Yes. Multiple plasmids can be transfected into the cell at the same time. The key is to maintain the optimal ratio of total DNA (all plasmids). See the User Protocols for more information on the ratio of reagent to DNA.
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Über diesen Artikel
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liquid
manufacturer/tradename
Novagen®
storage condition
OK to freeze
technique(s)
transfection: suitable
shipped in
wet ice
storage temp.
2-8°C
General description
Stuart Rulten. Forschungsmitarbeiter. University of Sussex
„„Seit wir mit GeneJuice arbeiten, haben wir eine Menge Zeit und Kosten gespart!““
Dr. Andrea Kress, Institut für Klinische und Molekulare Virologie, Erlangen, Deutschland
„„I finde, dass GeneJuice bei minimaler Optimierung für zahlreiche Zelltypen geeignet ist““
Caitriona Marie Lyons. Doktorandin. University College Cork, Ireland
Transfektion ist der Prozess, durch den Nukleinsäuren in Säugerzellen eingebracht werden. Das Transfektionsreagenz GeneJuice ist eine proprietäre Formulierung, die für maximale Transfektionseffizienz, Anwenderfreundlichkeit und minimale Zytotoxizität für Säugerzellen optimiert wurde. Während viele handelsübliche Transfektionsreagenzien auf kationischen Lipidformulierungen basieren, besteht GeneJuice aus einem nicht toxischen Zellprotein und einer kleinen Menge eines neuartigen Polyamins. GeneJuice Transfektionsreagenz ermöglicht einen hoch effizienten DNA-Transfer sowohl bei der stabilen als auch transienten Transfektion eukaryotischer Zellen und eignet sich ideal für Hochdurchsatz-Transfektionen in einem Multiwellplattenformat. Die einzigartige Zusammensetzung ist sowohl mit serumhaltigen als auch serumfreien Medien kompatibel, so dass bei Transfektionsversuchen keine Medienwechsel erforderlich sind. GeneJuice ist eine ausgezeichnete Alternative zu zahlreichen anderen Methoden, wie z. B. Calciumphosphat-Copräzipitation, Elektroporation, Mikroinjektion, biolistische Partikelabgabe, Lipofektion und Komplexbildung mit DEAE-Dextran. Die 1-ml-Größe bietet ausreichend Reagenz für die Durchführung von bis zu 500 Transfektionen in 35-mm-Standardplatten.
Mit GeneJuice® Transfektionsreagenz transfizierte Zelllinien
| Zelllinien: | Primärzellen: | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 10T1/2 293T 3T3 NIH 3T3 Swiss 3T3-L1 A204 A431 A549 Alpha TC1-6 AR 42J As4.1 AtT-20 B50 BC-1 BC-2 BC3 BCBL BHK-21 C3H/10T1/2 C6 C2C12 | Caco-2 Caki-1 Calpan-1 Calu-1 Calu-6 CCL-131 CFPAC-1 Chang Leberzellen CHO CHO-7 CHO-IR CHO-K1 COS-1 COS-7 CS-1 CV-1 Daudi DDTI MF-2 DT40 ECV304 EL4 | ES-E14TG2a EVSCC17M H9c2 HCT-116 HEK293 HeLa HeLa B HeLa T4 Hep 3B2.1-7 HepG2 Hepa 1-6 Ht-29 HTB-37 HTB-45 Huh-7 HUVEC IC21 IEC-6 JEG-3 Jurkat KB | L57-3-11 L-6 L-929 MA-10 McA-RH7777 MCF-7 MCF-10-2A MDCK Melanozyten MG-63 Neuro 2A Neuroblastom NRK NT2/D1 OV-1063 OVCAR3 P4 P19 PC12 PA317 PAM212 | PS-1 R2C RAW 264.7 RBL-2H3 RMP-41 SAOS-2 SC-1 Schneider-Zelllinie 2 SK-N-MC SK-N-SH SKOV3 STO SW-480 SW-837 T3M4 TM4 U937 UCD Vero | glatte Muskelzellen der Aorta Astrozyten Angioblasten Chondrozyten Chromaffinzellen Epithelzellen: Brustdrüse Prostata Trachea Fibroblasten Keratinozyten |
Features and Benefits
- Hocheffizienter DNS-Transfer sowohl für stabile als auch für transiente Transfektionen
- Sowohl mit serumhaltigen als auch serumfreien Medien kompatibel
- Einfaches Protokoll; kein Medienwechsel erforderlich
- Ideal für die Hochdurchsatz-Transfektion in einem Multiwellplattenformat
- Ideal für die Retrovirusprodukton zur T-Zell-Transduktion
- Für zahlreiche Zelltypen bei minimaler Optimierung geeignet
- Bietet eine höhere Transfektionseffizienz und geringere Zytotoxizität als Reagenzien anderer Hersteller
- Die 1-ml-Größe bietet ausreichend Reagenz für die Durchführung von bis zu 500 Transfektionen in 35-mm-Standardplatten
Other Notes
Legal Information
Disclaimer
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Dieser Artikel | |||
|---|---|---|---|
| form liquid | form suspension | form liquid | form liquid |
| technique(s) transfection: suitable | technique(s) transfection: suitable | technique(s) transfection: suitable | technique(s) transfection: suitable |
| Quality Level 100 | Quality Level 100 | Quality Level 100 | Quality Level 200 |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C |
| shipped in wet ice | shipped in wet ice | shipped in - | shipped in wet ice |
| storage condition OK to freeze | storage condition OK to freeze | storage condition OK to freeze | storage condition OK to freeze |
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Protokolle
Verwandter Inhalt
Die Herstellung monoklonaler Antikörper wurde durch große technologische Fortschritte noch schneller und effizienter. Es gibt drei etablierte Plattformen für die Antikörperforschung. Wir bieten Reagenzien zur Herstellung von Bibliotheken monoklonaler Antikörper für alle Verfahren an.
Major technological advances have made the production of monoclonal antibodies quicker and more efficient. There are three established platforms for antibody discovery. We offer reagents for production of monoclonal antibody libraries using each of these techniques.
Global Trade Item Number
| SKU | GTIN |
|---|---|
| 70967-3 | 07790788052928 |
| 70967-5 | 04055977256222 |
| 70967-4 | 04055977256215 |
| 70967-6 | 04055977255577 |
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Can the DNA transfection reagents be used for co-transfecting plasmids?
1 answer-
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Why do I need to perform optimization? How should I go about doing it?
1 answer-
Each cell type behaves differently, by carrying out an optimization, the best transfection condition for your particular cell type can be determined. In other words, you can avoid putting too much transfection reagent on your cells, which may cause unnecessary toxicity issue and waste of precious transfection reagent. Optimization is suggested for every new combination of cell type and plasmid. The most important parameters are cell density and ratio of transfection reagent to DNA. Start with the volume of the selected transfection reagent (1x) and plasmid amount (1x) as recommended in the User Protocol. If those conditions do not yield the desired results, an optimization experiment can be performed. In a 24-well plate, plate the same amount of cells in each well. Set up a gradient across the plate and add the appropriate volume of transfection reagent (0.5x, 1x, 1.5x, 2x, 2.5x and 3x). Set up a gradient down the plate and add the appropriate amount of plasmid (0.5x, 1x, 1.5x and 2x). With a reporter gene in the plasmid, the optimal condition can be easily determined.
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What is the size limit for plasmid DNA?
1 answer-
Large plasmids in the range of 12-15 kb can be transfected. We have cloned and expressed inserts encoding large proteins (including β-gal) without difficulty in mammalian cell lines.
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Will antibiotics interfere with transfection?
1 answer-
We do not recommend including antibiotics during the formation of the transfection reagent/DNA complex. Increased cell permeability during transfection causes high antibiotic influx, resulting in cell death. Some antibiotics (such as kanamycin) are cationic and can therefore interfere with transfection. Antibiotics such as penicillin and streptomycin can be present in the complete growth media (with serum) which is used to grow the cells. If you are generating stable transfectants, add selection antibiotics (e.g., G 418 or hygromycin) 48-72h after transfection.
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How long should I leave the transfection reagent on the cells? Do I need to change medium at any time after transfection?
1 answer-
Since our nucleic acid transfection reagents are compatible with serum-containing media, medium change after transfection is not necessary. The majority of cell types can be incubated with the transfection mix for 24-72h without any media change, and then harvested for the desired downstream application. If media change is necessary due to the toxicity of the protein being expressed, the transfection mixture can be removed after 2-8 h of incubation and replaced with complete growth medium.
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Can I use the product in the presence of serum?
1 answer-
Yes. Our nucleic acid transfection reagents are effective for transfecting cells in media with or without serum. While cells can be incubated in media containing serum, it is absolutely critical that serum is NOT present during formation of the transfection reagent/DNA complex. For most applications, we recommend adding the transfection reagent/DNA complex (formed in serum-free media) to cells grown in complete growth media. For certain cell lines and experimental conditions, serum starvation of cells might be required. Since serum provides growth factors and nutrients, transfection efficiencies achieved with growth in serum containing media are typically better than those in serum-free media.
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How do I scale my transfection protocol when working with different culture volumes?
1 answer-
For most standard culture formats, guidelines are provided in the User Protocol. If you are using different culture volumes, vary the amounts of DNA, transfection reagent, cells, and culture media in proportion to the relative surface area while keeping the transfection reagent: DNA ratio constant.
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Is the quality of DNA important for good transfection?
1 answer-
Yes, it is essential that the DNA to be transfected is of high quality and free of endotoxins. Plasmid DNA preparations should include an endotoxin removal step.
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