过滤法样品制备
过滤是一种分离技术,可根据物理或化学性质浓缩或纯化物质。这是被许多实验室采用的一种简单常规方法,可用于从溶液中去除不溶颗粒,准备分析样品。过滤可用于减少样品的复杂成分、提高粘性样品澄清度并减少背景信号,从而提高分析检测信噪比。
根据采取的不同过滤方法,可基于各自的性质(例如大小、形状或电荷)分离颗粒物或分子。通过过滤器的液体称为“滤液”,收集或截留的物质称为“截留物”或“残留物”。
- 反渗透(离子分离)技术使用半透膜或半透屏障对离子或分子进行分离。在高于渗透压的压力作用下,溶剂从高溶质浓度区域渗透到低溶质浓度区域。从而能够截留颗粒物和大部分的有机物质,以及99%以上的盐类物质。反渗透膜的截留率根据对氯化钠的截留量进行衡量(典型值为<0.001 µm, <100 Daltons)
- 超滤(大分子分离)技术根据粒径从液体中分离出颗粒物和溶解分子。超滤技术常用于浓缩、分馏、脱盐和缓冲液置换。其性能以标称分子量限值 (NMWL) 进行衡量,典型值在1-1000 kDa之间。
- 微孔过滤(微滤)技术能够根据粒径对颗粒和细菌、细胞等生物体进行分离和去除,常用于颗粒截留/过滤以及灭菌。微孔孔径大小通常在0.025-10 µm之间,并且以标称值(~98%截留度)或绝对值(尺寸等于孔径大小典型值时的100%截留度)进行衡量。
- 澄清过滤器能够根据粒径对大型颗粒、聚集体和残渣进行截留和过滤,常于预过滤和颗粒分析。可以作为微滤前的预过滤。 澄清过滤器的孔径通常大于5 µm。截留。
相关技术文章
- Syringe filter selection guide for HPLC, UHPLC, and Ion Chromatography using pore size, filter diameter, chemical compatibility, analyte binding, and extractables.
- 纳米颗粒纯化和生产中过滤方法和滤膜的选择。
- Filtration is used in dissolution testing to end the dissolution process and prepare the sample for HPLC analysis. This page discusses the importance of filtration and utility of hydrophilic PTFE Millex® syringe filters in dissolution testing.
- 使用 Amicon® Ultra 离心超滤管浓缩病毒,制备高滴度病毒原液并从样品中分离病毒。
- 针头式膜滤器选择和验证方法,用于评估制药质量控制 (QC) 测试中由于膜滤器吸附而造成的分析物损失。
- 查看完整内容 (26)
相关实验方案
- B族维生素具有很强的亲水性,因此在反相条件下采用低浓度甲醇和酸性流动相的梯度进行洗脱。
- 生物标志物在药物发现和开发中起关键作用,
- 免疫球蛋白纯化方案通常包括与Protein A或Protein G层析介质的亲和吸附、未吸附蛋白洗涤以及低pH缓冲液洗脱。
- HPLC Analysis of Polyphenols in Nero d'Avola Red Wine on Discovery® HS C18 (UV 280 nm)
- Millicup™-FLEX disposable vacuum filter was designed to reduce contamination and save time. The solvent-resistant unit allows for filtration into storage bottles.
- 查看完整内容 (16)
查找更多文章和实验方案
常见的过滤应用
- 一般颗粒物去除
- 分析技术应用(如HPLC、UHPLC、离子色谱、气相色谱和溶出度试验)样品制备
- 细胞培养添加剂灭菌
- 蛋白质、核酸和聚合物浓缩
- 样品生物分子分离
- 缓冲液制备
- 纯水
在进行灵敏的色谱分析(如HPLC和LC-MS)之前,过滤是必不可少的样品制备步骤。样品中的颗粒物可能堵塞色谱柱或色谱柱头,或在色谱图上产生污染峰(“鬼峰”),从而干扰液相色谱、气相色谱和离子色谱分析。正确过滤样品、溶剂和缓冲液有助于生成更高质量、更一致的分析结果。此外,这一处理还可延长仪器的正常运行时间,延长色谱柱寿命。
过滤工艺类型和操作步骤
现有多种不同过滤介质成分的过滤器,各自专为特定应用而设计。过滤器选择取决于几个因素,包括:
- 需要滤出或滤过的粒子或分子大小
- 样品的化学组分
- 过滤介质与样品或溶液的相容性
- 样品粘度
过滤器可由不同类型的材料制成,如纸、布、棉绒、石棉、矿棉或玻璃棉、素陶、砂石或其他多孔材料。膜滤器通常由合成聚合物制成(例如,亲水化PTFE、PVDF、尼龙、PES)。
可施加不同作用力加速过滤。还可利用过滤器和漏斗的自重(在针头过滤时手动进行)或通过离心力加速过滤。在负压过滤过程中,会利用真空泵经过滤器快速抽出流体。
登录以继续。
如要继续阅读,请登录或创建帐户。
暂无帐户?