Discovery BIO 寬毛孔 C5

HPLC 色譜柱和毛細管

結合相：		二氧化矽：		球形，3 µM、5 µM 和 10 µM 直徑，300 Å 孔隙。M 直徑，300Å 孔徑，
		高純度 (<10ppm金屬)

蛋白質與多肽分離挑戰的解決方案

• 蛋白質組學與生物治療：高效率蛋白和疏水分離
• LC/MS; 無出血、毛細管尺寸和 pH 穩定性
• 蛋白質純化：從分析到製備均可擴展
• 比 C4 相強化的壽命和 pH 穩定性

證明

大分子的卓越性能

色譜柱： Discovery BIO Wide Pore C5, 15cm x 4.6mm, 5µm; Mobile Phase: (A) 0.1% (v/v) TFA in H₂O：MeCN (75:25)，(B) 0.1% (v/v) TFA in H₂O：MeCN(25:75); 流速： 1mL/min; 溫度： 30°C; 檢測： 220nm; 注入： 10µL; 樣品： 蛋白質測試混合物; 漸變： 0-100% B 在 25 分鐘內。

1. RNase (1mg/mL) (13.7kDa)
2. Cytochrome C (1mg/mL) (12.4 kDa)
3. Lysozyme (1mg/mL) (14.3 kDa)
4. 牛血清白蛋白 (2.5mg/mL) (67.0 kDa)
5. 肌紅蛋白 (1mg/mL) (18.8 kDa)
6. 卵清蛋白 (3.5mg/mL) (45.3 kDa)

圖 1. 適用於大分子的優異性能

Discovery Bio寬孔C5的穩定性優於傳統C4

經過25,000個柱容量（222個梯度循環）後，Discovery BIO寬孔C5的效率變化極小。竞争性 C4 色谱柱的效率损失显著，高达 50%。

色谱柱： Discovery BIO Wide Pore C5, 5cm x 4.6mm, 5 µM; Mobile Phase: (A) 0.1% TFA in H₂O : MeCN (95:5), (B) 0.1% TFA in H₂O : MeCN (25:75); B 2 mL/min; Temp: 35 °C; Detection: 220nm; Injection： 5 µL; Sample: Protein/Peptide Test Mix; Gradient:0-20%B in 20 min

.

圖 2. 增加發現生物寬孔的穩定性

Discovery Bio Wide Pore C5 在 pH 8.0 下的穩定性

樣品成分的保留時間在通過色譜柱 14,000 個床容量後保持不變。

色譜柱： Discovery BIO Wide Pore C5, 5cm x 4.6mm, 5 µM; Mobile Phase: 25mM potassium phosphate, pH 8 : MeOH (95：5）； ；流速： 2 mL/min；溫度：35 ℃； ；檢測： ；254nm

。

圖 3. 發現的穩定性

偵測不到的 LC/MS 滲漏

LC/MS 滲漏分析在 Discovery BIO Wide Pore C5 上進行
色譜柱： Discovery BIO Wide Pore C5, 15cm x 4.6mm, 3 µM; Mobile Phase: (A) 0.1% TFA in H₂O, (B) 0.1% TFA in MeOH; Flow Rate: 1 mL/min; Temp: 30 °C; Gradient： 15分鐘內0-100% B，保持5分鐘，然後回到0% B 10分鐘

相對於空白運行（梯度運行不使用色譜柱），TIC基線無上升

圖 4. M/S Spectrum (上方陰影區)

圖 5. 與空白檢測相比，色譜柱基本上不產生 m/z 峰。("X "表示空白樣本中也有峰)

Discovery Bio Wide Pore C5的可重複性

色柱： Discovery BIO Wide Pore C5, 15cm x 4.6mm, 5 µM; Mobile Phase:(A) 0.1% PFPA (pentaflouropionic acid) in H₂O : MeCN (81:19), (B) 0.1% PFPA in H₂O : MeCN (62:38); Flow Rate: 1 mL/min; Temp: 30 °C; Detection： 215nm; 進樣： 10 µL; 樣品：多肽混合物（Sigma Cat.P2693）； ；梯度： ；0-100% B，19 分鐘。

 

Peak Identity：	氨基酸序列：
1.Arg8-vassopressin 2.Brandykinin, fragment 1-5 3.催產素 4.Met-enkaphalin 5.促黃體激素釋放激素 6.Leu-enkephalinin 7.白蘭地激肽 8.蠶豆素 9.物質 P	CFQNCPRG-amide; disulfide RPPGF CYIQNCPLG-amide; disulfide PEHWSYGLRPG-amide YGGFM YGGFL RPPGFSPFR PEQRLGNQWAVGHLM-醯胺 RPKPQQFFGLM-醯胺

圖 6. 地段對地段的可重複性發現

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