DCAS9P300VP

Sigma CRISPR dCAS9-p300V Activator Lenti Plasmid

• Kod UNSPSC: 12352200
• NACRES: NE.02

Właściwości

• rekombinowane: expressed in E. coli
• Poziom jakości: 200
• Formularz: liquid
• opakowanie: vial of 50 μL
• stężenie: 20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
• Zastosowanie: CRISPR
• Warunki transportu: dry ice
• temp. przechowywania: −20°C

Opis

Opis ogólny

Ten system aktywacji genów opiera się na fuzji nieaktywnego Cas9 (dCas9) z katalityczną domeną rdzenia acetylotransferazy histonowej (HAT) ludzkiego białka p300 związanego z E1A. Plazmidy lenti aktywatora dCas9-p300 wykorzystują promotor EF1 alfa do silnej ekspresji dCas9-P300 i blastycydyny połączonej peptydem 2A (EF1a-dCas9-P300-2A-Blasticidin), co pozwala na łatwą selekcję po udanej transfekcji lub transdukcji. Użyj plazmidu lentiwirusowego dCas9-P300 firmy Sigma do generowania cząstek lentiwirusowych i wydajnej produkcji stabilnych linii komórkowych wyrażających dCas9-P300 do aktywacji genów opartych na CRISPR. Plazmid lenti dCas9-P300 jest jedną z części dwuczęściowego systemu CRISPR z indywidualnymi wektorami ekspresji dCas9-P300 i gRNA.

Aby zamówić gRNA w dowolnym formacie kliknij tutaj.

Zastosowanie

• Genomika funkcjonalna / walidacja celu
• Modyfikacja epigenetyczna
• Aktywacja transkrypcji
• Produkcja cząstek lentiwirusowych wyrażających dCas9-P300

Cechy i korzyści

Plazmid Sigma CRISPR dCas9p300V współeksprymuje p300-HAT i blastycydynę, umożliwiając opartą na blastycydynie selekcję komórek wyrażających dCas9p300. gRNA może z powodzeniem kierować pozbawionym nukleazy Cas9 (dCas9) połączonym z domeną katalityczną p300 HAT w celu zwiększenia poziomu acetylacji histonów i endogennej ekspresji genów. Podejście dCas9-p300 do acetylacji histonów reprezentuje odmienny mechanizm działania w stosunku do dCas9-VP64 lub innych podobnych motywów aktywacji genów.

Zasada

Systemy CRISPR/Cas są wykorzystywane przez bakterie i archeony do obrony przed inwazją wirusów i plazmidów. Niedawno system CRISPR/Cas typu II z bakterii Streptococcus pyogenes został zaprojektowany do funkcjonowania w systemach eukariotycznych przy użyciu dwóch składników molekularnych: pojedynczego białka Cas9 i niekodującego RNA prowadzącego (gRNA). Mutacje w domenach katalitycznych, RuvC i HnH, czynią go nieaktywnym jako nukleaza, ale nadal pozwalają na zaprogramowanie białka do celowania w określone sekwencje DNA za pomocą pojedynczego gRNA. Fuzja dCas9 z katalityczną domeną rdzeniową acetylotransferazy histonowej (HAT) ludzkiego białka p300 związanego z E1A indukuje transkrypcję poprzez uwalnianie DNA ze stanu heterochromatyny, umożliwiając ciągłą i silną ekspresję genów przez endogenną maszynerię komórkową. Aktywator genów dCas9-p300 CRISPR reprezentuje odmienny mechanizm działania w stosunku do dCas9-VP64 lub innych podobnych motywów aktywacji genów.

Informacje prawne

Umowa licencyjna na użytkowanieCRISPR

Lentiviral, WPRE, and Evrogen Fluorophore License

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 10 - Combustible liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable