跳轉至內容
Merck
全部照片(7)

重要文件

CSA001

Sigma-Aldrich

Rho相关激酶(ROCK)活性测定

This Rho-associated Protein Kinase (ROCK) Activity Assay Kit is an enzyme immunoassay for detection of the active ROCK & DMPK family kinases.

登入查看組織和合約定價


About This Item

分類程式碼代碼:
12161503
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.32
暫時無法取得訂價和供貨情況

物種活性(以同源性預測)

all

製造商/商標名

Chemicon®

技術

activity assay: suitable

檢測方法

colorimetric

運輸包裝

ambient

一般說明

简介:

Rho家族的小GTPase蛋白是细胞行为的几个方面的关键调节因子,例如细胞运动,细胞增殖和凋亡。它们在涉及肌动蛋白细胞骨架和/或微管网络的许多运动反应中起着核心作用,从神经突延伸到吞噬作用和癌细胞侵袭。另外,它们有助于改变导致细胞周期进程或分化细胞反应的基因表达。Rho被细胞外信号(例如溶血磷脂酸(LPA))激活。Rho的作用由下游Rho效应子介导。这些效应子之一是Rho相关的蛋白激酶(ROCK)。已经识别出两种ROCK亚型:ROCK-I(也称为ROKβ)和ROCK-II(也称为Rho激酶和ROKα)。ROCK通过几种底物的磷酸化介导Rho信号传导并重组肌动蛋白细胞骨架,这些底物有助于肌动蛋白丝的组装和收缩。
ROCK通过苏氨酸残基696处肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)的特异性磷酸化使肌球蛋白磷酸酶失活,这导致20 kDa肌球蛋白轻链(MLC20)的磷酸化形式增加。该苏氨酸残基也可以被强直性肌营养不良症蛋白激酶(DMPK)家族激酶磷酸化。

测试原理:
Millipore’s Rho相关蛋白激酶(ROCK)活性测定试剂盒是一种酶免疫测定法,用于检测活性ROCK和DMPK家族激酶。用重组MYPT1预涂板,其中包含Thr696残基,在添加ROCK-1,ROCK-II或DMPK后可能会被磷酸化。然后使用仅特异性检测Thr696磷酸化MYPT1的检测抗体。随后,加入HRP偶联的二次检测抗体。 通过添加生色底物四甲基联苯胺(TMB)来测量磷酸化底物的量,该底物结合HRP从无色溶液转变为蓝色溶液(或在添加终止溶液后转变为黄色)。450 nm处的吸光度信号反映了样品中ROCK活性的相对量。

ROCK测定试剂盒旨在确定纯化的ROCK活性的存在和相对量,以及用于筛选ROCK或DMPK家族激酶的抑制剂或激活剂。

應用

Millipore’s Rho相关蛋白激酶(ROCK)活性测定试剂盒是一种酶免疫测定法,用于检测活性ROCK和DMPK家族激酶。用重组MYPT1预涂板,其中包含Thr696残基,在添加ROCK-1,ROCK-II或DMPK后可能会被磷酸化。然后使用仅特异性检测Thr696磷酸化MYPT1的检测抗体。随后,加入HRP偶联的二次检测抗体。 通过添加生色底物四甲基联苯胺(TMB)来测量磷酸化底物的量,该底物结合HRP从无色溶液转变为蓝色溶液(或在添加终止溶液后转变为黄色)。450 nm处的吸光度信号反映了样品中ROCK活性的相对量。

ROCK测定试剂盒旨在确定纯化的ROCK活性的存在和相对量,以及用于筛选ROCK或DMPK家族激酶的抑制剂或激活剂。它也可用于评估药理剂对ROCK或DMPK家族激酶的效价。

成分

MYPT1预包被96孔多条板:一个预先包被MYPT1

抗磷酸-MYPT1(Thr696)抗体的96孔多条板:一个小瓶包含10 µg抗磷酸-MYPT1(Thr696)抗体

TMB/E底物:一瓶包含12 mL

终止溶液:一瓶包含12 mL

TBS,20X:一瓶包含50 mL 20X TBS

20% Tween® 20(v/v):一瓶包含3 mL

封板机:两个微孔板包含

分析稀释缓冲液I:一个小瓶包含1 mL

ATP(10mM):一个小瓶包含50 µL

MgCl2(1M):一个小瓶包含100 µL

30% BSA:一个小瓶包含1 mL

山羊抗兔IgG HRP二抗:一个小瓶包含30 µL

ROCK抑制剂Y-27632:一个小瓶包含150 µL

活性Rho相关激酶II(ROCK-II):一个小瓶包含10 µg

儲存和穩定性

在标签和手册上规定的温度下储存试剂盒材料;自接收之日起4个月内使用。

法律資訊

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TWEEN is a registered trademark of Croda International PLC

象形圖

CorrosionExclamation mark

訊號詞

Warning

危險聲明

危險分類

Met. Corr. 1 - Skin Sens. 1

儲存類別代碼

8A - Combustible corrosive hazardous materials


分析證明 (COA)

輸入產品批次/批號來搜索 分析證明 (COA)。在產品’s標籤上找到批次和批號,寫有 ‘Lot’或‘Batch’.。

已經擁有該產品?

您可以在文件庫中找到最近購買的產品相關文件。

存取文件庫

Karolien Hollanders et al.
Current eye research, 42(2), 260-272 (2016-07-12)
Diabetic retinopathy (DR) is characterized by an early stage of inflammation and vessel leakage, and an advanced vasoproliferative stage. Also, neurodegeneration might play an important role in disease pathogenesis. The aim of this study was to investigate the effect of
Taslim A Al-Hilal et al.
Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society, 334, 237-247 (2021-04-30)
ROCK, one of the downstream regulators of Rho, controls actomyosin cytoskeleton organization, stress fiber formation, smooth muscle contraction, and cell migration. ROCK plays an important role in the pathologies of cerebral and coronary vasospasm, hypertension, cancer, and arteriosclerosis. Pharmacological-induced systemic
Paolo Armando Gagliardi et al.
The Journal of cell biology, 206(3), 415-434 (2014-08-06)
Directional cell migration is of paramount importance in both physiological and pathological processes, such as development, wound healing, immune response, and cancer invasion. Here, we report that 3-phosphoinositide-dependent kinase 1 (PDK1) regulates epithelial directional migration and invasion by binding and
Aurelie Nguyen Dinh Cat et al.
Scientific reports, 8(1), 2952-2952 (2018-02-15)
Activation of aldosterone/mineralocorticoid receptors (MR) has been implicated in vascular dysfunction of diabetes. Underlying mechanisms are elusive. Therefore, we investigated the role of Rho kinase (ROCK) in aldosterone/MR signaling and vascular dysfunction in a model of diabetes. Diabetic obese mice
Joseph Jude et al.
American journal of respiratory cell and molecular biology, 55(4), 542-553 (2016-05-06)
Formaldehyde, a common indoor air pollutant, exacerbates asthma and synergizes with allergen to induce airway hyperresponsiveness (AHR) in animal models. The mechanisms mediating formaldehyde-induced AHR remain poorly understood. We posit that formaldehyde modulates agonist-induced contractile response of human airway smooth

Questions

Reviews

No rating value

Active Filters

我們的科學家團隊在所有研究領域都有豐富的經驗,包括生命科學、材料科學、化學合成、色譜、分析等.

聯絡技術服務