MABS2005

Anti-2A-Peptid-Antikörper, Klon 3H4

clone 3H4, from mouse

• Synonym(e): Anti-2A-Antikörper
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 3H4, monoclonal
• Species reactivity: mouse
• Application: IF, IP, WB
• Citations: 7

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 3H4, monoclonal
• species reactivity: mouse
• packaging: antibody small pack of 25 μg
• technique(s): immunofluorescence: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• shipped in: ambient
• target post-translational modification: unmodified

Beschreibung

General description

2A-Peptide und 2A-ähnliche Peptidsequenzen (bekannt als cis-aktives Hydrolase-Element oder CHYSEL) sind eine hervorragende Alternative zu internen ribosomalen Eintrittsstellen (IRES), um die Expression mehrerer Genprodukte aus einem einzigen rekombinanten Konstrukt zu koordinieren. Die 2A-Sequenzen sind relativ kurze Peptide von etwa 20 Aminosäuren (je nach Herkunftsvirus), die das Konsensmotiv Asp-Val/Ile-Glu-X-Asn-Pro-Gly-Pro enthalten. 2A-Peptide ermöglichen es, mehrere Proteine als Polyproteine zu kodieren, die sich dann bei der Translation in die einzelnen Proteine aufspalten. Die 2A-Sequenz beeinträchtigt die normale Peptidbindungsbildung durch einen Mechanismus, der als Ribosom-Skipping bezeichnet wird, was zu einer effektiven, nicht-enzymatischen Erzeugung verschiedener Peptidprodukte aus einem einzigen multicistronischen Konstrukt führt. 2A-Peptide werden von mehreren Virusfamilien, am bekanntesten ist das Maul- und Klauenseuche-Virus der Familie Picornaviridae, zur Herstellung mehrerer Polypeptide verwendet. Anti-2A-Peptid, Klon 3H4, erkennt die 2A-Sequenz aus dem Maul- und Klauenseuche-Picornavirus (VKQTLNFDLLKLAGDVESNPG*P) mit einer Spaltstelle zwischen G und P. (Ref.: Trichas, G, et al. (2008). BMC Biol. 6: 40).

~150 kDa beobachtet. In einigen Lysat(en) können uncharakterisierte Banden beobachtet werden.

Immunogen

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das der Sequenz CGDVEENPG (freier C-Terminus) entspricht und aus dem Thosea asigna-Virus stammt.

Application

Anti-2A-Peptid, Klon 3H4, Best.-Nr. MABS2005, ist ein monoklonaler Maus-Antikörper, der 2A-Peptid nachweist und für die Verwendung in der Immunfluoreszenz, Immunpräzipitation und in Western Blot getestet wurde.

Forschungskategorie
Sekundär- und Kontrollantikörper

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies 2A-Peptid in HEK293 SpCas9-P2A-Puro- und NIH3T3 SpCas9-T2A-Puro-Zelllysaten nach (mit freundlicher Genehmigung von Stefan Schuchner, Ph.D. und Egon Ogris, M.D., Medizinische Universität Wien, Österreich).

Analyse mittels Immunpräzipitation: Eine repräsentative Charge wies 2A-Peptid in HeLa-Zellen, die SpCas9-P2A oder einfache HeLa-Zellen exprimieren, sowie HEK293-Zellen, die SpCas9-T2A oder einfache HEK293-Zellen exprimieren, nach (mit freundlicher Genehmigung von Stefan Schuchner, Ph.D. und Egon Ogris, M.D., Medizinische Universität Wien, Österreich).

Immunfluoreszenz-Analyse: Eine repräsentative Charge wies 2A-Peptid in HeLa-Zellen nach, die transient mit SaCas9-T2A-GFP transfiziert waren (mit freundlicher Genehmigung von Stefan Schuchner, Ph.D. und Egon Ogris, M.D., Medizinische Universität Wien, Österreich).

Biochem/physiol Actions

Klon 3H4 weist das 2A-Peptid in Mäusezellen nach.

Physical form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-Antikörper IgG1 in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Preparation Note

Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blot in NIH3T3-exprimierendem SpCas9-T2A-Puro-Zelllysat.

Western-Blot-Analyse: Mit 0,5 µg/ml dieses Antikörpers wurde 2A-Peptid in 10 µg NIH3T3-exprimierendem SpCas9-T2A-Puro-Zelllysat nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

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