Split sub-confluent cultures (70-80%) 1:5 to 1:10 i.e. seeding at 5x1,000 to 1x10,000 cells/cm2 using 0.1% cold PBS and 0.25% cold trypsin. Place flasks at 4°C for 5-10 min. or until cells detach; 5% CO2; 37°C. Pre-treat culture flasks with porcine gela
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