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WGA4

Sigma-Aldrich

Kit d′amplification de génome complet de cellule unique GenomePlex®

Amplify genome of a single cell

Synonyme(s) :

Single cell whole genome amplification, Whole genome amplification

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About This Item

Numéro CE :
Code UNSPSC :
12352200
Nomenclature NACRES :
NA.55

Technique(s)

whole genome amplification: suitable

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

−20°C

Description générale

Le kit d'amplification du génome entier de cellules isolées GenomePlex® utilise une technologie exclusive basée sur la fragmentation aléatoire de l'ADN génomique et la conversion des petits fragments obtenus en molécules de banque amplifiables par PCR flanquées de sites d'amorçage universels. L'amplification du génome entier (WGA pour "Whole Genome Amplification") est obtenue par amplification PCR des molécules de la banque avec des amorces oligonucléotidiques universelles. Ce kit est conçu pour amplifier le génome d'une cellule unique. Son procédé simple et rapide permet d'amplifier l'ADN génomique plusieurs millions de fois, donnant plusieurs microgrammes de produit à partir d'une seule cellule. Outre leur rendement insuffisant, les méthodes classiques d'amplification du génome entier de cellules isolées introduisent d'importants biais de représentation. Ce kit contient tous les réactifs nécessaires à la lyse cellulaire suivie de l'amplification du génome entier. Les cellules peuvent être isolées par cytofluorométrie en flux (FACS pour "Fluorescence-Activated Cell Sorting"), microdissection par capture laser (LCM pour "Laser Capture Microdissection"), dilution ou toute autre technique appropriée.

Application

Le kit d'amplification du génome entier de cellules isolées GenomePlex® a été utilisé :

  • pour amplifier de l'ADN isolé
  • dans l'amplification du génome entier (WGA)
  • pour amplifier des ADN issus de microdissection
  • pour amplifier l'ADN génomique de cellules tumorales circulantes à partir de cellules du cancer de la prostate métastatique résistant à la castration
  • pour détecter la variation du nombre de copies par une technique de séquençage du génome entier de cellules isolées à faible taux de couverture
  • en électrophorèse sur gel
  • en qPCR
  • en hybridation génomique comparative sur microréseau
  • pour l'analyse des courtes répétitions en tandem (STR)
  • pour l'analyse des polymorphismes mononucléotidiques (SNP)

Caractéristiques et avantages

  • Amplification de l'ADN de haute précision et à haut rendement en 4 heures seulement
  • Amplification de l'ADN depuis n'importe quelle source : cellules cancéreuses, cellules épithéliales, lymphocytes, fibroblastes de liquide amniotique, cellules fixées sur du polycarbonate ou cellules végétales
  • Représentation complète de la totalité du génome avec un très faible biais allélique
  • ADN polymérase "WGA" adaptée aux applications en aval telles que l'électrophorèse sur gel, la qPCR, l'hybridation génomique comparative (CGH pour "Comparative Genomic Hybridization") sur microréseau, l'analyse des courtes répétitions en tandem (STR pour "Short Tandem Repeat"), l'analyse des polymorphismes mononucléotidiques (SNP pour "Single Nucleotide Polymorphism"), les tests TaqMan® et l'analyse des microsatellites

Autres remarques

Les séquences des amorces universelles fournies dans ce kit sont brevetées.

Informations légales

L'utilisation de ce produit est protégée par un ou plusieurs des brevets américains suivants et les revendications des brevets correspondants en dehors des États-Unis : 5 789 224, 5 618 711, 6 127 155 et les revendications en dehors des États-Unis correspondant au brevet américain expiré n° 5 079 352. L'achat de ce produit inclut une immunité limitée et non transférable contre les poursuites dans le cadre des revendications des brevets susmentionnés concernant l'utilisation de cette seule quantité de produit pour les propres recherches internes de l'acheteur. Aucun droit en vertu d′une autre revendication de brevet, aucun droit d′appliquer une méthode brevetée et aucun droit d′assurer des services commerciaux de quelque nature que ce soit, notamment, mais sans caractère limitatif, la communication des résultats des activités de l′acheteur contre rémunération ou une autre considération commerciale, n′est transmis expressément, par implication, ou par préclusion. Ce produit est réservé aux activités de recherche. Les utilisations diagnostiques protégées par les brevets de Roche nécessitent l′octroi d′une autre licence par Roche. De plus amples informations sur l′achat de licences peuvent être obtenues auprès du directeur de l'attribution des licences à l′adresse Applied Biosystems, Director of Licensing, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Californie, 94404, USA.
GenomePlex is a registered trademark of Takara Bio USA, Inc.
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Composants de kit également disponibles séparément

Réf. du produit
Description
FDS

  • L104310x Single Cell Lysis & Fragmentation BufferFDS

  • P4850Proteinase K from Tritirachium album, buffered aqueous glycerol solution, for molecular biology, ≥800 units/mLFDS

  • W4502Water, Nuclease-Free Water, for Molecular BiologyFDS

Pictogrammes

Health hazard

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Conseils de prudence

Classification des risques

Resp. Sens. 1

Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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To develop and validate a whole genome amplification and single nucleotide polymorphism (SNP) microarray protocol for accurate single cell 24 chromosome aneuploidy screening. Prospective, randomized, and blinded study. Academic reproductive medicine center. Multiple euploid and aneuploid cell lines were obtained
Resolving tumor heterogeneity: genes involved in chordoma cell development identified by low-template analysis of morphologically distinct cells
El-Heliebi A, et al.
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Nicholas Navin et al.
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Whole genome amplification overcomes restrictions for single-cell genomic analyses with non-specific amplification.

Protocoles

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This protocol provides a simple and convenient method to isolate, amplify, and purify genomic DNA from buccal swabs. Buccal swabs are a convenient method of acquiring a DNA sample.

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