跳转至内容
Merck
主页蛋白表达感受态细胞选择及大肠杆菌标志物指南

感受态细胞选择及大肠杆菌标志物指南

我们可提供一系列大肠杆菌细菌细胞,通过对每种菌株特异的优化程序,使其成为具有最高效率的感受态细胞。共有24种适用于各种应用的新型感受态细胞可供选用,这些应用包括蛋白质表达、常规或困难的克隆、以及文库的生成。有多种试用规格可供选用。

应用产品编号产品描述转化效率基因型蓝白筛选能力
用于蛋白质表达和DNA质粒产生CMC0001SIG10 化学感受态细胞≥ 1 × 108F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonAY
用于蛋白质表达和DNA质粒产生CMC0002SIG10 F‘化学感受态细胞≥ 5 × 108[F´ pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupGλ tonAY
用于蛋白质表达和DNA质粒产生CMC0003SIG10 HIGH电感受态细胞≥ 5 × 108F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)Y
用于蛋白质表达和DNA质粒产生CMC0004SIG10 MAX电感受态细胞≥ 2 × 1010F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR) Y
用于一般克隆和产生文库CMC0005SIG10 F' MAX电感受态细胞≥ 5 × 108[F´ pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR) Y
用于一般克隆和产生文库CMC0006SIG10 ULTRA电感受态细胞≥ 5 × 108F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR) Y
用于一般克隆和产生文库CMC0007SIG10 5a化学感受态细胞≥ 5 × 108fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80 Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17Y
用于使用不稳定的DNA产生质粒CMC0008STEADY 化学感受态细胞 > 1 × 107recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ– leu mtl-1 F– mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–)N
用于使用不稳定的DNA产生质粒CMC0009STEADY电感受态细胞> 1 × 107recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ– leu mtl-1 F– mcrB mrr hsdS20(rB–, mB–)N
用于制备诱变用的含尿嘧啶的DNACMC0010CHANGER电感受态细胞1 × 109[F’ Tra+ Pil+ (CamR)] ung-1 relA1 dut-1 thi-1 spoT1 mcrAN
用于BAC和粘粒克隆CMC0011XLDNA V2电感受态细胞≥ 5 × 108F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697 galUgalK rpsL nupG (attL araC-PBAD-trfA250 bla attR) λ-Y
用于BAC和粘粒克隆CMC0012XLDNA SIG10 电感受态细胞≥ 5 × 108F - pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)N
用于产生生物素化蛋白质CMC0013BIOTINYLATER F' 电感受态细胞>1 ×1010MC1061 [F´ pro A+B+ lacIqZΔM15::Tn10 (TetR)] araD139 ∆(ara-leu)7696 ∆(lac)l74 galU galK hsdR2(rΚ- mΚ+) mcrB1 rpsL (StrR) birAN
用于蛋白质表达CMC0014BL21(DE3)化学感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)N
用于蛋白质表达CMC0015BL21(DE3) pLysE化学感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)N
用于蛋白质表达CMC0016BL21(DE3) 电感受态细胞≥ 5 x 109F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)N
用于最高蛋白质表达CMC0017OverExpress C41(DE3) 化学感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) N
用于最高蛋白质表达CMC0018OverExpress C41(DE3) pLysS化学感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)N
用于最高蛋白质表达CMC0019OverExpress C43(DE3) 化学感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)N
用于最高蛋白质表达CMC0020OverExpress C43(DE3) pLysS化学感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)N
用于最高蛋白质表达CMC0021OverExpress C41(DE3) 电感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)N
用于最高蛋白质表达CMC0022OverExpress C43(DE3) 电感受态细胞≥ 5 × 108F – ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)N
用于受控的蛋白质表达CMC0023CONTROLLER SIG10 化学感受态细胞 。> 1 × 109mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 ɸ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ (ara,leu)7697 galU galK rpsL (StrR) nupG λ− tonA Mini-F lacIq1 (GentR)N
用于受控的蛋白质表达CMC0024CONTROLLER BL21(DE3) 化学感受态细胞> 1 × 107F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) Mini-F lacIq1(GentR)N
表1.感受态细胞

大肠杆菌标志物
描述
dam甲基化GATC位点的Adam甲基模式用于区分旧的(甲基化的)和新的(未甲基化的)链,以达到损伤修复的目的(修复未甲基化的链)。Dam甲基化也用于计时复制(在两条链都被Dam甲基化之前不要复制)。这种甲基化会干扰几种限制性内切酶,包括BclI和ClaI。
dcm甲基化CCWGG。
dnaJ伴侣蛋白。突变体可以稳定大肠杆菌中的一些蛋白质。
dutdUTP酶,一种通过破坏dUTP防止尿嘧啶掺入DNA的酶。Dut-ung双突变体在其DNA中积累了大量的尿嘧啶。
e14是一种类似于原噬菌体的元素,存在于K-12中,但缺少许多衍生物。e14携带mcrA基因,因此e14-品系是McrA-。
endAend1核酸酶的基因,大肠杆菌的主要内切核酸酶
F是一种自身可传递的质粒(100 kb),赋予生成菌毛(即“雄性”)的能力,从而被雄性特异性噬菌体(如M13)感染。
F'一种从大肠杆菌中选取一些染色体DNA的F质粒。F'可以有自己的基因型。两种流行的模型编码lacβ肽(ΔM15),或LacIQ
hsdRSM是限制系统,将特定序列中的宿主DNA甲基化,并切割未被这样甲基化的DNA。R基因是核酸内切酶,M基因是甲基化酶,S基因是这两种酶发挥功能所必需的酶。因此hsdR突变体不具有核酸内切酶功能,但仍然甲基化。HsdS突变体不具有内切核酸酶或甲基化酶。两种流行的模型是大肠杆菌K的K系统和大肠杆菌B的B系统。
lacIQ过量产生 lacI 基因产物,它是 lac 操纵子的阻遏物。
lacY乳糖通透酶。LacY突变体不能用于蓝/白筛选,但可用于调节IPTG诱导的基因表达中的基因表达。
lacZβ-半乳糖苷酶基因。Δ(lacZ)M15突变表达β片段。这常见于F’元件或缺陷型80φ原噬菌体上。许多质粒表达α片段。两者共同形成功能性β-半乳糖苷酶。
Δlac除了一些侧翼DNA外,还有三种常见的缺失,涉及整个lacZYA操纵子:ΔU169,ΔX111和ΔX74。
Ion是一种负责降解异常蛋白质和关闭sulA功能的蛋白酶。大肠杆菌B天然缺乏lon。
mal BmalB区域包含基因malEFG和malK lamB malM。 Δ (malB) 删除此整个区域的大部分或全部。LamB是λ噬菌体的受体。
mcr A它在某些序列中限制含有甲基胞嘧啶的DNA。当原噬菌体e14丢失时,McrA丢失。
mcr BC该系统在某些序列中限制含有甲基胞嘧啶的DNA。Δ(mcrC-mrr) 删除六个基因:mcrC-mcrB-hsdS-hsdM-hsdR-mrr
mrr是一种甲基胞嘧啶和甲基腺嘌呤限制系统。
recA是大多数同源重组途径所必需的。
recB是ExoV功能所必需的。重组缺陷。
recC是ExoV功能所必需的。
recD是ExoV功能所必需的。RecD突变体可稳定反向重复序列,但会干扰质粒维持。
recF是质粒间同源重组所需的重组基因。
recJ是质粒间同源重组所需的重组基因。
rpoH(或htpR热休克转录因子),是表达一些热休克蛋白酶所必需的。
sbcB是外切核酸酶 I 功能所必需的。携带recB recCsbcB的菌株通常也是sbcC。这些四重突变株有完全重组能力并在λ中繁殖反向重复序列,但质粒复制异常。
sbcC帮助(用sbcB)抑制recBC突变体的作用。sbcC突变体是Rec+,在质粒中稳定地增殖反向重复。
supE(或glnV),突变体 tRNA在UAG密码子处插入谷氨酰胺,抑制阅读框中的UAG突变。SupE是一些噬菌体突变体裂解生长所必需的。
supF(或tyrT),突变体 tRNA在UAG密码子处插入酪氨酸,从而抑制UAG突变在阅读框中的作用。这种突变是一些λ噬菌体(如λgt11)裂解生长所必需的。
traD缀合F质粒的缺陷突变体。
ung是尿嘧啶N-糖基化酶中的突变体,尿嘧啶N-糖基化酶是一种从DNA中去除尿嘧啶的酶。ung突变体使尿嘧啶在DNA中持续存在。
φ80dlacΔM15对Φ80的一种有缺陷的原噬菌体衍生物具有溶原性。lacZ ΔM15等位基因为蓝白筛选提供β肽。
表2.大肠杆菌标志物指南
登录以继续。

如要继续阅读,请登录或创建帐户。

暂无帐户?