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KAPA SYBR^® FAST

suitable for qPCR, 2 ×, ABI PRISM^®

• Sinônimo(s): qPCR
• Código UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Propriedades

• Nível de qualidade: 100
• uso: sufficient for 100 reactions; sufficient for 1000 reactions; sufficient for 500 reactions; sufficient for 5000 reactions
• prazo de validade: ≤12 mo.
• Características: dNTPs included; hotstart
• embalagem: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4603); kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4605); kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4604); kit of 50 mL (5000 x 20 μL rxn; KK4617)
• fabricante/nome comercial: Roche
• concentração: 2 ×
• técnica(s): qPCR: suitable
• entrada: purified DNA
• compatibilidade: for use with Applied Biosystems^® 5700; for use with Applied Biosystems^® 7000; for use with Applied Biosystems^® 7300; for use with Applied Biosystems^® 7700; for use with Applied Biosystems^® 7900HT; for use with StepOne^™; for use with StepOnePlus^™
• método de detecção: SYBR^® Green
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

Os kits de qPCR KAPA SYBR^® FAST contêm a primeira DNA polimerase desenvolvida por evolução direcionada para ser mais tolerante à inibição pelo corante SYBR Green I.

A maior robustez, capacidade de processamento e velocidade dos kits de qPCR KAPA SYBR FAST resultam em eficiências de amplificação consistentemente altas, o que permite quantificação relativa mais precisa para análise de expressão gênica. Os kits de qPCR KAPA SYBR FAST, desenvolvidos para ter desempenho otimizado em condições de reação de PCR em tempo real rigorosas, exibem melhoras dramáticas na razão sinal-ruído (fluorescência), ciclo de quantificação (Cq), linearidade e sensibilidade.

Aplicação

O kit de qPCR KAPA SYBR^® FAST pode ser usado para:

• Expressão gênica[1]
• Validação do silenciamento de genes
• Validação de microarranjos
• Análise ChIP
• Detecção de baixos níveis de cópias
• Quantificação absoluta de bibliotecas de NGS
• PCR em tempo real[2][3][4]

Características e benefícios

Quantifique alterações na expressão gênica com maior precisão

• A alta eficiência de reação entre 95% e 105% melhora a precisão e a reprodutibilidade.
• Eficiência imparcial em uma ampla gama de teores de GC e comprimentos de amplicon.

Detecte alvos com baixo teor de cópias e difíceis de modo consistente

• Melhore os resultados de processividade em pontuações em Cq anteriores.
• Alta detecção por fluorescência em uma variedade de alvos ricos em AT e GC.
• A enzima nova é resistente a inibição por SYBR^®.

Complete corridas de PCR em tempo real em apenas 40 minutos

• Tempos de corrida 55% mais curtos com protocolo de ciclagem rápido.
• Mantenha o alto desempenho na troca de protocolos padrão para rápidos.

Observações rápidas:

• Este kit contém uma enzima desenvolvida otimizada para qPCR usando o corante SYBR Green I.
• A mistura-mestre 2X contém um tampão proprietário. Juntamente com a enzima nova, isso melhora a eficiência de amplificação de alvos ricos em GC e AT.
• Vinte segundos de desnaturação inicial a 95 °C são suficientes para ativação enzimática. Quando estiver trabalhando com moldes complexos, recomenda-se uma desnaturação inicial de 3 min.
• Para ciclagem em 3 etapas, use 20 s para hibridização de primers e 1 s para extensão/aquisição de dados a 72 °C.
• Não exceda volumes de reação de 25 μl.

Qualidade

Todos os componentes do kit estão sujeitos a controle de qualidade funcional rigoroso, são isentos de atividade detectável de exo e endonucleases contaminantes e atendem a requisitos rigorosos com relação à contaminação do DNA.

Nota de preparo

Certifique-se sempre de os componentes terem sido completamente descongelados e completamente misturados antes do uso. A mistura-mestre de qPCR KAPA SYBR^® FAST (2X) pode não congelar solidamente, mesmo quando armazenada a –20 °C.

O corante SYBR Green I contido na mistura-mestre de qPCR KAPA SYBR FAST (2X) para ABI PRISM^® e os corantes ROX/fluoresceína (dependendo da configuração do kit) são fotossensíveis. Exposição à luz direta por um período prolongado de tempo resulta em perda de intensidade de sinal fluorescente.

A mistura-mestre de qPCR KAPA SYBR FAST (2X) é estável por 30 ciclos de congelamento-descongelamento. Certifique-se de todos os reagentes estarem armazenados ao abrigo da luz a -20 °C quando não estiver em uso. Ao abrigo da luz, os reagentes são estáveis no escuro a 4 °C por pelo menos uma semana e podem ser armazenados nessa temperatura para uso no curto prazo, desde que não se contaminem com micróbios e/ou nucleases.

Outras notas

Somente para fins de pesquisa. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Informações legais

ABI PRISM is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Somente componentes do kit

• KAPA SYBR^® FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^® Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Informações de segurança

• Pictogramas: GHS08
• Palavra indicadora: Warning
• Frases de perigo: H371
• Declarações de precaução: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Classificações de perigo: STOT SE 2
• Código de classe de armazenamento: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash