A2547

Anticorps monoclonal anti-α-actine de muscle lisse

clone 1A4, ascites fluid

• Synonyme(s) : SMA
• Code UNSPSC : 12352203
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 200
• Conjugué: unconjugated
• Forme d'anticorps: ascites fluid
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: 1A4, monoclonal
• Poids mol.: antigen ~42 kDa
• Contient: 15 mM sodium azide
• Espèces réactives: human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake
• Technique(s): immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable using smooth muscle cells; immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells; indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix; western blot: suitable using smooth muscle cells
• Isotype: IgG2a
• Numéro d'accès UniProt: P62736
• Application(s): research pathology
• Conditions d'expédition: dry ice
• Température de stockage: −20°C
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified
• Informations sur le gène: human ... ACTA2(59) ; mouse ... Acta2(11475) ; rat ... Acta2(81633)

Description

Description générale

Cet anticorps (également appelé anticorps anti-α-Sm-1) est spécifique de l'unique isoforme de l'α-actine du muscle lisse. Il réagit spécifiquement avec l'α-actine du muscle lisse lors de tests d'immunoblotting et marque les cellules de muscle lisse sur des coupes histologiques congelées ou fixées au formol et incluses en paraffine.

Les actines sont des protéines du cytosquelette qui régulent la motilité cellulaire. Plusieurs protéines de squelette, de signalisation et de liaison à l'actine régulent les interconversions entre les actines F filamenteuses et les actines G monomériques. Les propriétés immunologiques et physiques des actines cellulaires sont très similaires entre différentes espèces. Par conséquent, l'utilisation d'un anticorps monoclonal anti-actine constitue un outil spécifique intéressant pour l'étude de la localisation, de la structure et de la fonction des actines. L'actine 2 (ACTA2), actine du muscle lisse, est codée sur le chromosome humain 10q23.31.
L'anticorps monoclonal anti-α-actine de muscle lisse se lie à l'actine humaine, de souris, de rat, de bovin, de poulet, de grenouille, de chèvre, de cobaye, de lapin, de chien, de mouton et de serpent.
L'anticorps monoclonal anti-α-actine de muscle lisse (isotype IgG2a de souris) provient de l'hybridome produit par la fusion de cellules de myélome de souris et de splénocytes d'une souris immunisée. Le décapeptide de synthèse NH2-terminal de l'α-actine du muscle lisse couplé à l'hémocyanine de patelle (KLH) a été utilisé comme agent immunogène. L'isotype est déterminé à l'aide du kit ImmunoType® de Sigma (réf. article Sigma ISO-1) et par immunodiffusion double à l'aide de réactifs d'isotypage d'anticorps monoclonaux de souris (réf. article Sigma ISO-2).

Spécificité

L'anticorps monoclonal anti-α-actine de muscle lisse est spécifique de l'unique isoforme de l'α-actine. Il réagit spécifiquement avec une actine du muscle lisse par immunoblotting et marquage par immunofluorescence indirecte de coupes histologiques congelées ou fixées au formol et incluses en paraffine. Cet anticorps peut être utilisé pour la localisation immunocytochimique de l'α-actine de muscle lisse par différentes techniques : immunoperoxydase, immunofluorescence, ELISA ou immunoblotting. Cet anticorps réagit avec l'α-actine humaine, de souris, de rat, de bovin, de poulet, de grenouille, de chèvre, de cobaye, de lapin, de chien, de mouton et de serpent.

Immunogène

Décapeptide de synthèse N-terminal de l'α-actine du muscle lisse.

Application

Des coupes incluses en paraffine de greffons de tissus testiculaires de rat ont été colorées par immunohistochimie (IHC) à l'aide de l'anticorps monoclonal de souris anti-actine de muscle lisse.
Des tissus cardiaques de souris colorés au x-gal ont été analysés par IHC à l'aide de l'anticorps primaire monoclonal de souris anti-actine de muscle lisse afin d'identifier les myofibroblastes.

L'anticorps monoclonal de souris anti-α-actine de muscle lisse a été utilisé dans des analyses par western blotting réalisées avec des homogénats de rein entier sur des cellules de cancer de la thyroïde anaplasique humaines. Il a également été utilisé dans des dosages immunohistochimiques réalisés sur des coupes histologiques de souris, des coupes de foie et des coupes d'utérus.
L'anticorps monoclonal de souris anti-α-actine de muscle lisse a été utilisé dans la détection par immunofluorescence de l'actine 2 dans les fibroblastes mammaires.

Une immunocytochimie a été réalisée sur des cellules de muscle lisse d'aortes de bovin à l'aide de l'anticorps monoclonal anti-ACTA2. Les cellules ont d'abord été cultivées sur des lamelles de verre, puis fixées dans 50 % d'acétone/EtOH pendant 10 minutes à 4 °C.

Actions biochimiques/physiologiques

L'actine est l'une des protéines les plus conservées chez les eucaryotes. Chez les mammifères et les oiseaux, elle est exprimée sous six isoformes caractérisables par électrophorèse et analyse de la séquence d'acides aminés. Quatre de ces six isoformes sont des marqueurs de différenciation des tissus musculaires. Les isoformes de l'actine présentent une homologie de séquence globale de plus de 90 %, mais cette homologie n'est que de 50 % à 60 % au niveau de leurs 18 résidus NH2-terminaux. La région NH2-terminale de l'actine s'avère constituer une région antigénique majeure et peut entrer en jeu dans les interactions entre l'actine et d'autres protéines telles que la myosine. Des études ont montré que la proportion relative des isoformes de l'actine varie dans les muscles lisses de différents organes et qu'elle évolue, dans une même population de cellules de muscle lisse, en fonction du stade de développement, des situations pathologiques et des conditions de culture.
Des mutations de l'actine 2 sont associées à un dysfonctionnement des muscles lisses des artères et sont impliquées dans la survenue de maladies coronariennes. Des mutations de l'ACTA2 favorisent la déchirure et l'élargissement de l'aorte dans les anévrismes de l'aorte thoracique (TAAD).

Forme physique

Cet anticorps se présente sous la forme d'un liquide d'ascite contenant de l'azide de sodium 15 mM en tant qu'agent conservateur.

Stockage et stabilité

En cas d'utilisation en continu, conserver le produit entre 2 °C et 8 °C pendant un mois maximum. Pour un stockage prolongé, la solution peut être congelée en aliquotes de travail. Il est déconseillé de procéder à des congélations/décongélations répétées. Si une légère turbidité apparaît lors d'un stockage prolongé, clarifier la solution par centrifugation avant utilisation.

Autres remarques

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Pour consulter notre guide de sélection d'anticorps anti-actine, rendez-vous sur www.sigmaaldrich.com/actin.

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable