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Roche

DIG RNA标记混合物

sufficient for 20 reactions, solution

同義詞:

核酸标记

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About This Item

分類程式碼代碼:
41105500

形狀

solution

品質等級

用途

sufficient for 20 reactions

包裝

pkg of 40 μL

製造商/商標名

Roche

雜質

Ribonuclease, none detected (up to 20 µl using MSII-RNA)

顏色

colorless

溶解度

water: miscible

儲存溫度

−20°C

一般說明

标记效率:来自1μg 线性模板DNA的约10μg的全长地高辛标记RNA被转录。
检测时间:135分钟
样本材料
线性化质粒DNA:
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6,T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成,质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用;3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化,以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物:
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
通过这种方法,特定长度的DIG标记单链RNA探针通过体外转录被生成。在标准条件下,DIG-11-UTP通过SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大约每20到25个核苷酸的间隔插入转录产物中。DIG RNA标记混合物专门设计用于优化转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记

内含物
10x 溶液带有:
10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.

特異性

热灭活:添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。

應用

利用SP6,T7及T3 RNA聚合酶通过体外转录而使用地高辛-11-UTP进行RNA标记。DIG标记RNA已用于多种杂交技术:
  • Northern blots
  • Southern blots
  • 斑点印迹
  • 菌斑或克隆提升
  • RNase保护实验
  • 染色体, 细胞, 及组织切片原位

特點和優勢

DIG RNA标记混合物专门设计用于来自Roche并配以优化的转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。

品質

经DIG RNA标记试剂盒和DIG核酸检测试剂盒检测的功能。

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

象形圖

Exclamation mark

訊號詞

Warning

危險聲明

危險分類

Acute Tox. 4 Oral

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°F)

does not flash

閃點(°C)

does not flash


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文章

地高辛 (DIG) 標籤方法和試劑盒,適用於 DNA 和 RNA DIG 探針、隨機引物 DNA 標籤、缺口翻譯標籤、5「 和 3」 寡核苷酸末端標籤。

Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.

條款

Determine the labeling efficiency in terms of μg (expected yield of a standard labeling reaction is 20 μg of DIG labeled RNA per μg linearized template DNA after the DIG RNA labeling reaction).

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