SRE0015

Salzabhängige Nuklease (SAN)

recombinant, expressed in Pichia pastoris

• Synonym(e): Endonucelase, Salt active endonuclease
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: fermentation/recombinant
• Qualitätsniveau: 200
• Rekombinant: expressed in Pichia pastoris
• Form: buffered aqueous glycerol solution
• Spezifische Aktivität: ≥250000 U/mg
• Methode(n): DNA extraction: suitable
• Eignung: suitable for nucleic acid purification
• Anwendung(en): cell analysis
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

Salzabhängige Nuklease wird verwendet, um während der Proteinexpression und -aufreinigung DNA zu entfernen.

Biochem./physiol. Wirkung

Salzabhängige Nuklease (SAN) ist eine allgemeine, unspezifische Endonuklease, die doppel- und einsträngige DNA und RNA spaltet. SAN ist bei einem pH-Wert über der Neutralität aktiv. Anders als andere Nukleasen weist sie jedoch optimale Aktivität bei hohen Salzkonzentrationen und hohen pH-Werten auf. Dank dieser Eigenschaften ist SAN ideal geeignet, DNA aus Zellextrakten und Proteinproben zu entfernen. Die Endprodukte des vollständigen DNA-Abbaus bestehen hauptsächlich aus 5 Oligonukleotiden
. Das Enzym baut DNA und RNA in einem Verhältnis von 10:1 ab.

SAN ist im Temperaturbereich 10–40 °C hochaktiv. Die optimale NaCl-Konzentration für die Aktivität ist 0,5 M. Allerdings ist SAN auch in Puffern mit geringem Salzgehalt aktiv.1 M NaCl wird nicht für die Anwendung von SAN empfohlen. Mg2+ (>1 mM) ist für die Aktivität erforderlich. Der pH-Arbeitsbereich liegt über dem neutralen pH-Wert mit einem Optimum bei einem pH-Wert von 8,5–9,5.

Physische Form: Lösung in 25 mM Tris-HCl (pH 7,5), 5 mM MgCl2, 0,5 M NaCl, 0,01 % Triton und 50% (v/v) Glycerin.

Definition der Einheit: Eine Einheit (E) ist definiert als ein Anstieg der Extinktion bei 260 nm um 1 Extinktionseinheit (EE) in 30 Minuten bei 37 °C unter Verwendung von 50 μg/ml Kalbsthymus-DNA in einem Puffer mit 25 mM Tris-HCl (pH 8,5, 25 °C), 5 mM MgCl2 und 500 mM NaCl.

Einheitendefinition

Eine Einheit (E) ist definiert als ein Anstieg der Extinktion bei 260 nm um 1 Extinktionseinheit (EE) in 30 Minuten bei 37 °C unter Verwendung von 50 μg/ml Kalbsthymus-DNA in einem Puffer mit 25 mM Tris-HCl (pH 8,5, 25 °C), 5 mM MgCl₂ und 500 mM NaCl.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable