Przejdź do zawartości
Merck

Analiza multipleksowa autoprzeciwciał

Wykrywanie autoprzeciwciał ma kluczowe znaczenie w różnych obszarach badawczych, takich jak badania nad cytokinami, badania nad chorobami zakaźnymi, badania nad chorobami autoimmunologicznymi i badania nad rakiem. Analiza multipleksowa autoprzeciwciał, taka jak testy multipleksowe MILLIPLEX®, pomaga rozwijać te badania poprzez wykrywanie wielu analitów jednocześnie, aby zapewnić badaczom pełny profil autoprzeciwciał.

Co to są autoprzeciwciała?

Autoprzeciwciała to przeciwciała, które reagują z substancjami/antygenami, które są wytwarzane samodzielnie. Dzieje się tak, gdy organizm nie jest w stanie odróżnić własnych antygenów od antygenów inwazyjnych. Te autoprzeciwciała prowadzą do stanu zapalnego i niszczenia tkanek i narządów. Są one często związane z zaburzeniami autoimmunologicznymi, ale można je również znaleźć w innych chorobach.

Przykłady autoprzeciwciał obejmują:

  • Autoprzeciwciała cytokinowe
  • Autoprzeciwciała autoimmunologiczne
  • Autoprzeciwciała nowotworowe

Multipleksowanie autoprzeciwciał

Multipleksowa analiza autoprzeciwciał pomaga badaczom zaoszczędzić czas w laboratorium poprzez pomiar wielu autoprzeciwciał w jednej próbce. Dzięki wysokiej jakości multipleksowaniu, takim jak panele multipleksowe MILLIPLEX® wykorzystujące platformę Luminex®, badacze mają możliwość analizowania różnych autoprzeciwciał, a także elastyczność wyboru analitów, które chcą oznaczyć. Rysunek 1 przedstawia metodę antygenu wychwytującego, którą wykorzystują te testy.

Zestawy autoprzeciwciał MILLIPLEX® służą do jakościowego pomiaru autoprzeciwciał w próbkach surowicy i osocza. Każdy zestaw zawiera cztery kulki kontrolne do zmieszania z wybranymi kulkami unieruchomionymi antygenem oraz koniugat PE-Ig jako składnik wykrywający.

Przedstawienie metody testu panelowego autoprzeciwciał MILLIPLEX®. Jest to metoda wychwytu antygenu z kulką magnetyczną Luminex®, antygenem wychwytującym, autoprzeciwciałem IgG (analitem) i koniugatem fikoerytryna-anty-ludzkie IgG.


Rysunek 1.
Przedstawienie testu panelu autoprzeciwciał MILLIPLEX®. Reprezentuje to metodę antygenu wychwytującego.

Pomiar autoprzeciwciał cytokinowych

Pomiar autoprzeciwciał cytokinowych może być przydatny w badaniach nad chorobami, ponieważ przeciwciała antycytokinowe występują często i są obecne w próbkach zdrowych i pacjentów z różnymi infekcjami, nabytym niedoborem odporności lub chorobami autoimmunologicznymi. Cytokiny zapewniające ochronę przed drobnoustrojami mogą być celem autoprzeciwciał cytokinowych, prowadząc do zagrażających życiu infekcji. Pomiar autoprzeciwciał cytokinowych może być przydatny w badaniach nad monitorowaniem choroby i skutecznością leczenia.

Analiza multipleksowa autoprzeciwciał cytokinowych

Dzięki analizie multipleksowej autoprzeciwciał cytokinowych można zmierzyć więcej biomarkerów w jednej próbce. Nasz MILLIPLEX® Human Cytokine Autoantibody Panel zawiera kulki pokryte antygenem do jednoczesnego wykrywania 15 autoprzeciwciał w próbkach surowicy lub osocza. W zestawie podstawowym znajdują się cztery kulki kontrolne, a użytkownik może wybrać autoprzeciwciała cytokinowe, które chce oznaczyć w ramach eksperymentu. Rysunek 2 przedstawia przykładowe dane dotyczące stosowania tego panelu w próbkach chorób autoimmunologicznych i sepsy w porównaniu z próbkami zdrowymi.

