RPOLT3-RO

T3 RNA 聚合酶

from Escherichia coli HB101

• 同義詞: mRNA, 聚合酶
• 酶委員會編號: 2.7.7.6 (BRENDA, IUBMB)
• 分類程式碼代碼: 12352204

屬性

• 生物源: Escherichia coli (HB101)
• 品質等級: 100
• 化驗: 100% (SDS-PAGE)
• 形狀: solution
• 比活性: ≥20 U/μL
• 分子量: 100 kDa (single polypeptide chain)
• 包裝: pkg of 1,000 U (11031163001); pkg of 5,000 U (11031171001)
• 製造商／商標名: Roche
• 濃度: <0.1 % (w/w)
• 技術: DNA sequencing: suitable; Northern blotting: suitable; Southern blotting: suitable; hybridization: suitable
• 顏色: colorless
• pH值: 7.9 (39 °F); 8.0 (68 °F)
• 溶解度: water: miscible
• 適合性: suitable for molecular biology
• NCBI登錄號: NP_418414
• UniProt登錄號: P0A8V2
• 應用: genomic analysis; life science and biopharma
• 異物活動: Nicking activity 150 units, none detected; RNases 150 units; endonucleases 150 units, none detected
• 儲存溫度: −20°C
• 基因資訊: Escherichia coli ... rpoB(948488)

描述

一般說明

使用该酶，可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记，或用 [α-³²P]-或[α-³⁵S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。T3 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对其启动子具有高特异性。只有位于 T3 启动子下游的 DNA 才会被转录。

特異性

启动子特异性
T3 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性，仅转录噬菌体 T3 DNA 或克隆到 T3 启动子下游的 DNA。
热失活：通过加入 2 μl 0.2M EDTA（pH8.0）和/或加热至 65℃ 来终止反应。

應用

T3 RNA 聚合酶可以从克隆 DNA 模板（位于 T3 启动子下游）转录 RNA。使标记的 NTP 可以合成高度标记的 RNA。合成的 RNA 可用于许多应用，包括：

• RNA 或 DNA 印迹技术
• 原位杂交
• RNase 保护研究：将酶合成的转录物用作前体 RNA，用于 RNA 剪接和加工的研究。
• 在转录反应期间，通过在 GTP 或 ATP 上过量添加 m7GpppG 或 m7GpppA，在体外合成加帽的 RNA。产生的反义 RNA 可导入细胞中，抑制相应基因的表达。

包裝

1 个试剂盒包含 2 种组分

品質

根据当前的质量控制程序测试不含内切核酸酶、切割活性和 RNA 酶。使用 SP6/T7 转录试剂盒进行功能测试。

規格

体积活性： =20 U/μl
杂交探针的合成：T3 RNA 聚合酶允许高效产生均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针，以及原位杂交。
合适的标记：转录物可以用生物素-16-UTP、DIG-11-UTP 或荧光素-12-UTP 进行非放射性标记。它们还可以用 [a-32P]-或 [a-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。

注意：罗氏拥有 10 倍浓缩的 RNA 标记混合物，专为 DIG-、生物素和荧光素标记而设计。这些混合物适用于 T3 RNA 聚合酶。

單位定義

一个单元是在 +37°C 下，60 分钟内，在酸可沉淀的 RNA 产物中掺入 1 nMol CMP 的酶活性。

体积活性：≥20 U/μl

準備報告

活化剂：BSA/精胺

儲存和穩定性

保存于密闭容器内，置于干燥通风处。

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

僅套裝組件

• T3 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl
• Transcription Buffer 10x concentrated

安全資訊

• 象形圖: GHS07
• 訊號詞: Warning
• 危險聲明: H319
• 防範說明: P264 - P280 - P305 + P351 + P338 - P337 + P313
• 危險分類: Eye Irrit. 2
• 儲存類別代碼: 12 - Non Combustible Liquids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 2
• 閃點（°F）: does not flash
• 閃點（°C）: does not flash