A5316

Anticorps monoclonal anti-β-actine antibody produced in mouse

clone AC-74, ascites fluid

• Synonyme(s) : Actin Antibody Sigma, Beta Actin Antibody, Beta Actin Antibody - Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse, Beta Actin Antibody Sigma, Sigma Beta Actin Antibody
• Numéro MDL: MFCD00164531
• Code UNSPSC : 12352203
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 200
• Conjugué: unconjugated
• Forme d'anticorps: ascites fluid
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: AC-74, monoclonal
• Poids mol.: antigen 42 kDa
• Contient: 15 mM sodium azide
• Espèces réactives: rabbit, sheep, cat, guinea pig, bovine, mouse, chicken, wide range, Hirudo medicinalis, canine, Drosophila, carp, pig, rat, human
• Technique(s): immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable; indirect ELISA: suitable; indirect immunofluorescence: 1:1,000 using cultured human or chicken fibroblasts; western blot: 1:5,000 using cultured human or chicken fibroblast cell extracts
• Isotype: IgG2a
• Numéro d'accès UniProt: P60709
• Application(s): research pathology
• Conditions d'expédition: dry ice
• Température de stockage: −20°C
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified
• Informations sur le gène: human ... ACTB(60) ; mouse ... Actb(11461) ; rat ... Actb(81822)

Description

Description générale

Il reconnaît un épitope situé dans la partie N-terminale de l′isoforme β de l′actine. Il marque spécifiquement la β-actine dans un grand nombre de tissus et d′espèces. Dans la coloration par immunofluorescence de cryosections ultra-minces de gésiers de poulet, l′anticorps marque les corps denses et les faisceaux longitudinaux reliant les corps denses successifs, comportant également la desmine et la plaque dense associée à la membrane. Cet anticorps ne réagit pas avec les muscles cardiaques ou squelettiques adultes (sauf en cas de contamination de l′échantillon par des cellules non musculaires) ou avec les cellules qui expriment la β-actine de l′amibe Dictyostelium discoideum. L′épitope reconnu par l′anticorps est résistant à la fixation au formol et à l′inclusion dans la paraffine. Le fixatif peut également être composé de solutions de Bouin, de B5, de méthacam ou d′éthanol. L′anticorps peut être utilisé comme sonde pour la β-actine pour servir de contrôle interne en immunoblotting.

L'actine est une protéine très conservée et un constituant clé du cytosquelette et des structures contractiles de tous les types de cellules. Sa concentration varie en fonction du type de différenciation et de l'état fonctionnel des cellules et des tissus. L'actine se présente sous deux formes agrégées différentes (une forme globulaire et une forme fibrillaire) et possède au moins six isoformes chez les vertébrés. Les actines présentent une homologie de séquence supérieure à 90 %, mais chaque isoforme possède une séquence NH2-terminale unique. Ces isoformes comprennent trois α-actines (actines squelettique, cardiaque et lisse), une β-actine (actine β non musculaire) et deux γ-actines (actines γ de muscle lisse et non musculaire). Le gène ACTB (actine β) code pour la β-actine. Il s'agit d'une protéine constitutive du cytosquelette. Elle est présente dans le cytoplasme. Le gène ACTB se situe sur le chromosome 7p22.1 chez l'homme.
L'anticorps monoclonal anti-β-actine (isotype IgG2a de souris) provient de l'hybridome AC-74 produit par la fusion de cellules de myélome de souris et de splénocytes d'une souris immunisée.

Immunogène

Peptide N-terminal de β-actine cytoplasmique légèrement modifié, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugué à la KLH.

Application

L'anticorps monoclonal de souris anti-β-actine a été utilisé dans des analyses par western blotting. Il peut également être utilisé dans des analyses par immunohistochimie, des analyses par immunofluorescence indirecte (1:1 000) sur cultures de fibroblastes humains ou de poulet, et des analyses par ELISA indirect.

L'anticorps monoclonal de souris anti-actine a été utilisé comme témoin de charge dans l'analyse par western blotting de protéines immunoprécipitées issues de cocultures de ganglions spinaux de rat.
L'anticorps monoclonal de souris anti-β-actine a été utilisé dans des analyses par western blotting. Il peut également être utilisé dans des analyses par immunohistochimie, des analyses par immunofluorescence indirecte (1:1 000) sur cultures de fibroblastes humains ou de poulet, et des analyses par ELISA indirect.
Des lysats de cellules MDCK ont été analysés par western blotting avec un anticorps monoclonal anti-actine en tant qu'anticorps primaire.
L'anticorps monoclonal anti-β-actine a été utilisé dans des analyses par western blotting.

L′anticorps monoclonal anti-actine de souris a été utilisé comme contrôle de charge pour l′analyse par western blot de protéines immunoprécipitées à partir de co-cultures de ganglion spinal de rat.

Une analyse par western blot de lysats de cellules a été réalisée à l′aide d′un anticorps monoclonal anti-actine comme anticorps primaire.

Actions biochimiques/physiologiques

Les deux principales protéines du cytosquelette qui jouent un rôle dans la motilité cellulaire sont l'actine et la myosine. Constituants dans de nombreux types de cellules, l'actine et la myosine sont impliquées dans d'innombrables processus cellulaires, dont la locomotion, la sécrétion, la cyclose, la phagocytose et la cytodiérèse. La β-actine (ACTB) module la croissance et la migration cellulaires ainsi que le stock d'actine G. Des mutations de l'ACTB provoquent des maladies pléiotropes du développement. Cet anticorps reconnaît un épitope situé sur l'extrémité N-terminale de l'isoforme β de l'actine. Il marque spécifiquement la β-actine dans une grande diversité de tissus et d'espèces. Dans la coloration par immunofluorescence de cryocoupes ultra-minces de gésier de poulet, cet anticorps marque les corps denses, les faisceaux longitudinaux reliant les corps denses successifs qui sont également occupés par la desmine et la plaque dense associée à la membrane. Il ne réagit ni avec le muscle cardiaque ou squelettique adulte (sauf en cas de contamination de l'échantillon par des cellules non musculaires) ni avec les cellules d'amibe de Dictyostelium discoideum exprimant la β-actine. L'épitope reconnu par cet anticorps résiste à la fixation au formol et à l'inclusion en paraffine. Des solutions de Bouin, de B5, de méthacarn ou d'éthanol peuvent également être utilisées comme fixateur. Cet anticorps peut servir de sonde spécifique de la β-actine comme étalon interne dans des tests d'immunoblotting.

Forme physique

Ce produit se présente sous la forme d'un liquide d'ascite contenant 0,1 % d'azide de sodium en tant qu'agent conservateur.

Stockage et stabilité

En cas d'utilisation en continu, conserver le produit entre 2 °C et 8 °C pendant un mois maximum. Pour un stockage prolongé, la solution peut être congelée en aliquotes de travail. Il est déconseillé de procéder à des congélations/décongélations répétées. Il est déconseillé de stocker le produit dans un congélateur "sans givre". Si une légère turbidité apparaît lors d'un stockage prolongé, clarifier la solution par centrifugation avant utilisation.

Autres remarques

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Pour consulter notre guide de sélection d'anticorps anti-actine, rendez-vous sur www.sigmaaldrich.com/actin.

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): nwg
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable