Expressão e silenciamento gênico
A modulação da expressão gênica é uma das técnicas mais poderosas usadas por pesquisadores para investigar as redes genéticas complexas que regem os processos biológicos. Experimentos de modulação gênica, especificamente, são muito usados para identificar agentes terapêuticos que são eficazes em combater doenças que vão desde câncer até distúrbios de desenvolvimento ou neurodegenerativos.
Existem várias tecnologias para a regulação eficaz da expressão gênica em células e tecidos. A RNAi (interferência de RNA) é um mecanismo biológico natural no qual duplexos de siRNA (RNA de interferência curto) induzem uma forte inibição direcionada da expressão gênica. A Genômica avançada da SigmaAldrich® é um dos líderes do mercado no desenvolvimento comercial de Produtos de RNAi para pesquisadores.
O desenvolvimento recente de inibição com CRISPR (CRISPRi) e ativação com CRISPR (CRISPRa) fornece aos pesquisadores um novo conjunto poderoso de ferramentas que permitem opções quase ilimitadas de regulação gênica. Utilizando o portfólio inigualável de Produtos para CRISPR da Genômica avançada da SigmaAldrich®, pesquisadores podem realizar de forma precisa e eficiente o silenciamento, nocaute, ativação ou superexpressão de praticamente qualquer gene.
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Diagrama mostrando o mecanismo do fluxo de silenciamento gênico mediado por shRNA e siRNA em células.
RNAi - Modulação gênica para desvendar vias genéticas
Análises genômicas funcionais são parte integral da pesquisa de descoberta, permitindo que você desvende os mecanismos que ocultam sistemas biológicos, vias e doenças. Redes de interações moleculares complexas podem ser investigadas de modo eficaz usando bibliotecas de shRNA para possibilitar um silenciamento confiável, eficiente e duradouro.
A Genômica avançada da Sigma-Aldrich® é o fornecedor exclusivo de coleções de TRC1.5 e TRC2 provenientes do Consórcio de RNAi (TRC, do inglês The RNAi Consortium). Essas bibliotecas de shRNA baseado em lentivírus fornecem cobertura inigualável e estão disponíveis em vários formatos que incluem o genoma completo, clones/vetores de RNAi individuais e conjuntos de famílias de genes.
CRISPRi e CRISPRa - Inibição e ativação gênica poderosa
CRISPRi (interferência por CRISPR) e CRISPRa (ativação por CRISPR) proporcionam uma alta eficiência de silenciamento e de ativação de genes, respectivamente, sem alterar a sequência de DNA subjacente. Quando empregadas em triagens de perda de função gênica (LOF, do inglês loss-of-function) e ganho de função gênica (GOF, do inglês gain-of-function) em larga escala, essas técnicas permitem que pesquisadores identifiquem vias gênicas únicas, porém funcionalmente relacionadas, as quais muitas vezes não são detectadas por outros métodos.
Diagrama esquemático de CRISPRa com o complexo mediador de ativação sinérgico (SAM, do inglês Synergystic Activation Mediator complex) e CRISPRi usando o domínio KRAB.
A Genômica avançada da Sigma-Aldrich® oferece um conjunto completo de bibliotecas otimizadas de CRISPRi e CRISPRa para experimentos de silenciamento e superexpressão de genes. Bibliotecas lentivirais agrupadas de CRISPRi e de SAM CRISPRa estão disponíveis para pronta entrega ou podem ser personalizadas de acordo com as suas necessidades.
- Bibliotecas de CRISPRi não codificantes e para genoma completo
- Bibliotecas de SAM CRISPRa para genoma completo
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