點/槽（過濾）印染

點印跡是一種理想的技術，可一次快速評估許多樣本中目標抗原的含量。同時，它也是表位圖和篩選抗體目標特異性的常用方法。

Dot/Slot (Filtration) 印迹主题：可能的原因和补救措施：

• 樣品通過膜的速度慢或沒有過濾
• 蛋白塗滿膜頂
• 蛋白塗抹在膜背面

圖 1. 使用 Immobilon® Western Chemiluminescent HRP 底物在人類血清的點陣印跡上檢測轉鐵蛋白。

樣品通過膜過濾緩慢或無過濾
可能原因	吸塵不足會導致機器故障。 真空不足	確保吸墨裝置關閉正確，且密封完好。 確保真空源（如真空泵）運作正常。 用高品質的實驗室膠帶封住任何打開的孔。增加真空度。
離心或過濾樣品以去除微粒。 使用緩衝液稀釋黏稠樣品。

印跡上觀察到的蛋白質很少或無蛋白質
Possible Cause        nbsp;                            <	盡量減少樣品稀釋，過濾更多樣品到膜上。
去垢劑 （例如、SDS)  可能會抑制  較低 分子 重量 的蛋白質  與 膜結合  ；	盡可能避免使用去垢劑。
使用更敏感的染色。

染色不均勻
Possible Cause	補救方法
膜結構被濾紙壓縮	在印圖裝置中放置第二層膜，以保護接收樣品的膜。
將膜鋪在甲醇表面預先濕透。浸入膜可以夾住空氣。
膜必須預先用甲醇濕透；整個膜應均勻地從不透明變成半透明。
樣品中有氣泡。	小心移取樣品到孔中，避免形成氣泡。
樣品必須覆蓋整個暴露的膜區域。

蛋白質塗佈在膜頂部
Possible Cause        nbsp;	過濾前確保印跡裝置已正確組裝、關閉和密封。

塗佈在膜背面的蛋白質
補救方法
減少載入井中的蛋白質量。

材料

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