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  • Simultaneous quantification of lenalidomide, ibrutinib and its active metabolite PCI-45227 in rat plasma by LC-MS/MS: application to a pharmacokinetic study.

Simultaneous quantification of lenalidomide, ibrutinib and its active metabolite PCI-45227 in rat plasma by LC-MS/MS: application to a pharmacokinetic study.

Journal of pharmaceutical and biomedical analysis (2015-01-17)
Sridhar Veeraraghavan, Srikant Viswanadha, Satheeshmanikandan Thappali, Babu Govindarajulu, Swaroopkumar Vakkalanka, Manivannan Rangasamy
摘要

Efficacy assessments using a combination of ibrutinib and lenalidomide necessitate the development of an analytical method for determination of both drugs in plasma with precision. A high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed for the simultaneous determination of lenalidomide, ibrutinib, and its active metabolite PCI45227 in rat plasma. Extraction of lenalidomide, ibrutinib, PCI45227 and tolbutamide (internal standard; IS) from 50 μl rat plasma was carried out by liquid-liquid extraction with ethyl acetate:dichloromethane (90:10) ratio. Chromatographic separation of analytes was performed on YMC pack ODS AM (150 mm × 4.6 mm, 5 μm) column under gradient conditions with acetonitrile:0.1% formic acid buffer as the mobile phases at a flow rate of 1 ml/min. Precursor ion and product ion transition for analytes and IS were monitored on a triple quadrupole mass spectrometer, operated in the selective reaction monitoring with positive ionization mode. Method was validated over a concentration range of 0.72-183.20 ng/ml for ibrutinib, 0.76-194.33 ng/ml for PCI-45227 and 1.87-479.16 ng/ml for lenalidomide. Mean extraction recovery for ibrutinib, PCI-45227, lenalidomide and IS of 75.2%, 84.5%, 97.3% and 92.3% were consistent across low, medium, and high QC levels. Precision and accuracy at low, medium and high quality control levels were less than 15% across analytes. Bench top, wet, freeze-thaw and long term stability was evaluated for all the analytes. The analytical method was applied to support a pharmacokinetic study of simultaneous estimation of lenalidomide, ibrutinib, and its active metabolite PCI-45227 in Wistar rat. Assay reproducibility was demonstrated by re-analysis of 18 incurred samples.

材料
產品編號
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產品描述

Sigma-Aldrich
二氯甲烷, suitable for HPLC, ≥99.8%, contains amylene as stabilizer
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乙酸乙酯, ACS reagent, ≥99.5%
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二氯甲烷, contains 40-150 ppm amylene as stabilizer, ACS reagent, ≥99.5%
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乙酸乙酯, suitable for HPLC, ≥99.7%
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二氯甲烷, HPLC Plus, for HPLC, GC, and residue analysis, ≥99.9%, contains 50-150 ppm amylene as stabilizer
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乙酸乙酯, HPLC Plus, for HPLC, GC, and residue analysis, 99.9%
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乙酸铵, ACS reagent, ≥97%
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乙酸铵, ≥99.99% trace metals basis
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二氯甲烷, puriss. p.a., ACS reagent, reag. ISO, ≥99.9% (GC)
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二氯甲烷, ACS reagent, ≥99.5%, contains 40-150 ppm amylene as stabilizer
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乙酸乙酯, puriss. p.a., ACS reagent, reag. ISO, reag. Ph. Eur., ≥99.5% (GC)
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乙酸乙酯, suitable for HPLC, ≥99.8%
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乙酸铵, for molecular biology, ≥98%
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乙酸铵 溶液, for molecular biology, 7.5 M
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二氯甲烷, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., NF, ≥99% (GC)
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乙酸铵, 99.999% trace metals basis
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二氯甲烷, ACS reagent, ≥99.5%, contains 40-150 ppm amylene as stabilizer
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二氯甲烷, anhydrous, ≥99.8%, contains 40-150 ppm amylene as stabilizer
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二氯甲烷, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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乙酸乙酯
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乙酸乙酯, ≥99%, FCC, FG
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Sigma-Aldrich
乙酸乙酯, anhydrous, 99.8%
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乙酸乙酯, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., BP, NF, ≥99.5% (GC)
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二氯甲烷, biotech. grade, 99.9%, contains 40-150 ppm amylene as stabilizer
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乙酸乙酯, ACS reagent, ≥99.5%
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Sigma-Aldrich
乙酸乙酯, natural, ≥99%, FCC, FG
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乙酸铵, LiChropur, eluent additive for LC-MS
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乙酸乙酯, biotech. grade, ≥99.8%
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二氯甲烷, analytical standard
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乙酸乙酯, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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