Benzonase^® 核酸酶問與答

Benzonase^®核酸酶對哪種核酸有效？我可以在分離 RNA 時使用它嗎？

Benzonase^® Nuclease 是一種雜交內切酶，可以攻擊和降解所有形式的 DNA 和 RNA（單鏈、雙鏈、線性和環狀）。

我想使用 Benzonase^® Nuclease 來達到什麼目的？

應用包括：降低黏度以利於加工（例如：重組蛋白質的純化、黏度的降低）、

應用包括：降低黏度以利於處理（例如：重組蛋白質純化、使用哺乳類動物細胞裂解液等對黏度敏感的應用）；在處理前減少儲存的外周血單核細胞 (PBMC) 樣本中的結塊；製備包涵體以成功使蛋白質重組；以及在進行二維 SDS-PAGE 前去除樣本中帶負電荷的核酸。

Benzonase^®核酸酶如何失活？如何去除？

使用 EDTA 螯合必需的金屬離子可達到可逆抑制。不可逆的失活只能在極端條件下（100 mM NaOH，70 °C，30 分鐘）完成。可使用層析技術將苯甲酮酵素與目標產品分離。

My Benzonase^® Nuclease was left out on the bench.它還好嗎？

我們對 Benzonase Nuclease 進行了廣泛的穩定性測試，發現它非常穩定。即使在 37 °C 下長時間培養，Benzonase^® Nuclease 仍能在幾個月內維持 > 90% 的活性。

我想使用不同的緩衝液。我想使用不同的緩衝液，請問 Benzonase^® Nuclease 的完全活性絕對需要什麼條件？哪些條件會降低其活性？

Benzonase® Nuclease 的活性需要 1-2 mM Mg2+。單價陽離子濃度>50%、磷酸濃度>20 mM、硫酸銨濃度>25 mM會抑制苯宗酶（約 50%的活性）。

Benzonase^®核酸酶與蛋白酶抑制劑雞尾酒相容嗎？

是的。 不過，由於許多蛋白酶抑制劑雞尾酒都含有 EDTA，因此應謹慎使用。

我的蛋白不溶解，我需要在變性條件下進行純化。Benzonase^® Nuclease 在尿素中是否仍然有效？

Benzonase^®核酸酶的活性实际上在尿素存在的情况下会增加，浓度最高可达 6 M。在 7 M 尿素濃度下，Benzonase 核酸酶會在 15 分鐘後變性，失去活性。然而，在失活之前，核酸會發生顯著的降解。較高初始濃度的 Benzonase Nuclease 可以部分補償 7 M 尿素的影響。

為什麼有這麼多種 Benzonase^® Nuclease？HC 是什麼意思？

為了滿足最廣泛的加工和成本要求，Benzonase^® Nuclease 有兩種不同的純度等級：純度等級 I (>99% 純度) 和純度等級 II (>90% 純度)。這兩種等級都有 25 U/μL 或高濃度 (HC) 的產品，高濃度 (HC) 的定義為 250 U/μL 。如需大量購買，請聯絡客製化服務部。

Benzonase^®核酸酶完全降解核酸的最終結果是什麼？

Benzonase^®核酸酶將核酸完全消化為以5'-單磷酸為末端、長度為2-5個碱基的寡核苷酸。