Wykres przedstawiający dane dla analizy anty-TNFα, anty-IL-8, anty-IL-18 i anty-IL-15. Przy użyciu MILLIPLEX® Human Cytokine Autoantibody Panel nr kat. HCYTAAB-17K, określono wartości MFI (Median Fluorescence Intensity) biomarkerów autoprzeciwciał cytokinowych w chorobach autoimmunologicznych, w tym toczniu rumieniowatym układowym (SLE) i reumatoidalnym zapaleniu stawów (RA) (n=19), sepsie (n=17) i zdrowych (n=9) próbkach surowicy (rozcieńczonych 1:100). Przedstawiono dane z 4 wybranych analitów w zestawie.
Wykres przedstawiający dane dla analizy anty-TNFα, anty-IL-8, anty-IL-18 i anty-IL-15. Przy użyciu MILLIPLEX® Human Cytokine Autoantibody Panel nr kat. HCYTAAB-17K, określono wartości MFI (Median Fluorescence Intensity) biomarkerów autoprzeciwciał cytokinowych w chorobach autoimmunologicznych, w tym toczniu rumieniowatym układowym (SLE) i reumatoidalnym zapaleniu stawów (RA) (n=19), sepsie (n=17) i zdrowych (n=9) próbkach surowicy (rozcieńczonych 1:100). Przedstawiono dane z 4 wybranych analitów w zestawie.

Rysunek 2.Korzystając z numeru produktu HCYTAAB-17K, określono wartości MFI (mediana intensywności fluorescencji) biomarkerów autoprzeciwciał cytokinowych w chorobach autoimmunologicznych, w tym toczniu rumieniowatym układowym (SLE) i reumatoidalnym zapaleniu stawów (RA) (n=19), sepsie (n=17) i zdrowych (n=9) próbkach surowicy (rozcieńczonych 1:100). Przedstawiono dane z 4 wybranych analitów w zestawie.


Autoimmunologiczna analiza autoprzeciwciał

Tworzenie autoprzeciwciał jest głównym czynnikiem patogenezy wielu chorób autoimmunologicznych. Rozregulowana apoptoza i późniejszy wadliwy klirens resztek komórkowych prowadzą do ekspozycji autoantygenów i generowania autoprzeciwciał. Obecność autoprzeciwciał może wskazywać na aktywność choroby, rokowanie i powiązania kliniczne związane z różnymi chorobami autoimmunologicznymi, w tym toczniem rumieniowatym układowym (SLE), zespołem Sjögrena, twardziną układową, zapaleniem wielomięśniowym (PM)/zapaleniem skórno-mięśniowym i różnymi zespołami nakładania się tych chorób. Tabela 1 opisuje autoprzeciwciała autoimmunologiczne i ich powiązania chorobowe.


Tabela 1.
Autoprzeciwciała autoimmunologiczne i ich powiązania z chorobami. Skróty: MCTD - mieszana choroba tkanki łącznej, SCLE - podostry skórny toczeń rumieniowaty, LE - toczeń rumieniowaty, CNS - ośrodkowy układ nerwowy, CREST - kalcynoza, zjawisko Raynauda, dysmotyczność przełyku, sklerodaktylia i teleangiektazja.

Autoimmunologiczna analiza autoprzeciwciał typu multipleks

Panel MILLIPLEX® Human Autoimmune Autoantibody Panel zawiera 20 antygenów do wykrywania w próbkach surowicy lub osocza. Autoprzeciwciała te obejmują:

  • β2-Glikoproteina
  • C1q
  • CENP-A (białko centromerowe A)
  • CENP-B (białko centromerowe B)
  • Jo-1
  • Ku
  • Mi-2
  • Myeloperoxidase (MPO)
  • PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen A)
  • PL-12 (Syntetaza alanylo-tRNA)
  • PM/Scl 100
  • Proteinaza 3<
  • Ribosomalna P
  • RNP (rybonukleoproteina)
  • RNP/Smith (RNP/Sm)
  • Scl-70<
  • Smith (Sm)
  • SSA/Ro52 (antygen A/Ro52 kDa związany z zespołem Sjögrena)
  • SSA/Ro60 (antygen A/Ro60 związany z zespołem Sjögrena A/Ro60 kDa)
  • SSB/La (Sjögren's Syndrome-related antigen B/La)

Rysunek 3 przedstawia porównanie próbek chorobowych i prawidłowych przy użyciu tego panelu.

Wykres przedstawiający dane do analizy autoprzeciwciał autoimmunologicznych. Przy użyciu panelu ludzkich autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX® nr kat. HAIAB-10K, określono medianę intensywności fluorescencji (MFI) dla 19 próbek chorobowych - 10 tocznia rumieniowatego układowego, 7 ziarniniakowatości z zapaleniem naczyń i 2 zapalenia wielomięśniowego oraz 10 próbek prawidłowych. Próbki chorobowe były znacznie wyższe dla 14 z 20 analitów w tym panelu.

Rysunek 3.Korzystając z numeru produktu HAIAB-10K, określono medianę intensywności fluorescencji (MFI) dla 19 próbek chorobowych - 10 tocznia rumieniowatego układowego, 7 ziarniniakowatości z zapaleniem naczyń i 2 zapalenia wielomięśniowego oraz 10 próbek prawidłowych. Próbki chorobowe były znacznie wyższe dla 14 z 20 analitów w tym panelu.

Rysunek 4 przedstawia wartości MFI autoprzeciwciał w porównaniu z danymi laboratorium klinicznego, pokazując, że panel ten wykazywał podobne tendencje do tych mierzonych przez laboratorium komercyjne.

Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX® MFI w odniesieniu do komercyjnych wyników laboratoryjnych. Kliniczne dane laboratoryjne były dostępne dla 6 autoprzeciwciał (SSA/Ro60, SSA/Ro52, SSB/La, RNP, Sm i Scl-70) u 8 pacjentów z tru. Pacjenci z SLE z wynikiem dodatnim na podstawie klinicznych metod laboratoryjnych wykazali również podwyższony MFI w panelu autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX®. Pacjenci ze SLE uznani za negatywnych za pomocą tych samych klinicznych metod laboratoryjnych wykazywali niższy MFI.

Rysunek 4.Kliniczne dane laboratoryjne były dostępne dla 6 autoprzeciwciał (SSA/Ro60, SSA/Ro52, SSB/La, RNP, Sm i Scl-70) u 8 pacjentów z tru. Pacjenci z SLE z wynikiem dodatnim na podstawie klinicznych metod laboratoryjnych wykazali również podwyższony MFI w panelu autoprzeciwciał autoimmunologicznych. Pacjenci z tru uznani za negatywnych przy użyciu tych samych klinicznych metod laboratoryjnych wykazywali niższy MFI.

Rysunek 5 opisuje analizę surowicy referencyjnej za pomocą tego panelu.

Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał autoimmunologicznych. Surowice referencyjne były dostępne do oceny 10 autoprzeciwciał w panelu ludzkich autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX®. Kontrole wykazywały podwyższone MFI dla autoprzeciwciał, dla których spodziewano się silnej reakcji.
Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał autoimmunologicznych. Surowice referencyjne były dostępne do oceny 10 autoprzeciwciał w panelu ludzkich autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX®. Kontrole wykazywały podwyższony MFI dla autoprzeciwciał, dla których spodziewano się silnej reakcji.
Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał autoimmunologicznych. Surowice referencyjne były dostępne do oceny 10 autoprzeciwciał w panelu ludzkich autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX®. Kontrole wykazywały podwyższony MFI dla autoprzeciwciał, dla których spodziewano się silnej reakcji.

Rysunek 5.Surowice referencyjne były dostępne do oceny 10 autoprzeciwciał w panelu ludzkich autoprzeciwciał autoimmunologicznych MILLIPLEX®. Kontrole wykazywały podwyższony MFI dla autoprzeciwciał, dla których spodziewano się silnej reakcji.

Pokazuje to wartość stosowania technologii multipleksowej do oceny wielu autoprzeciwciał, umożliwiając uzyskanie szerokiego profilu autoprzeciwciał do oceny próbek z różnych chorób autoimmunologicznych.


Wykrywanie autoprzeciwciał nowotworowych

Autoprzeciwciała nowotworowe do antygenów związanych z nowotworem są badane jako potencjalne biomarkery nowotworowe, a także możliwe wskaźniki wczesnej kancerogenezy i wskaźniki rokowania raka. Prowadzone są badania w celu znalezienia dokładnych, wiarygodnych i niedrogich testów krwi, które są potrzebne do wczesnego wykrywania raka.

Analiza multipleksowa autoprzeciwciał nowotworowych

A MILLIPLEX Human Cancer Autoantibody Panel zawiera kulki pokryte antygenem nowotworowym do jednoczesnego wykrywania 15 autoprzeciwciał w próbkach surowicy lub osocza. Oferuje możliwość wyboru autoprzeciwciał nowotworowych potrzebnych do eksperymentu. Rysunek 6 pokazuje porównanie między próbkami nowotworowymi i normalnymi przy użyciu tego panelu.

Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał nowotworowych. Przy użyciu panelu ludzkich autoprzeciwciał nowotworowych MILLIPLEX® nr kat. HCABMAG-13K, określono wartości MFI (mediana intensywności fluorescencji) biomarkerów autoprzeciwciał nowotworowych w próbkach surowicy raka (piersi, jelita grubego, jajnika, płuc, prostaty) (n=78) i zdrowej kontroli (n=18) (próbki rozcieńczone w stosunku 1:100).
Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał nowotworowych. Przy użyciu panelu ludzkich autoprzeciwciał nowotworowych MILLIPLEX® nr kat. HCABMAG-13K, określono wartości MFI (mediana intensywności fluorescencji) biomarkerów autoprzeciwciał nowotworowych w próbkach surowicy raka (piersi, jelita grubego, jajnika, płuc, prostaty) (n=78) i zdrowej kontroli (n=18) (próbki rozcieńczone w stosunku 1:100).
Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał nowotworowych. Przy użyciu panelu ludzkich autoprzeciwciał nowotworowych MILLIPLEX® nr kat. HCABMAG-13K, określono wartości MFI (mediana intensywności fluorescencji) biomarkerów autoprzeciwciał nowotworowych w próbkach surowicy raka (piersi, jelita grubego, jajnika, płuc, prostaty) (n=78) i zdrowej kontroli (n=18) (próbki rozcieńczone w stosunku 1:100).
Wykres przedstawiający dane dotyczące analizy autoprzeciwciał nowotworowych. Przy użyciu panelu ludzkich autoprzeciwciał nowotworowych MILLIPLEX® nr kat. HCABMAG-13K, określono wartości MFI (Median Fluorescence Intensity) biomarkerów autoprzeciwciał nowotworowych w próbkach surowicy raka (piersi, jelita grubego, jajnika, płuc, prostaty) (n=78) i zdrowej kontroli (n=18) (próbki rozcieńczone w stosunku 1:100).

Rysunek 6.Używając numeru produktu HCABMAG-13K, określono wartości MFI (Median Fluorescence Intensity) biomarkerów autoprzeciwciał nowotworowych w próbkach surowicy raka (piersi, jelita grubego, jajnika, płuc, prostaty) (n=78) i zdrowej kontroli (n=18) (próbki rozcieńczone w stosunku 1:100).

Rysunek 7 opisuje reaktywność seryjnie rozcieńczonych próbek autoprzeciwciał nowotworowych w surowicy.

Wykres przedstawiający dane dotyczące reaktywności seryjnie rozcieńczonych próbek autoprzeciwciał nowotworowych w surowicy. Test multipleksowy autoprzeciwciał nowotworowych MILLIPLEX® jest niezawodny i wymaga mniej niż 5 µL próbek surowicy ludzkiej, ponieważ surowice były testowane w rozcieńczeniu 1:100. Uwaga: pokazano dwanaście z piętnastu analitów.

Rysunek 7.Test multipleksowy autoprzeciwciał nowotworowych jest niezawodny i wymaga mniej niż 5 µL próbek surowicy ludzkiej, ponieważ surowice były testowane w rozcieńczeniu 1:100. Uwaga: pokazano dwanaście z piętnastu analitów.

Ten ludzki test multipleksowy autoprzeciwciał nowotworowych może być stosowany samodzielnie lub w połączeniu z innymi panelami krążących biomarkerów nowotworowych MILLIPLEX®, jako przydatne narzędzia do badań przesiewowych biomarkerów we wczesnym wykrywaniu raka.


Powiązane produkty

Zapoznaj się z naszymi zestawami ludzkich autoprzeciwciał MILLIPLEX® przy użyciu technologii Luminex® xMAP®. Wybierz dowolne lub wszystkie anality w każdym panelu, aby określić ilościowo swoje biomarkery.

Loading

Tylko do użytku badawczego. Nie do użytku w procedurach diagnostycznych.

Inne produkty MILLIPLEX®

Zaloguj się, aby kontynuować

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

Nie masz konta użytkownika?