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活細胞螢光細胞器染料和染色劑

真核細胞包含負責執行細胞存活必要功能的子細胞結構,包括產生能量 (ATP)、合成和販賣蛋白質,以及清除細胞廢物。由於這些細胞具有專門的功能和明確的性質,因此在細胞生物學研究中,標示關鍵的細胞器,例如:細胞膜、核、細胞質、線粒體、溶酶體、內質網 (ER)、高爾基體 (Golgi apparatus) 和細胞骨架蛋白 (例如肌動蛋白),是非常有用的。更明顯的是,在活細胞成像技術中利用細胞器染料作為對照物,已被證明在細胞功能研究中非常有價值。我們提供許多針對不同細胞器的高度特異性螢光染料和標記,可用於監測細胞健康、細胞死亡、新陳代謝活動、自噬、細胞追蹤以及細胞遷移和入侵。

線粒體染料

線粒體是雙膜結合的細胞器,負責細胞呼吸和以三磷酸腺苷 (ATP) 的形式產生能量。線粒體也參與其他任務,例如細胞訊號、細胞分化和細胞死亡,以及維持細胞週期和生長的控制。線粒體的螢光活細胞染料取決於膜電位,除了可用於分析線粒體的活動外,還可用於分析整體細胞的健康與活力。

細胞線粒體的活細胞成像。

圖 1.細胞線粒體的活細胞成像。A)用 BioTracker NIR650 溶酶體染料 (SCT139) 和 BioTracker 488 綠色線粒體染料 (SCT136) 共染的活 HeLa 細胞。B) 用 BioTracker ATP-Red 活細胞染料 (SCT045)、Hoechst (94403) 和綠色線粒體特異性染料共同染色的活 HeLa 細胞,顯示在線粒體內的定位。 C) 用 BioTracker 633 紅色線粒體染料 (SCT137) 染色的活 HeLa 細胞。

溶酶體染料

溶酶體是與膜結合的細胞器,是細胞的廢物處理系統。作為高酸性 (pH 4-5) 的細胞器,溶酶體含有各種酵素,能夠分解各種生物大分子,包括縮氨酸、核酸、碳水化合物和脂質。除了溶解生物大分子外,溶酶體也參與自噬和細胞凋亡。視內部酸性環境而定,溶酶體的活細胞螢光染料可用於分析溶酶體活動、自噬事件、囊泡運輸和整體細胞健康。

細胞溶酶體的活細胞成像。

圖 2.細胞溶酶體的活細胞成像。A)表達線粒體-GFP的HeLa細胞用BioTracker 560橙色溶酶體染劑(SCT019)和Hoechst DNA染色劑(藍色)染色。B)用活細胞微管染色(藍色)和 BioTracker 540 紅色溶酶體染劑(SCT141)對活的 HeLa 細胞進行染色。 C)用 BioTracker 540 紅色溶酶體染劑(SCT141)對活的 Hela 細胞進行染色。

核染料

細胞核包含幾乎所有細胞的遺傳物質,以染色體組織,由長線條 DNA 與蛋白質複合而成。活細胞核染色液可用於追蹤細胞,或與其他螢光染料或細胞報告器作為對照。我們提供多種顏色的染料,包括長波長、遠紅色的核染料。與傳統的紫外光可激發 DNA 染料(如 Hoechst 33342)相比,長波長核染料在活細胞成像實驗中可降低細胞毒性。

細胞核的活細胞成像

圖 3.細胞核的活細胞成像。A)使用 BioTracker 488 Green Nuclear Dye (SCT120) 染色的 HeLa 活細胞。 B)使用 BioTracker NIR694 Nuclear Dye (水基) 和 FITC-phalloidin 染色的 HeLa 活細胞。C)使用 BioTracker NIR694 Nuclear Dye (in DMSO)、BioTracker 488 Green Mitochondria Dye 和 CF405-phalloidin 對 HeLa cells 進行固定細胞染色。

細胞膜染料

保護和封閉細胞內部,細胞膜主要由脂質和蛋白質組成。除了控制雙分子層間的移動外,細胞膜還參與各種細胞過程,如細胞黏附、離子導通、細胞信號傳遞和細胞外結構附著。BioTracker 細胞質膜染料是一種親脂性羰花青,能夠以穩定且無毒的方式標示細胞膜。由於細胞毒性低,這些染料適用於長期細胞追蹤和成像。不同於 PKH 染料,BioTracker 細胞質膜染料即開即用,不需要複雜的低滲透標記方案。BioTracker 染料可直接加入正常的培養基,標示懸浮或黏附的細胞。

細胞膜的活細胞成像

圖 4.細胞膜的活細胞成像。A)使用 BioTracker 400 Blue Cytoplasmic Membrane Dye (SCT109) 染色的活的 HeLa cells。 B)使用 BioTracker 490 Green Cytoplasmic Membrane Dye (SCT106) 染色的活的 Hela cells。C) 使用 BioTracker NIR750 Cytoplasmic Membrane Dye (SCT113) 對 Hela cells 進行活細胞染色。

細胞質染料

細胞骨架染料

細胞骨架是由延伸至整個細胞質的相互連結的細絲和微管組成的複雜網絡,它為細胞提供結構性支撐,並控制許多過程,包括內吞、細胞分裂、細胞遷移、入侵和移動。與傳統固定的 F-actin 染色劑 (如共轭类磷脂染料) 不同,BioTracker 微管細胞骨架染料是一種細胞可滲透的紫杉醇探針,無需清洗步驟即可成像。這些簡單、快速且靈敏的染色劑有綠色和紅色螢光可供選擇,可用於即時監測細胞骨架動態。

細胞骨架的活細胞成像。

圖 5.細胞骨架的活細胞成像。A)用 BioTracker 488 Green Microtubule Cytoskeleton Dye (SCT142) 和 BioTracker NIR650 Lysosome Dye (SCT139) 染色的活 HeLa cells。 B)用 BioTracker 488 Green Microtubule Cytoskeleton Dye (SCT142) 染色的有丝分裂纺锤体。DNA 用 BioTracker NIR694 Nuclear Dye (water-based) (SCT117) 染色。

脂質染料

作為細胞的基本構成物質,脂質具有許多重要的細胞功能,但也與各種疾病有關,包括心血管疾病和神經系統疾病。細胞內脂質小滴是細胞質細胞器,參與甘油三酯和膽固醇酯的儲存和調節。BioTracker 脂質染料可快速染色活細胞或固定細胞中的脂滴,無需任何清洗步驟,且對細胞膜或其他細胞器的背景染色極少。用 BioTracker 脂滴染料染色後,活細胞可隨後固定和透化。

細胞脂質的活細胞成像

圖 6.細胞脂質的活細胞成像。A)用 BioTracker 488 綠色脂滴染料 (SCT144)、Hoechst (94403) 和 BioTracker 655 紅色胞質膜染料 (SCT108) 染色的活 HeLa 細胞。B)用 BioTracker 610 紅色脂滴染料(品紅色)和 BioTracker 488 綠色核染料(SCT120)染色的 HeLa 細胞。 C)用 BioTracker 488 綠色脂質染料(SCT144)染色的 HeLa 細胞。

結論

將細胞培養成像技術限制在固定的組織和細胞上,會限制研究人員獲得有關系統的資訊,因為觀察者只能捕捉到細胞時間的一瞬間。我們的活細胞螢光細胞器染料允許對特定細胞器進行選擇性染色,而不會增加細胞毒性。活細胞細胞器染色可幫助研究人員確認特定蛋白質或細胞內靶點的身份,並提供對細胞過程的更深入瞭解。我們廣泛的產品組合可確保為您的活細胞成像實驗提供所需顏色的細胞器特異性染料。

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