleotide per assay; 1 ug of a 30-mer oligonucleotide)

• UNSPSC-Code: 41105500
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Verwendung: sufficient for 25 reactions (100 pmol oligonucleotide per assay; 1 ug of a 30-mer oligonucleotide)
• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Roche
• Lagerbedingungen: avoid repeated freeze/thaw cycles
• Grünere Alternativprodukt-Eigenschaften: Designing Safer Chemicals; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• Grünere Alternativprodukt-Kategorie: Aligned,

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das DIG-Oligonukleotid-Tailing-Kit der 2. Generation verwendet das Enzym terminale Transferase. Es katalysiert die Addition von Digoxigenin-(DIG-)11-Desoxyuridin-Triphosphat (dUTP) und Desoxyadenosin-Triphosphat (dATP) an das 3′-OH-Ende von Oligonukleotiden.

Wir verpflichten uns, Ihnen umweltfreundlichere Alternativprodukte anzubieten, die mit einem oder mehreren der „12 Prinzipien der Grünen Chemie“ im Einklang stehen. Dieses Produkt wurde als sicherere Chemikalie entwickelt.  Das DIG-System wurde als empfindliche und kosteneffektive Alternative zur Nutzung von Radioaktivität für die Markierung und Detektion von Nukleinsäuren entwickelt. Die Vielseitigkeit des DIG-Systems ist in zahlreichen Publikationen belegt. Die radioaktive Markierung stellt daher nicht mehr die einzige Option für die Markierung von DNA zur Hybridisierung dar.

Anwendung

Das DIG-Oligonukleotid-Tailing-Kit der 2. Generation wird verwendet zur Markierung von Oligonukleotid-Sonden bei:

• Northern-Blot-Assays
• In-situ-Hybridisierung (ISH)
• Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH)

Zusätzlich zu den üblichen Hybridisierungsmethoden sind DIG-markierte Oligonukleotide besonders nützlich für das Screening von Expressionsbibliotheken auf sequenzspezifische DNA-bindende Proteine, z. B. Transkriptionsfaktoren.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Tailing von Oligonukleotiden am 3′-Ende mit DIG-11-dUTP und rekombinanter terminaler Transferase. Den Oligonukleotiden werden DIG-dUTP und dATP mit einer durchschnittlichen Schwanzlänge von 50 Nukleotiden (Schwanzlängenbereich: 10–100) angehängt.

• Sehr empfindliche Hybridisierungssonden aufgrund des Einbaus mehrerer DIG-Nukleotide
• Schnelle Hybridisierungskinetik aufgrund der geringen Größe der Oligonukleotide
• Einzelsträngige Sonden, keine Renaturierung während der Hybridisierung
• Die Sequenz kann je nach Experiment gestaltet werden
• Besonders geeignet für die In-situ-Hybridisierung; aufgrund ihrer geringen Größe diffundieren die Oligonukleotide leicht in fixierte Gewebe und Zellen

Verpackung

1 Kit mit 11 Komponenten

Prinzip

DIG-dUTP und dATP werden in einer Konzentration kombiniert, die den höchsten DIG-Einbau in den Schwanz und einen optimalen Abstand zwischen DIG und dATP ergibt, um die höchste Empfindlichkeit bei Hybridisierungsexperimenten zu erreichen. DIG-dUTP und dATP werden als separate Lösungen angeboten, um eine größere Flexibilität in Bezug auf die Schwanzlänge, den Haptenabstand und die Verwendung von unmarkierten Nukleotiden zu ermöglichen.

Angaben zur Herstellung

Arbeitskonzentration: Oligonukleotide
In einer Standardmarkierungsreaktion können bis zu 100 pmol Oligonukleotid (1 μg eines 30-mer-Oligonukleotids) eingesetzt werden.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -15 bis -25 °C (ungeöffnetes Kit) aufbewahren

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Nur Kit-Komponenten

• Reaction Buffer 5x concentrated
• CoCl<SUB>2</SUB> Solution 25 mM
• DIG-dUTP Solution 1 mM
• dATP Solution 10 mM
• Recombinant Terminal Transferase 400 U/μl
• Control Oligonucleotide, unlabeled 20 pmol/μl
• Oligonucleotide, DIG-dUTP/dATP tailed 2.5 pmol/μl
Control DNA 0.25 mg/ml
Glycogen Solution 20 mg/ml
DNA Dilution Buffer, 50 μg/ml fish sperm DNA
Poly(A) Solution 10 mg/ml

Alle anzeigen (11)

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS07,GHS08,GHS09
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H302 + H332 - H350i - H360F - H411
• P-Sätze: P201 - P261 - P273 - P280 - P308 + P313 - P391
• Gefahreneinstufungen: Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Repr. 1B
• Lagerklassenschlüssel: 6.1D - Non-combustible, acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash