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Merck

N8630

Sigma-Aldrich

Nuclease P1 aus Penicillium citrinum

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

Synonym(e):

3′-Phosphohydrolase, Nuclease 5′-Nucleotidehydrolase, Endonuclease P1

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

CAS-Nummer:
EC-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
NACRES:
NA.54

Biologische Quelle

Penicillium citrinum

Qualitätsniveau

Form

lyophilized powder

Spezifische Aktivität

≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

secondary activity

≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase

Mol-Gew.

42-50 kDa

Verpackung

vial of ≥250 units (using RNA substrate)

Methode(n)

DNA extraction: suitable
DNA purification: suitable

Eignung

suitable for molecular biology

Anwendung(en)

cell analysis

Lagertemp.

2-8°C

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Allgemeine Beschreibung

Nuklease P1 ist eine der bekanntesten einzelstrangspezifischen Nukleasen in der Molekularbiologie; Nuklease P1 ist eine einzelstrangspezifische Endonuklease (von ssDNA oder ssRNA). Nuklease P1 kann zudem einzelsträngige Bereiche in doppelsträngigen Nukleinsäuren spalten.
Nuklease P1 aus Penicillium citrinum ist eine zinkabhängige Endonuklease, die in Gegenwart von Harnstoff in niedrigen Konzentrationen erhöhte Aktivität aufweist. Die selektive Aktivität von Nuklease P1 hat sich in Studien zur Struktur von Nukleinsäuren als nützlich erwiesen.

Anwendung

  • Nuklease P1 spaltet einsträngige DNA oder RNA in 5′-Mononukleotide auf
  • Nuklease P1 unterstützt die Erforschung von DNA-Beschädigung und -Modifikation
  • Nukleinsäuren-Basenzusammensetzung und strukturelle Analyse können mithilfe von Nuklease P1 durchgeführt werden.
  • Nuklease P1 wird seit jeher für die industrielle Produktion von 5′-Mononukleotiden aus Hefe-RNA verwendet.
  • Die Entfernung von Nukleinsäuren via Proteinaufreinigung kann mithilfe von Nuklease P1 durchgeführt werden.
  • Nuklease P1 ist ein wesentliches Reagens für die Entwicklung von Verfahren für Studien mit t-RNA-abhängigen Aminosäuren-Biosynthesen und t-RNA-abhängiger Transamidierung.
  • Nuklease P1 aus Penicillium citrinum wird in einer Studie zur Untersuchung von Kristallstrukturen mithilfe von Ammoniumsulfat oder Polyethylenglykol 4000 als Fällungsmittel eingesetzt.
  • Nuklease P1 wird in einer Studie zur Prüfung eines Verfahrens für die direkte Sequenzanalyse von 20 – 25 Nukleotiden der Endpunkte von mit 5′- oder 3′-Endgruppen markierten RNA verwendet.
  • Nuklease P1 wird verwendet, um die Empfindlichkeit eines 32P-Markierungsverfahrens für die Detektion von DNA-Addukten zu verbessern.
Die optimale Temperatur für das Enzym beträgt ca. 70 °C, bei langer Inkubaktionsdauer ist jedoch eine Temperatur von unter 60 °C besser geeignet. Es ist bei pH-Werten zwischen 5 und 8 stabil.
Die optimale Temperatur für das Enzym beträgt ca. 70 °C, bei langer Inkubaktionsdauer ist jedoch eine Temperatur von unter 60 °C besser geeignet. Es ist bei pH-Werten zwischen 5 und 8 stabil.

Biochem./physiol. Wirkung

Katalysiert die unspezifische endonukleolytische Spaltung von einzelsträngiger DNA und RNA unter Bildung von Nukleosid-5′-Phosphaten und 5′-Phosphooligonukleotiden. Es baut doppelsträngige Nukleinsäuren nicht nennenswert ab, insbesondere nicht in Gegenwart von mehr als 400 mM Natriumchlorid bei einem pH-Wert von 6,0.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Unsere sehr aktive Nuklease P1 wurde auf ihre 3′- 5′- Phosphodiesterase-Aktivität und 3′-Nukleotidase-Aktivität geprüft und ist die aktivste auf dem Markt erhältliche Nuklease P1.

Physikalische Eigenschaften

Ein zinkabhängiges Glycoprotein, das aus 270 Aminosäureresten besteht. Molekulare Masse: 42 – 50 kDa

Einheitendefinition

3′-5′-Phosphodiesterase: Eine Einheit setzt 1,0 μmol säurelösliche Nukleotide aus RNA pro min bei pH-Wert 5,3 und 37 °C frei.
3′-Nukleotidase: Eine Einheit hydrolisiert 1,0 μmol Orthophosphate aus 3′-AMP pro min bei pH-Wert 7,2 und 37 °C.

Piktogramme

Health hazard

Signalwort

Danger

H-Sätze

Gefahreneinstufungen

Resp. Sens. 1

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

Persönliche Schutzausrüstung

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Fahimeh Salehi et al.
Scientific reports, 8(1), 13902-13902 (2018-09-19)
DNA targeting anticancer agents have been very successful in clinic, especially, when used in combinatorial therapy. But unfortunately, they often exhibit high levels of toxicity towards normal cells. Hence, much effort has been put into finding agents with more selectivity
Xiaohuan Jin et al.
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Modified nucleosides on tRNA are critical for decoding processes and protein translation. tRNAs can be modified through 1-methylguanosine (m1G) on position 37; a function mediated by Trm5 homologs. We show that AtTRM5a (At3g56120) is a Trm5 ortholog in Arabidopsis thaliana.
A Lahm et al.
Journal of molecular biology, 215(2), 207-210 (1990-09-20)
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M V Reddy et al.
Carcinogenesis, 7(9), 1543-1551 (1986-09-01)
Exceedingly sensitive procedures are required to detect the presence of covalent DNA adducts in humans exposed to environmental genotoxicants because of low levels of such derivatives (1 adduct in 10(8)-10(10) DNA nucleotides). A 32P-postlabeling assay for detection and quantitation of
Gerard Mazón et al.
Nature structural & molecular biology, 19(9), 964-971 (2012-08-14)
Holliday junctions can be formed during homology-dependent repair of DNA double-strand breaks, and their resolution is essential for chromosome segregation and generation of crossover products. The Mus81-Mms4 and Yen1 nucleases are required for mitotic crossovers between chromosome homologs in Saccharomyces

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