WTA1
TransPlex® Whole Transcriptome Amplification Kit
DNA polymerase separate.
Sinonimo/i:
Kit di amplificazione dell’intero trascrittoma TransPlex®
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About This Item
Codice UNSPSC:
41121800
NACRES:
NA.55
Prodotti consigliati
Livello qualitativo
tecniche
whole genome amplification: suitable
Condizioni di spedizione
wet ice
Temperatura di conservazione
−20°C
Descrizione generale
Il metodo TransPlex® per l′amplificazione dell′intero trascrittoma (WTA) consente l′amplificazione rappresentativa dell′RNA totale presente in quantitativi nell′ordine dei nanogrammi in meno di 4 ore e senza 3′-bias. I quantitativi di amplificato, nell′ordine dei microgrammi, ottenuti da tessuto, cellule in coltura, campioni fissati in formalina, o siero, sono sufficienti per applicazioni a valle come la qPCR e i microarray.
Applicazioni
Il kit per l′amplificazione dell′intero trascrittoma TransPlex® (Whole Transcriptome Amplification) è stato usato per sintetizzare il cDNA a doppio filamento. Inoltre è stato usato per l′amplificazione del cDNA
Idoneo all′impiego con le applicazioni successive, tra cui:
- qPCR
- analisi di microarray
- clonaggio
Caratteristiche e vantaggi
- Amplificazione dell′RNA totale in meno di 4 ore con meno di 30 minuti di manipolazione
- Con soli 5 ng di materiale di partenza si produce una libreria altamente rappresentativa dall′RNA totale.
- Quantità in microgrammi del prodotto dell′amplificazione generate da RNA intatto da tessuto, cellule in coltura, siero o da RNA degradato da campioni fissati in formalina inclusi in paraffina
Principio
Il processo di WTA prevede due fasi. Nella prima fase, si sottopone l′RNA campione alla trascrizione inversa con primer non autocomplementari costituiti da un′estremità 3′ quasi casuale e un′estremità 5′ universale. Con il procedere della polimerizzazione, i singoli filamenti dislocati agiscono come nuovi templati per l′annealing e l′estensione dei primer. La libreria di cDNA OmniPlex che ne risulta, costituita da frammenti casuali, sovrapponentesi, da 100-1000 basi affiancati dalla sequenza terminale universale, viene quindi amplificata dalla PCR con il primer universale per realizzare il prodotto della WTA.
Note legali
TransPlex is a registered trademark of Rubicon Genomics, Inc.
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N° Catalogo
Descrizione
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Avvertenze
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Classi di pericolo
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10 - Combustible liquids
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Not applicable
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