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Merck

PMEF-CF

EmbryoMax® primäre embryonale Fibroblasten der Maus

Synonym(e):

MEF Feeder Cells, CF-1 PMEFs, CF-1 MEFs, MEFs, Mouse Feeder Cells

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
41106509
NACRES:
NA.81
eCl@ss:
32011203
Biological source:
mouse
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biological source

mouse

Quality Segment

manufacturer/tradename

Specialty Media, EmbryoMax®

technique(s)

cell culture | stem cell: suitable

input

sample type induced pluripotent stem cell(s)
sample type: human embryonic stem cell(s)
sample type primary embryotic fibroblasts (PMEFs)
sample type: mouse embryonic stem cell(s)

shipped in

liquid nitrogen

storage temp.

-140 to -196°C

General description

Die primären Mausembryo-Fibroblasten, Stamm CF-1, sind mit Mitomycin C behandelt und werden als Feeder-Schicht für ES/iPS-Zellen der Maus sowie für humane ES/iPS-Zellen eingesetzt.

Plattierung der aus MEF-Zellen gewonnenen Feederzellen

Verfahren:

1. Vor dem Auftauen der pMEF-Feederzellen die Platten/Kolben mit einer Gelatinelösung beschichten.
2. pMEF-Fläschchen in einem 37 °C warmen Wasserbad rasch auftauen und in ein 15 mL Röhrchen überführen (enthält bereits ein 10 mL warmes pMEF-Feederzellmedium). Röhrchen vorsichtig invertieren, um Fibroblasten zu verteilen, und bei 300 xg 4–5 Minuten zentrifugieren.
3. Überstand entfernen und das Zellpellet in ein warmes pMEF-Feederzellmedium resuspendieren.
4. Gelatinelösung von Platten/Kolben entfernen und die pMEF-Feederzellsuspension bei den unter Tabelle 4.1 des Maus-ES-Protokolls aufgeführten empfohlenen Dichten aliquotieren.
5. pMEF-Feederzellen bei 37 °C mit 5 % CO2 inkubieren. Die im Maus-ES-Protokoll dargestellten Abbildungen 4A, B und C als Hilfe zur Einschätzung der richtigen pMEF-Dichte und
des richtigen Aussehens anwenden. Die mit Gelatine beschichteten Platten können für 12–14 Tage verwendet werden.
Mit der Produktreihe an pMEF-Zellen von EmbryoMax wird Forschern eine praktische Lösung zur Kultivierung embryonaler Stammzellen (ES-Zellen) geboten und eliminiert so die Notwendigkeit einer zeitaufwändigen Isolierung und Vorbereitung von Feederzellen. Viele Protokolle zu embryonalen Stammzellkulturen erfordern die Verwendung von primären Mausembryo-Fibroblastenzellen (pMEF-Zellen). In diesen Protokollen werden ES-Zellen üblicherweise auf einer Monoschicht der pMEF-Feederzellen kultiviert. Feederzellen spielen in der Kultivierung von Stammzellen eine wesentliche Rolle; sie sezernieren verschiedene wichtige Wachstumsfaktoren in das Medium, die zur Erhaltung pluripotenter Stammzellen beitragen, und fördern durch eine zelluläre Matrix das Wachstum von ES-Zellen.

Biochem/physiol Actions

Primäre embryonale Fibroblasten der Maus

Packaging

Jeweils 5–6 x 106

Preparation Note

Fläschchen sollten nach Erhalt bei -80 °C aufbewahrt werden. Bei einer längeren Aufbewahrung als 6 Monate können die Fläschchen in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff bis zu 2 Jahre gelagert werden (Deckel muss fest aufsitzen).

Legal Information

EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.


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Protokolle

Stem Cell protocols for cryopreservation, thawing of cryopreserved stem cells and media preparation.

Stem cell reprogramming protocols to generate human induced pluripotent stem cells (iPSCs) including viral and non-viral RNA based methods.

Artikel

Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) serve as a feeder layer for both mouse and human embryonic stem cells (ES cells) and induced pluripotent stem cells (iPSCs).

The Simplicon™ RNA Reprogramming Technology is a next generation reprogramming system that uses a single synthetic, polycistronic self-replicating RNA strand engineered to mimic cellular RNA to generate human iPS cells.

Read types of stem cells including multipotent stem cells, Pluripotent stem cells and iPSCs and their applications in basic stem cell research, stem cell therapy and disease modelling

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"As transgenic mouse core laboratories know well, mouse models are a powerful means of determining the function of mammalian genes in the context of whole organisms—especially since over 95% of the mouse genome is similar to the human genome. However, you may not know that: 1. Laboratory mouse strains are descended from ancestors in modern-day Pakistan. 2. The first inbred strain of lab mouse was created in 1909. It was named DBA for its coat color: dilute brown non-agouti. 3. There is a mutant mouse actually named“Bad Hair Day” (Bhrd). Someone get this little guy a stylist! 4. Male mice, when treated with anticancer drugs, have been shown to pass on DNA instability to their offspring. 5. The founder of Jackson Laboratories, C. C. Little, once had lunch with Walt Disney to request that an animated film be created linking Mickey Mouse and the laboratory mouse. The request was denied."

The cell culture protocols described in this instructional manual include the in vitro culture of murine ES cells using EmbryoMax products along with ESGRO® mLIF medium supplement, as well as feeder-free and serum-free ES cell culture using the ESGRO Complete™ line of products. Also included in this instructional manual are: methods for serum-free neuronal differentiation of mouse ES cells, iPS cell generation using STEMCCA™ lentivirus kits, cre-recombinase mediated excision of STEMCCA™ genes from iPS cells, derivation and rescue of new and existing ES cell lines using RESGRO™ Culture Medium and ESGRO Complete™ system.

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PMEF-CF04053252667404