蛋白亚单位疫苗生产
蛋白亚单位疫苗工艺流程
蛋白亚单位疫苗使用纯化的重组病毒蛋白片段作为抗原,刺激免疫系统产生保护免疫。由于病毒蛋白片段无法引起感染,因此基于重组蛋白的疫苗公认比减毒或灭活活病毒更安全。然而,蛋白质疫苗产生的免疫反应可能比其他疫苗类型产生的免疫反应弱,因此可能需要使用佐剂。亚单位重组蛋白可以使用多种方法获得,包括微生物发酵、哺乳动物细胞和昆虫细胞。随后需要借助强大的下游工艺去除任何杂质和污染物,然后进行最终的无菌过滤和灌装。
优化上游生产力
虽然有不同的平台可用于重组蛋白亚单位疫苗上游生产,但必须优化所选方法,方可实现生产目标,确保可重现和放大。
中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞易于转染且蛋白产量高,是重组蛋白生产的首选。也可选用昆虫细胞生产重组蛋白——相对于哺乳动物细胞,更具性价比、可放大且要求更低。
最大限度提高下游回收率和杂质去除率
下游纯化需要捕获和浓缩疫苗抗原并去除工艺/产品相关的杂质,本质上具有挑战性且成本高昂。在生产过程中,亚单位重组蛋白特别难以与副产物(例如截短形式)分离。因此,必须通过一系列下游解决方案优化工艺,最大限度提高回收率。
通过无菌过滤、配制和最终填充确保患者的安全
为了确保患者的安全,充足蛋白亚单位产品必须采用0.22 µm过滤器进行无菌过滤。可使用一次性用品进行疫苗配制;含有制剂试剂的一次性袋可通过无菌快速接头连接任何混合仪。在完成配制后,可将疫苗无菌转移至一次性灌装系统,用于最终的灌装和分瓶。
将质量融入整体工艺
通过部署用于数据收集、监控和分析的软件,并将工艺分析技术 (PAT) 集成到生产工作流程,可以带来更好的工艺透明度、敏捷性、灵活性,更有质量保障。拉曼光谱用作PAT的众多工具之一,它可持续监测样品的分子组分,揭示关键工艺参数 (CPP) 和关键质量属性 (CQA)。
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澄清
澄清
澄清用于将重组蛋白与一系列杂质分离,为下游工艺准备原料流,需要用到pDADMAC 10% 溶液,以及Millistak+® Po一次性深层过滤器系统、Millistak+® HC Pro Pod深层过滤器或Clarisolve® Pod一次性深层过滤器等全新改良的深层过滤器
下游 - 切向流过滤
切向流过滤有助于确保高产量、工艺效率和重组蛋白亚单位回收率,同时有助于去除杂质。我们的产品组合包括用于超滤/洗滤/用Pellicon® 2盒式超滤膜包、超滤/洗滤/用Pellicon® 3盒式盒式超滤膜包以及超滤/洗滤/用Pellicon®盒式超滤膜包,以及Mobius® TFF 80一次性系统
下游——层析和病毒清除
使用Mobius® FlexReady色谱解决方案和色谱树脂进行下游纯化,以捕获和/或精制色谱,并使用层析膜进行精制。浓缩重组疫苗抗原,分离非必要的杂质和污染物,并使用Viresolve® Pro解决方案或Mobius® FlexReady大规模病毒过滤解决方案确保病毒清除,是该工艺的重要组成部分。
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制成品无菌过滤和灌装
使用Millipak® Final Fill灌装过滤器、Mobius®一次性混合溶液、Mobius® 2D和 3D 组件和存储系统以及Novaseptum® Go无菌采样解决方案进行可靠、稳健的蛋白亚单位疫苗无菌过滤、配制和制成品灌装,对于确保患者安全至关重要
分析软件和PAT技术
工艺分析技术(PAT)和Bio4C ProcessPad™数据分析软件和Bio4C Orchestrator™自动化软件可通过在线实时监控工艺,提高蛋白质亚单位疫苗生产工艺质量。
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