临床和法医学检测

临床检测是提供重要临床信息的关键，并会对人类医疗决策造成影响。临床检测实验室主要采用体外诊断检测（IVD）或实验室开发检测（LDT）等诊断试剂。 他们使用这些试剂来测定各种人类样本中的各类分析物，并提供重要的诊断信息。另外，临床实验室也会进行治疗性药物筛查和监测以及药物滥用鉴定。法医学检测通常在司法系统的要求下进行，它属于调查和法律程序的一部分。

其主要检测模式包括：ELSA和免疫组化（IHC）等免疫测定技术，PCR、qPCR和测序等分子诊断技术以及液相色谱质谱联用（LC-MS）等分析化学技术。

LC-MS工作流程从样本收集开始，并可能在样本分离、检测和定量步骤之前包含一步样本制备过程。样本制备可能包括酶处理、基于过滤的样本纯化、富集或其他纯化步骤。样本分离发生在液相色谱（LC）环节，随后将通过质谱（MS）进行分析物的检测和定量。在该过程中，对仪器进行校准并根据相关标准对分析物进行参比非常关键。认证参考物质和分析标准品在LC-MS工作流程中扮演了重要的角色。

LC-MS检测常用于多种应用，包括：

• 治疗性药物监测
• 药物滥用检测
• 代谢分析
• 激素检测
• 维生素检测
• 新生儿筛查

每个步骤所用材料示例：

• 样本采集和制备
  • 过滤设备
  • 分析试剂瓶
  • 酶 - β-葡萄糖醛酸酶
  • 固相萃取（SPE）吸头、平板和柱
  • 固相微萃取（SPME）吸头、平板和柱
• 样本制备
  • HPLC柱和附件
  • HPLC溶剂
  • 色谱试剂
• 样本检测和定量
  • 认证参考物质(CRM)
  • 分析标准品

PCR工作流程从样本收集开始，并可能在DNA/RNA靶向特异性扩增步骤之前还包含一个纯化步骤。在qPCR中，定量是在扩增循环过程中实时发生的。因其实时（RT）的特点，qPCR有时也被成为RT-PCR。另一种类型的PCR是终点法PCR，其结果在扩增循环结束后进行确定。

PCR检测适用于任何需要对DNA或RNA的存在、长度或序列进行检测的情况，包括：

• 传染病筛查和鉴定
• 遗传学筛选
• 肿瘤学
• 产前诊断

PCR的主要组成包括：

• 样本纯化
  • 核酸纯化（NAP）试剂盒和试剂
• 样本扩增
  • 寡核苷酸、引物、探针
  • DNA扩增酶（如Taq）
  • 逆转录（RT）酶
  • PCR扩增试剂，包括缓冲液、盐和核苷酸（dNTP）

酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种广泛使用的免疫测定技术，可实现对抗体、蛋白质和肽等小分子的高通量筛选和定量。

ELISA适用于众多检测应用，包括：

• 肿瘤学
• 传染性疾病
• 药物滥用筛查
• 激素检测
• 免疫功能/免疫学研究

ELISA通常以孔板形式进行，其中以96孔板最为常见。这些孔板可以即用型（用于IVD）形式提供，或者也可在内部开发（LDT）。用于构成夹心式ELISA平板的常用产品包括：

• 酶标板
• 捕获抗体
• 包被试剂（如BSA、酪蛋白等）
• 洗涤缓冲液

在平板完成制备后，用于下一步的常用材料包括：

• 样本制备
  • 裂解试剂
  • 缓冲液
  • 去污剂
  • 蛋白酶抑制剂
• 样本结合/洗涤
  • 缓冲液（如PBS、PBS-T）
• 检测方法
  • 检测一抗 – 特异性于目标分析物
  • 标记/偶联的二抗，如标记了碱性磷酸酶（AP）或辣根过氧化物酶（HRP）
  • 标记抗体检测试剂，如TMB、OPD、pNPP和过氧化氢
  • 终止试剂