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Roche
DNase I, rekombinant, RNase-frei
from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
bovine pancreas
Qualitätsniveau
Rekombinant
expressed in Pichia pastoris
Form
solution
Mol-Gew.
~39 kDa
Verpackung
pkg of 10,000 U
Hersteller/Markenname
Roche
Optimaler pH-Wert
7.0-8.0
Allgemeine Beschreibung
Rekombinante DNase I ist eine DNA-spezifische Endonuklease. Das Enzym katalysiert die Zersetzung von sowohl doppelsträngiger als auch einzelsträngiger DNA zufällig, indem Phosphodiesterverbindungen zu der DNA hydrolysiert werden, was zu einer Mischung aus Oligo- und Mononukleotiden führt. Alle während des Herstellungsprozesses von DNase I rekombinant verwendeten Materialien sind nicht tierischen Ursprungs, wodurch ein tierversuchsfreies Produkt entsteht.
Inhalt
Inhalt
- Rekombinante DNase I, RNase-frei, 10 E/μl
- Inkubationspuffer, Konzentration 10x
Spezifität
Hitzeinaktivierung: Eine Einheit DNase I, rekombinant, RNase-frei wird durch eine 10-minütige Inkubation bei 75 °C hitzeinaktiviert.
Wichtiger Hinweis: Alternativ kann DNase I, rekombinant, RNase-frei durch eine Phenolextraktion gemäß Standardprotokollen, z. B. Current Protocols in Molecular Biology, inaktiviert und entfernt werden.
Wichtiger Hinweis: Alternativ kann DNase I, rekombinant, RNase-frei durch eine Phenolextraktion gemäß Standardprotokollen, z. B. Current Protocols in Molecular Biology, inaktiviert und entfernt werden.
Anwendung
DNase I, rekombinant, RNase-frei kann zur Zersetzung von DNA in Anwendungen, die empfindlich auf die Gegenwart von DNA reagieren, eingesetzt werden. DNase I wird beispielsweise häufig für Folgendes eingesetzt:
- Entfernen von genomischer DNA aus RNA-Aufbereitungen vor RT-PCR
- Isolieren von DNA-freier RNA nach In-Vitro-Transkriptionsreaktionen
- Durchführen von Nick-Translationen
- Kartierung DNase-empfindlicher Bereiche in eukaryotischer DNA
Leistungsmerkmale und Vorteile
- Eliminiert die DNA-Kontamination aus jeder RNA-Probe
- Enthält keine nachweisbare RNase- oder Proteaseaktivität
- Kann hitzeinaktiviert werden, wodurch die Notwendigkeit für eine organische Extraktion entfällt
- Wird mit einem optimierten Inkubationspuffer geliefert, der eine maximale DNase-Aktivität unterstützt
- Wird durch einen vollständig tierversuchsfreien Prozess hergestellt, um jedes Risiko im Zusammenhang mit Material tierischen Ursprungs zu eliminieren
Verpackung
1 Kit mit 2 Komponenten
Qualität
Abwesenheit von Verunreinigungen: Jede Charge wird geprüft, um die Abwesenheit von RNase und Proteasen nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren sicherzustellen.
Spezifikationen
Glykosylierte Form
Rekombinante DNase I ist heterogen N-glykosyliert, wodurch sie in der Gelelektrophorese als zwei Banden erscheint.
Zweiwertiges Ion erforderlich
DNase I erfordert zweiwertige Kationen für eine maximale Aktivität. Die DNA-spezifische Endonuklease wird durch Ionen wie Magnesiumionen aktiviert und durch Calciumionen stimuliert. Daher wird das Enzym durch Metallchelatbildner wie EDTA gehemmt.
Rekombinante DNase I ist heterogen N-glykosyliert, wodurch sie in der Gelelektrophorese als zwei Banden erscheint.
Zweiwertiges Ion erforderlich
DNase I erfordert zweiwertige Kationen für eine maximale Aktivität. Die DNA-spezifische Endonuklease wird durch Ionen wie Magnesiumionen aktiviert und durch Calciumionen stimuliert. Daher wird das Enzym durch Metallchelatbildner wie EDTA gehemmt.
Einheitendefinition
Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die in 1 ml bei 260 nm eine Steigerung der Absorption von 0,001/Minute unter Assaybedingungen bewirkt.
Assaybedingungen:
Die Volumenaktivität wird gemäß der folgenden Assaymischung bestimmt. 100 μg Kälberthymus-DNA wird in 2,5 ml 1x Inkubationspuffer mit 40 bis 70 Einheiten DNase I, rekombinant, RNase-frei bei +25 °C inkubiert. Die Steigerung der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Assaybedingungen:
Die Volumenaktivität wird gemäß der folgenden Assaymischung bestimmt. 100 μg Kälberthymus-DNA wird in 2,5 ml 1x Inkubationspuffer mit 40 bis 70 Einheiten DNase I, rekombinant, RNase-frei bei +25 °C inkubiert. Die Steigerung der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Zweiwertige Metallionen
Arbeitslösung: Lagerpuffer: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 2 mM MgCl2, 1 mM Dithioerythritol, 0,1 mg/ml Pefabloc SC, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Inkubationspuffer (10x): 400 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 60 mM MgCl2, 10 mM CaCl2, pH-Wert 7,9
Enzymverdünnungspuffer: 25 mM Tris-HCl, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Arbeitslösung: Lagerpuffer: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 2 mM MgCl2, 1 mM Dithioerythritol, 0,1 mg/ml Pefabloc SC, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Inkubationspuffer (10x): 400 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 60 mM MgCl2, 10 mM CaCl2, pH-Wert 7,9
Enzymverdünnungspuffer: 25 mM Tris-HCl, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Lagerung und Haltbarkeit
Unverdünnt bei -15 bis -25 °C aufbewahren; Lagerpuffer bei 4 °C.
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
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