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Sigma-Aldrich

Calciumphosphat-Transfektionskit

Most cost effective transfection reagent kit for transient and stable transfection of DNA into mammalian cells

Synonym(e):

Gene delivery

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

EG-Nummer:
233-140-8
UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.85

Qualität

for molecular biology

Qualitätsniveau

200

Form

solution

Verwendung

 kit sufficient for 160 transfections (6 cm dishes)
 kit sufficient for 400 transfections (3.5 cm dishes)
 kit sufficient for 80 transfections (10 cm dishes)

Methode(n)

transfection: suitable

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

Verwandte Kategorien

Allgemeine Beschreibung

Die Calciumphosphat-Transfektion ist eine häufig genutzt Methode für das Einführen von DNA in eukaryotische Zellen. Diese Methode wird verwendet, und in einer großen Vielfalt von Zellarten sowohl transiente als auch stabile Transfektionen zu erzielen.

Anwendung

Das Calciumphosphat-Transfektionskit hat folgende Anwendungen:
  • für Transfektionsverfahren
  • für die Transfektion von Hek293T-Zellen
  • für die Transfektion von H29D-Zellen

Geeignet für transiente wie für stabile Transfektionen von DNA in kultivierte Säugetierzellen. Bei den folgenden Zellen wurde eine erfolgreiche Transfektion mit der Calciumphosphat-Methode durchgeführt:

BAEC
Melanomzellen des Darms
CHO K1
COS-7
Fibroblasten (human embryonal, Neo Derm)
HEK293
Huh 7
IMR-90
LLC (Lewis-Lungenkarzinom)
NIH3T3
PC-12
PCI-13
SH-Sy5Y
SK-Hep-1
T47D

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Geeignet für transiente wie für stabile Transfektionen
  • Reproduzierbar für eine breite Palette von Zellarten
  • Häufig referenziert
  • Kostengünstig

Komponenten

Lieferumfang des Calciumphosphat-Transfektionskits:
5 ml 2,5 M CaCl2 (C2052)
25 ml 2x HEPES-gepufferte Kochsalzlösung (H1012)
25 ml Wasser in Molekularbiologie-Qualität (W4502)

Prinzip

Bei diesem Verfahren wird eine HEPES-gepufferte Kochsalzlösung, die Natriumphosphat enthält, langsam mit einer CaCl2-Lösung gemischt, in der sich die DNA befindet. Es bildet sich ein DNA-Calciumphosphat-Co-Präzipitat, das an der Zelloberfläche anhaftet und von der Zelle aufgenommen wird, mutmaßlich mittels Endozytose.

Sonstige Hinweise

Das Protokoll wurde entwickelt für die transiente Transfektion von CHO-Zellen unter Verwendung eines pSV40-CAT-Plasmids als Reportergen.

Piktogramme

Exclamation mark
GHS07

Signalwort

Warning

H-Sätze

H319

Gefahreneinstufungen

Eye Irrit. 2

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

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M Wigler et al.
Cell, 14(3), 725-731 (1978-07-01)
Previous studies from our laboratories have demonstrated the feasibility of transferring the thymidine kinase (tk) gene from restriction endonuclease-generated fragments of herpes simplex virus (HSV) DNA to cultured mammalian cells. In this study, high molecular weight DNA from cells containing
Munjin Kwon et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 1018, 107-110 (2013-05-18)
The calcium phosphate transfection is a widely used method for introducing foreign DNA plasmids into cells. Mechanisms underlying this transfection method are not yet defined; however, DNA-calcium phosphate precipitates are internalized by the cells and DNA is efficiently expressed in
A new technique for the assay of infectivity of human adenovirus 5 DNA.
F L Graham et al.
Virology, 52(2), 456-467 (1973-04-01)
Denise A Carbonaro et al.
Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, 22(3), 607-622 (2013-11-22)
Gene transfer into autologous hematopoietic stem cells by γ-retroviral vectors (gRV) is an effective treatment for adenosine deaminase (ADA)-deficient severe combined immunodeficiency (SCID). However, current gRV have significant potential for insertional mutagenesis as reported in clinical trials for other primary
Use of retroviral-mediated gene transfer to deliver and test function of chimeric antigen receptors in human T-cells
Parente-Pereira A C, et al.
Journal of biological methods, 1(2), e7-e7 (2014)
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