Product No. F4375
CAS #：26873-85-8
Ficoll® 400 是由蔗糖和環氧氯丙烷共聚而成的高支化聚合物。Ficoll® 400 完全不含離子。由於含有豐富的羥基，Ficoll® 400 具有極佳的親水性和水溶性。Ficoll® 400 最常見的應用是作為密度梯度培養基，用於真核細胞、細胞器和細菌細胞的分離。密度範圍可達 1.2 g/ml。
物理性质
外观：白色至白色帶微弱黃色的粉末
乾燥時的損失：不超過5%1
分子量：400,000 +/- 100,000，根據本質粘度測定1
特定旋轉：+56.5° at 20 °C (C=1% in water)1 nbsp;
本質黏度：約 0.17 dl/g1
包括 NaCl 在內的可重氮化物質：小於 1%1
Stokes Radius：約 10 nm1
與蔗糖不同，Ficoll 溶液的滲透率相對較低。
由於 Ficoll 的分子量高且可透析物質含量低，因此其對細胞膜的滲透性遠低於蔗糖。因此，與蔗糖梯度相比，Ficoll 梯度中的細胞收集密度較低。由於其低膜滲透性和低滲透壓，在 Ficoll 中分離通常能更好地保存細胞功能和形態。
儲存/穩定性
在室溫下以粉末形式適當儲存的 Ficoll 400 預計可有 5 年的保存期限。
溶解性/溶液穩定性
在水中可達到 50% (w/v) 的濃度。
我們測試了Ficoll 400在10mL去離子水中的溶解度，1g的Ficoll 400在10mL去離子水中會產生透明至微混、無色至微黃的溶液。
Ficoll在鹼性和中性溶液中都很穩定。
Ficoll 在鹼性和中性溶液中都很穩定，pH 值低於 3 時，它會迅速水解，尤其是在溫度升高時。
程序
離心
Ficoll® 400 可在所有類型的離心轉子中進行梯度離心，並在單位重力下進行分離。對於離心，非連續梯度和連續梯度都是可能的。非連續梯度有兩大優點：首先，Ficoll 400 密度的突然變化意味著在不同密度層之間的界面上會發現分離出來的細胞呈尖銳的帶狀。這使得用移液管移取樣品變得容易。其次，密度差異大的細胞只需兩層密度就能輕鬆分離。
若要估算特定應用所需的密度，請參考下表：
若要估算特定應用所需的密度，請參考下表：
若要估算特定應用所需的密度，請參考下表：
若要估算特定應用所需的密度，請參考下表。
| 來源 | 條件 | |
|---|---|---|
| 膜 | 1。05 | 100,000xg16小時 |
| 色素體 | 1.07 | 195,000xg36小時 |
| 肝細胞 | 1.10-1.15 | 6,000xg 2 小時 |
| 成纖維細胞 | 1.05 | 8,000xg 1 小時 |
| Ehrlich 腹水細胞 | 1.07 | 1,400xg45分鐘 |
圖 1.以下是 Ficoll 密度與濃度的函數關係圖。
製備非連續梯度：
- 在緩衝液或等滲蔗糖溶液（0.25M）中製備Ficoll 400，其濃度應能分離所需物質。大多數細胞和細胞器在 Ficoll 400 中的浮力密度在 1.0 和 1.2 g/ml 之間。
- 在標準離心管中分層
（約 1 cm 深），密度最大的一層在最下面。
- 注意不要混淆梯度層，小心地將樣品放在上面。
在離心過程中，各種顆粒會根據其密度聚集在 Ficoll 層中或 Ficoll 層之間。
離心過程中，各種顆粒會聚集在 Ficoll 層中或 Ficoll 層間，視其密度而定。離心完成後，用移液管移除各相，並從相關餾分中移除 Ficoll。用緩衝液重複稀釋後再離心，可將 Ficoll 從分離的細胞和細胞器中移除。2
在某些情況下，可能需要連續或線性的密度梯度。這可以使用梯度混合器輕鬆製備。對於簡單的分離，可以使用沒有梯度的同源 Ficoll 400 溶液。 分離是透過逐步增加離心速度來完成的。3
通過密度梯度的單位重力沉降被廣泛用於分離對離心敏感的細胞。4,5,6
Ficoll-Hypaque 密度培養基 (Histopaque)
需要 Ficoll-Hypaque 的應用使用 Ficoll 和二苯甲三酸钠的混合物。我們提供三種不同密度的預成型混合物，產品名稱為 Histopaque-1077。、 1119。
核酸雜交
Ficoll 400 是用於 Northern 和 Southern 印迹分析的 Denhardt 溶液的成分。在核酸雜交過程中，Ficoll 可減少材料與硝酸纖維膜的非特異性結合。7
我們提供的 Denhardt's solution（產品編號 D2532），50X 濃縮液，經測試可用於核酸雜交。典型的雜交溶液需要 5X 濃度的 Denhardt's 溶液。
免疫學應用
Ficoll 400 已被用作合子載體，並與二硝基苯酚、三硝基苯酚和螢光素異硫氰酸鹽結合，以增強小鼠的原發性免疫反應。8,9
化學定義細胞培養基
Ficoll可與或不與血清衍生生長因子一起使用，以支援原代培養物和已建立細胞株的生長。10,11
濃縮透析
Ficoll 400 可用於透析濃縮溶液，因為它的高分子量使其無法穿透透析膜。滲透壓會將水從膜上吸到 Ficoll 400 的溶液中，從而有效地濃縮敏感材料。1
電泳
連續流電泳通常需要在電解質中加入穩定劑。12,13
相分隔
相分隔可根據表面特性分隔細胞。Ficoll 400 在兩相系統中與聚乙二醇結合，在三相系統中與右旋糖酐和聚乙二醇結合。14,15
生理灌注和細胞穩定溶液
在監測血管中蛋白質排泄的過程中，Ficoll 已被加入生理鹽水灌注液中。玻璃化小鼠胚胎已用含有 30% Ficoll 加 0.5 M 蔗糖的溶液稀釋。17 離體大鼠腎臟用含有 4.7% Ficoll 400 的 Tyrode's 溶液灌注。18
*Ficoll 是 Pharmacia 的註冊商標。有關物理特性和應用的資訊來自 Pharmacia。
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參考資料
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