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Purificação com FLAG®

Um close-up de um ambiente de laboratório. O foco principal é em uma pipeta azul que dispensa uma gota em um pequeno recipiente de vidro parcialmente preenchido com um líquido rosa. O fundo, embora desfocado, sugere a presença de vários outros instrumentos ou recipientes de laboratório.

As caudas FLAG® possibilitam detecção superior e purificação robusta de proteínas de fusão recombinantes, com utilidade comprovada em inúmeras aplicações a jusante (downstream), desde ensaios de ligação e atividade até análise estrutural. A cauda de epítopo FLAG® é um peptídeo curto, de oito aminoácidos, e hidrofílico (cauda DYKDDDDK), que é prontamente clivável pela enteroquinase (EK). Devido ao seu pequeno tamanho e natureza hidrofílica, a cauda FLAG®, em geral, fica na superfície da proteína de fusão, minimizando efeitos sobre a função, secreção ou transporte da proteína de fusão. Independentemente de sua aplicação final, temos as ferramentas necessárias para expressar, purificar e detectar proteínas de fusão com FLAG®. 

Visão geral da seção

Uma representação gráfica apresentando um padrão de círculos e linhas roxas interconectados em um fundo amarelo. O desenho lembra uma estrutura molecular simplificada ou um diagrama de rede, sugerindo temas de interconectividade ou relações.

Expressão de proteínas marcadas com FLAG®

Nosso portfólio de expressão de proteínas com caudas FLAG® inclui vetores para expressão eficiente de proteínas fundidas recombinantes em sistemas bacterianos e de mamíferos. A tecnologia dos vetores SnapFast™ permite que você mova facilmente o gene de interesse de um vetor para outro para realizar uma clonagem mais eficaz e econômica.

  • O peptídeo FLAG® padrão (sequência: DYKDDDDK) é uma cauda pequena que pode ser incorporada com risco mínimo de bloqueio estérico ou impacto negativo na solubilidade da proteína
  • A sequência de etiquetas 3xFLAG® funde três epítopos FLAG® em tandem para proporcionar uma detecção aprimorada (até 200X) das proteínas de fusão
um fundo amarelo vibrante com um quadrado roxo centralizado com cantos arredondados. Dentro do quadrado, há um desenho simétrico com três setas horizontais: uma na parte superior apontando para a esquerda e para a direita, uma no meio apontando para ambos os lados do centro e uma na parte inferior espelhando a seta superior. Uma linha vertical desce da seta de cima para baixo através de seus pontos de simetria. Espalhadas ao redor dessas setas estão formas geométricas: círculos e losangos.

Purificação de proteínas marcadas com FLAG®

Oferecemos diversos géis de agarose para purificação por afinidade, esferas magnéticas, kits de purificação e placas revestidas para isolamento e purificação de proteínas marcadas com FLAG®.

  • Os géis de afinidade de agarose possibilitam a purificação de proteínas marcadas por fusão usando anticorpos anti-FLAG® reticulados com agarose nas esferas, e são adequados para purificações de pequena a grande escala, e essas resinas são adequadas para a purificação em colunas de fluxo por gravidade.
  • As esferas magnéticas anti-FLAG® M2 são usadas para purificar proteínas recombinantes marcadas por fusão usando um suporte ou plataforma magnética para separar esferas e isolar proteínas para processamento rápido.
  • Placas de 96 poços revestidas com anti-FLAG® M2 de alta sensibilidade são adequadas para triagem de expressão, estudo de interações proteicas e ensaios ELISA.
arte de linha roxa em um fundo amarelo, lembrando uma representação abstrata da letra “K”. O desenho é simples, com linhas nítidas e sem ornamentos ou texturas adicionais.

Detecção das caudas FLAG®

As etiquetas FLAG® e 3xFLAG™ incluem sítios de ligação para anticorpos monoclonais anti-FLAG® altamente específicos, bem como anticorpos policlonais e conjugados para ELISA, aplicações de blot, imunofluorescência, imunocitoquímica, imuno-histoquímica (IHQ), blots e citometria de fluxo.

  • O anticorpo anti-FLAG® M2 se liga às proteínas de fusão com FLAG® na terminação N, FLAG® na terminação C e Met-FLAG®.
  • A ligação do anticorpo anti-FLAG® M1 é dependente de cálcio e específica para a terminação N da cauda FLAG®.
  • O anticorpo anti-FLAG® M5 se liga às proteínas de fusão com FLAG® na terminação N e Met-FLAG®.
*IP = imunoprecipitação; IC = imunoquímica, WB = western blot, EIA = ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)

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