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DNA polimerase KOD Xtreme Hot Start

Ultra high fidelity dnapolymerase designed for the most challenging PCR applications including: crude sample PCR, amplification of long strand and highly GC-rich DNA templates.

• Sinônimo(s): High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix
• Código UNSPSC: 41105500
• NACRES: NA.85

Propriedades

• Nível de qualidade: 100
• Formulário: liquid
• uso: sufficient for 200 reactions
• Características: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; High Fidelity PCR; dNTPs included; hotstart
• fabricante/nome comercial: Novagen^®
• condição de armazenamento: OK to freeze
• técnica(s): PCR: suitable
• entrada: crude DNA
• adequação: suitable for PCR
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

*Fabricado pela Toyobo e distribuído pela EMD Millipore. Não disponibilizado pela Merck KGaA, Darmstadt, Alemanha no Japão.

Observação: A compra deste produto inclui imunidade contra processos judiciais relacionados às patentes especificadas no encarte do produto, para ser usado apenas na quantidade adquirida para fins de pesquisa interna do próprio comprador. Nenhum outro direito de patente (como o direito de patente do Processo da 5′ Nuclease) é expresso explicitamente, por implicação ou preclusão. Mais informações sobre a compra de licenças podem ser obtidas junto ao Diretor de licenças (Director of Licensing), Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.

A PCR inclui a replicação de um molde de DNA por uma DNA polimerase termoestável. A processividade, a especificidade e a fidelidade da enzima polimerase usada podem influenciar a eficiência, a reprodutibilidade e o rendimento da reação de PCR. A PCR de alta fidelidade usa uma DNA polimerase com baixa taxa de erro e gera um alto grau de precisão na replicação do DNA de interesse. A fidelidade é essencial caso seja necessário uma amplificação precisa da sequência do alvo gênico, como no caso do sequenciamento direto ou clonagem para expressão proteica a jusante (downstream). Uma mutação indevida poderia afetar profundamente seus estudos. Nossa análise demonstrou que as enzimas KOD são uma escolha fácil para uma PCR rápida, precisa e de alto rendimento. Nossos biólogos moleculares trabalham para desenvolver e formular polimerases que oferecem a maior especificidade, fidelidade e rendimento durante a amplificação por PCR. Além disso, composições otimizadas de tampões, misturas-mestres convenientes e parâmetros de ciclagem proporcionam facilidade adicional de uso e reprodutibilidade de dados.
O kit DNA polimerase KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Hot Start* é uma enzima otimizada de PCR para amplificar moldes de DNA longos ou ricos em GC, o que inclui pontas de cauda de camundongo, tecidos vegetais e aplicações em biologia sintética. A formulação exclusiva permite amplificar diretamente a partir de amostras minimamente processadas, o que possibilita uma amplificação altamente eficiente de amostras brutas de alvos de PCR. O sistema inclui uma DNA polimerase KOD de ultra-alta fidelidade, complexada com dois anticorpos monoclonais para possibilitar a termociclagem “hot start”, além de um tampão concentrado 2× especialmente formulado. A DNA polimerase KOD Xtreme Hot Start amplifica alvos de DNA genômico e de fagos/plasmídeos de até 24 e 40 kpb, respectivamente, de forma rápida e precisa. A DNA polimerase KOD Xtreme Hot Start amplifica com sucesso moldes difíceis de DNA com teor de GC de até 90%. Cada kit inclui 200 U de DNA polimerase KOD Xtreme Hot Start, um tampão otimizado e dNTPs suficientes para 200 reações de amplificação. A polimerase produz produtos de DNA com extremidades cegas, adequados para clonagem com os kits de vetores Novagen Perfectly Blunt<TMSYMBOL></TMSYMBOL> e para LIC (clonagem independente de ligação).

Características e benefícios

• Otimizado para obter a maior taxa de sucesso de PCR, mesmo com os alvos mais difíceis.
• Fidelidade 10X maior que com misturas de Taq
• Amplifica com eficiência moldes de DNA com teor de GC de até 90%
• Amplifica alvos genômicos de até 24 kpb
• Amplifica fagos/alvos lambda de até 40 kpb
• Elimina erros de primer e formação de dímeros de primer
• Configuração prática em temperatura ambiente compatível com automação

Componentes

• 1 × 200 U DNA polimerase KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Hot Start
• 3 × 1,7 ml Tampão Xtreme 2X
• 2 × 1 ml dNTPs (2 mM cada)

Advertência

Toxicidade: Irritante (B)

Definição da unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para catalisar a incorporação de 10 nmol de dNTP na forma insolúvel ácida, em 30 min a 75 °C, em uma reação contendo 20 mM de Tris-HCl (pH 7,5 a 25 °C), 8 mM de MgCl₂, 7,5 mM de DTT, 50 µg/ml de BSA, 150 µM de cada um dos seguintes: dATP, dCTP, dGTP, dTTP (uma mistura de dTTP não rotulado e [³H]dTTP), e 150 µg/ml de DNA de timo de bezerro ativado.

Informações legais

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 10 - Combustible liquids